中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第11-14页 |
第1章 绪论 | 第14-37页 |
1.1 玉米籽粒发育的生物学 | 第14-21页 |
1.1.1 植物种子的发育 | 第14-16页 |
1.1.2 玉米籽粒的发育 | 第16-17页 |
1.1.3 玉米籽粒的发育过程中的淀粉合成代谢 | 第17-20页 |
1.1.4 玉米籽粒发育过程中的蛋白质蛋白质相互作用 | 第20-21页 |
1.2 14-3-3 蛋白的研究进展 | 第21-29页 |
1.2.1 14-3-3 蛋白的结构 | 第22-24页 |
1.2.2 14-3-3 蛋白的功能 | 第24-26页 |
1.2.3 植物 14-3-3 蛋白家族 | 第26-28页 |
1.2.4 植物种子中的 14-3-3 蛋白 | 第28页 |
1.2.5 玉米 14-3-3 蛋白研究进展 | 第28-29页 |
1.3 蛋白质相互作用组学常用研究方法 | 第29-36页 |
1.3.1 亲和 Pull-down 技术 | 第29-30页 |
1.3.2 免疫共沉淀技术 | 第30-31页 |
1.3.3 蛋白质芯片技术 | 第31页 |
1.3.4 串联亲和纯化技术 | 第31-32页 |
1.3.5 酵母双杂交技术 | 第32-34页 |
1.3.6 双分子荧光互补技术 | 第34-36页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第36-37页 |
第2章 实验材料与方法 | 第37-63页 |
2.1 实验材料 | 第37-45页 |
2.1.1 植物材料 | 第37页 |
2.1.2 菌种及质粒 | 第37页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第37-39页 |
2.1.4 主要生化试剂与分子生物学试剂 | 第39-41页 |
2.1.5 常用溶液及培养基 | 第41-45页 |
2.2 实验方法 | 第45-63页 |
2.2.1 玉米 14-3-3 蛋白家族生物信息学分析 | 第45页 |
2.2.2 玉米籽粒发育期的全部转录本与 AU 和 GF 亚型的相关性分析 | 第45-46页 |
2.2.3 玉米 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的克隆和表达载体构建 | 第46-50页 |
2.2.4 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的重组蛋白诱导表达和纯化 | 第50-52页 |
2.2.5 亲和层析捕获玉米籽粒发育过程中 AU 和 GF 亚型的互作蛋白 | 第52-54页 |
2.2.6 分离和鉴定 AU 和 GF 亚型的互作蛋白 | 第54-57页 |
2.2.7 利用酵母双杂交技术验证捕获的互作蛋白 | 第57-61页 |
2.2.8 利用转录本相关性分析验证捕获到的互作蛋白质 | 第61-62页 |
2.2.9 对 AU 和 GF 亚型的互作蛋白进行生物信息学分析 | 第62-63页 |
第3章 研究结果 | 第63-91页 |
3.1 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育过程中具有丰富的表达量 | 第63-68页 |
3.1.1 玉米基因组水平 14-3-3 蛋白家族生物信息学分析 | 第63-65页 |
3.1.2 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的生物信息学分析 | 第65-68页 |
3.2 在玉米籽粒的发育过程中捕获到77个 AU和 GF 亚型的互作蛋白质 | 第68-83页 |
3.2.1 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的克隆 | 第68-70页 |
3.2.2 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的表达载体构建 | 第70-71页 |
3.2.3 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的表达和纯化 | 第71-72页 |
3.2.4 利用二维电泳分离和展示 AU 和 GF 亚型的互作蛋白 | 第72-74页 |
3.2.5 质谱鉴定相互作用蛋白 | 第74-78页 |
3.2.6 利用酵母双杂交验证 AU 和 GF 与捕获蛋白的相互作用 | 第78-81页 |
3.2.7 AU,GF 亚型与互作蛋白质的转录本在玉米籽粒发育期的关联性分析 | 第81-83页 |
3.3 捕获到的 AU 和 GF 亚型的互作蛋白几乎参与玉米籽粒发育的全部生理过程 | 第83-85页 |
3.4 超过 60%的 AU 和 GF 亚型的共同互作蛋白质在玉米籽粒的发育过程中参与糖代谢和蛋白质运输储存过程 | 第85-87页 |
3.5 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒的发育过程展现出差异的功能调控 | 第87-91页 |
第4章 讨论 | 第91-96页 |
4.1 实验体系的建立 | 第91-92页 |
4.2 AU 和 GF 特异性结合的功能蛋白分析 | 第92-93页 |
4.3 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育的关键代谢中的功能 | 第93-94页 |
4.4 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育过程中的功能调控模式 | 第94-96页 |
第5章 结论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-107页 |
附录 | 第107-112页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第112-114页 |
致谢 | 第114页 |