缩略词 | 第7-8页 |
第一篇 绪论 | 第8-40页 |
第一章 RNA干涉及其在抗病毒治疗中的应用研究进展 | 第8-29页 |
第二章 乙型肝炎基因治疗策略的研究进展 | 第29-38页 |
第三章 前言 | 第38-40页 |
第二篇 实验研究 | 第40-77页 |
第一章 HepG2.2.15细胞培养及序列测定 | 第40-52页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第40-47页 |
一、 实验材料 | 第40-43页 |
二、 实验方法 | 第43-47页 |
(一) HepG2.2.15细胞的传代与培养 | 第43页 |
(二) HepG2.2.15细胞内HBV S区序列测定 | 第43-46页 |
(三) HepG2.2.15细胞内HBV preC/C区序列测定 | 第46-47页 |
第二节 结果 | 第47-52页 |
一、 HepG2.2.15细胞培养及病毒抗原分泌规律 | 第47-48页 |
二、 HepG2.2.15细胞内HBV S、preC/C区PCR结果 | 第48-49页 |
三、 酶切结果 | 第49-50页 |
四、 测序结果 | 第50-52页 |
第二章 应用siRNA表达框架体系抑制HBV基因表达 | 第52-77页 |
第一节 实验材料和实验方法 | 第52-63页 |
一、 实验材料 | 第52-54页 |
二、 实验方法 | 第54-63页 |
(一) siRNA表达框架体系 | 第54-55页 |
(二) PCR产物转染HepG2.2.15细胞 | 第55-56页 |
(三) ELISA法检测HBsAg和HBeAg | 第56-58页 |
(四) Western Blot检测荧光素酶表达 | 第58-60页 |
(五) 斑点杂交检测HBV DNA | 第60-63页 |
第二节 结果 | 第63-77页 |
一、 实验设计 | 第63页 |
二、 靶位点选择及作用位点 | 第63-64页 |
三、 siRNA表达框架体系的下游引物设计 | 第64-65页 |
四、 PCR及产物纯化结果 | 第65-66页 |
五、 转染条件的优化 | 第66-67页 |
六、 siRNA抑制HBV基因表达和复制的检测 | 第67-75页 |
七、 siRNA与脱氧核酶的抑制作用比较 | 第75-76页 |
八、 细胞毒检测结果 | 第76-77页 |
第三篇 讨论 | 第77-88页 |
结论 | 第88-89页 |
创新点与意义 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
攻读期间发表论文 | 第102-4页 |
中文摘要 | 第4-107页 |
英文摘要 | 第107页 |
致谢 | 第113-114页 |
吉林大学博士学位论文原创性声明 | 第114-115页 |