摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词 | 第6-7页 |
基因对应蛋白质名称表 | 第7-8页 |
目录 | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-18页 |
1.1 小球藻的简介 | 第10页 |
1.2 小球藻碳代谢的概述 | 第10-12页 |
1.2.1 碳元素的同化途径简介 | 第10-11页 |
1.2.2 碳元素对小球藻的影响 | 第11-12页 |
1.3 小球藻氮代谢的概述 | 第12-14页 |
1.3.1 氮元素的同化途径简介 | 第12-13页 |
1.3.2 氮元素对小球藻的影响研究进展 | 第13-14页 |
1.4 小球藻油脂积累的研究现状 | 第14-16页 |
1.4.1 油脂的积累途径 | 第14-15页 |
1.4.2 影响油脂积累的因素的研究进展 | 第15-16页 |
1.5 用于研究藻细胞基因转录水平的方法 | 第16-17页 |
1.5.1 荧光定量 PCR 法 | 第16页 |
1.5.2 抑制差减杂交技术 | 第16-17页 |
1.5.3 转录组测序技术 | 第17页 |
1.6 研究意义及主要研究内容 | 第17-18页 |
1.6.1 研究意义 | 第17页 |
1.6.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 菌种 | 第18页 |
2.1.2 常用试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 培养基 | 第19页 |
2.2 藻细胞培养方法 | 第19-20页 |
2.2.1 基本培养方法 | 第19页 |
2.2.2 添加不同氮源的培养 | 第19页 |
2.2.3 含氮培养(BG11) | 第19页 |
2.2.4 贫氮培养(BG11-N) | 第19-20页 |
2.2.5 添加代谢中间体和 TCA 循环抑制剂的培养 | 第20页 |
2.3 荧光定量 PCR | 第20-22页 |
2.3.1 藻细胞总 RNA 的提取 | 第20页 |
2.3.2 第一链 cDNA 的合成 | 第20页 |
2.3.3 引物设计及合成 | 第20-22页 |
2.3.4 荧光定量 PCR 实验 | 第22页 |
2.4 分析方法 | 第22-26页 |
2.4.1 藻细胞生物量及比生长速率的测定 | 第22-23页 |
2.4.2 小球藻油脂含量的测定 | 第23-24页 |
2.4.3 硝态氮浓度的检测 | 第24页 |
2.4.4 荧光定量 PCR 实验数据处理 | 第24-25页 |
2.4.5 数据分析 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-42页 |
3.1 氮源变化对 Chlorella vulgaris C95 油脂积累影响的研究 | 第26-29页 |
3.1.1 不同氮源底物对 C.vulgaris C95 生长影响的比较 | 第26-27页 |
3.1.2 氮源底物浓度对 C.vulgaris C95 油脂积累的影响 | 第27-28页 |
3.1.3 含氮培养与贫氮培养的选择 | 第28-29页 |
3.2 荧光定量 PCR 用于 C.vulgaris C95 油脂合成基因转录水平的基础研究 | 第29-36页 |
3.2.1 C.vulgaris C95 涉及油脂合成的碳氮代谢关联基因的选择 | 第29-30页 |
3.2.2 C.vulgaris C95 总 RNA 的 cDNA 扩增与荧光定量 PCR 分析转录差异 | 第30-32页 |
3.2.3 荧光定量 PCR 分析碳氮代谢基因转录水平与油脂积累的关系 | 第32-36页 |
3.3 基于碳代谢调节促进 C.vulgaris C95 油脂的合成 | 第36-42页 |
3.3.1 不同培养阶段添加代谢中间产物前体对油脂影响的比较 | 第37-38页 |
3.3.2 不同 TCA 循环抑制剂对 C.vulgaris C95 油脂积累的影响 | 第38-39页 |
3.3.3 代谢前体与 TCA 抑制剂的组合添加促进 C.vulgaris C95 油脂合成 | 第39-42页 |
主要结论与展望 | 第42-44页 |
主要结论 | 第42-43页 |
展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51-52页 |
附录2:目的基因引物的扩增曲线及熔解曲线 | 第52-57页 |