| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-16页 |
| ·猪卵母细胞成熟过程 | 第12页 |
| ·猪卵母细胞的孤雌激活 | 第12-13页 |
| ·体细胞核移植 | 第13-16页 |
| 第二章 猪卵母细胞成熟培养与孤雌激活 | 第16-22页 |
| ·试验材料 | 第16-18页 |
| ·卵巢来源 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·试剂配制方法 | 第16-18页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-19页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟培养 | 第18页 |
| ·卵母细胞孤雌激活 | 第18-19页 |
| ·结果 | 第19-20页 |
| ·电场强度与脉冲时间对孤雌胚胎发育的影响 | 第19页 |
| ·渗透压对孤雌胚胎发育的影响 | 第19-20页 |
| ·6-DMAP 对孤雌胚胎发育的影响 | 第20页 |
| ·讨论 | 第20-22页 |
| 第三章 转RFP 荧光基因猪胎儿成纤维细胞系的建立 | 第22-39页 |
| ·试验材料 | 第22-24页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试剂准备 | 第22页 |
| ·组织块洗液 | 第22页 |
| ·细胞洗液(D-PBS) | 第22页 |
| ·细胞培养液 | 第22页 |
| ·转染用细胞培养液 | 第22-23页 |
| ·细胞消化液 | 第23页 |
| ·细胞筛选培养液 | 第23页 |
| ·细胞冻存液 | 第23页 |
| ·LB 细菌培养基 | 第23页 |
| ·脂质体转染试剂盒 | 第23页 |
| ·质粒DNA 提取试剂盒 | 第23页 |
| ·DNA 凝胶片段回收试剂盒 | 第23页 |
| ·体细胞克隆所需试剂 | 第23-24页 |
| ·试验耗材 | 第24页 |
| ·试验仪器 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-29页 |
| ·五指山猪胎儿成纤维细胞原代制备 | 第24页 |
| ·胰酶消化法 | 第24-25页 |
| ·组织块法 | 第25页 |
| ·细胞传代培养 | 第25页 |
| ·细胞冻存及复苏 | 第25-26页 |
| ·RFP-DNA 片段的制备 | 第26页 |
| ·细胞脂质体转染 | 第26页 |
| ·红色荧光基因(RFP)细胞的筛选 | 第26-27页 |
| ·细胞克隆法 | 第27页 |
| ·无限稀释法 | 第27页 |
| ·显微操作针的制备 | 第27页 |
| ·去核 | 第27-28页 |
| ·移核 | 第28页 |
| ·融合 | 第28-29页 |
| ·试验结果与讨论 | 第29-39页 |
| ·五指山猪胎儿原代成纤维细胞制备 | 第29-31页 |
| ·RFP-DNA 的提取与回收 | 第31-32页 |
| ·红色荧光细胞的筛选分析 | 第32-34页 |
| ·卵母细胞体外成熟培养 | 第34-35页 |
| ·转EGFP 基因体细胞克隆胚胎的制备 | 第35-39页 |
| 第四章 结论 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第39页 |
| ·本研究的创新点 | 第39页 |
| ·本研究的不足与下一步试验计划 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简历 | 第46页 |