摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 绪论 | 第12-16页 |
·猪卵母细胞成熟过程 | 第12页 |
·猪卵母细胞的孤雌激活 | 第12-13页 |
·体细胞核移植 | 第13-16页 |
第二章 猪卵母细胞成熟培养与孤雌激活 | 第16-22页 |
·试验材料 | 第16-18页 |
·卵巢来源 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·试剂配制方法 | 第16-18页 |
·仪器 | 第18页 |
·试验方法 | 第18-19页 |
·猪卵母细胞体外成熟培养 | 第18页 |
·卵母细胞孤雌激活 | 第18-19页 |
·结果 | 第19-20页 |
·电场强度与脉冲时间对孤雌胚胎发育的影响 | 第19页 |
·渗透压对孤雌胚胎发育的影响 | 第19-20页 |
·6-DMAP 对孤雌胚胎发育的影响 | 第20页 |
·讨论 | 第20-22页 |
第三章 转RFP 荧光基因猪胎儿成纤维细胞系的建立 | 第22-39页 |
·试验材料 | 第22-24页 |
·材料 | 第22页 |
·试剂准备 | 第22页 |
·组织块洗液 | 第22页 |
·细胞洗液(D-PBS) | 第22页 |
·细胞培养液 | 第22页 |
·转染用细胞培养液 | 第22-23页 |
·细胞消化液 | 第23页 |
·细胞筛选培养液 | 第23页 |
·细胞冻存液 | 第23页 |
·LB 细菌培养基 | 第23页 |
·脂质体转染试剂盒 | 第23页 |
·质粒DNA 提取试剂盒 | 第23页 |
·DNA 凝胶片段回收试剂盒 | 第23页 |
·体细胞克隆所需试剂 | 第23-24页 |
·试验耗材 | 第24页 |
·试验仪器 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-29页 |
·五指山猪胎儿成纤维细胞原代制备 | 第24页 |
·胰酶消化法 | 第24-25页 |
·组织块法 | 第25页 |
·细胞传代培养 | 第25页 |
·细胞冻存及复苏 | 第25-26页 |
·RFP-DNA 片段的制备 | 第26页 |
·细胞脂质体转染 | 第26页 |
·红色荧光基因(RFP)细胞的筛选 | 第26-27页 |
·细胞克隆法 | 第27页 |
·无限稀释法 | 第27页 |
·显微操作针的制备 | 第27页 |
·去核 | 第27-28页 |
·移核 | 第28页 |
·融合 | 第28-29页 |
·试验结果与讨论 | 第29-39页 |
·五指山猪胎儿原代成纤维细胞制备 | 第29-31页 |
·RFP-DNA 的提取与回收 | 第31-32页 |
·红色荧光细胞的筛选分析 | 第32-34页 |
·卵母细胞体外成熟培养 | 第34-35页 |
·转EGFP 基因体细胞克隆胚胎的制备 | 第35-39页 |
第四章 结论 | 第39-40页 |
·结论 | 第39页 |
·本研究的创新点 | 第39页 |
·本研究的不足与下一步试验计划 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简历 | 第46页 |