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14-3-3蛋白在玉米籽粒发育过程中的功能机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第11-14页
第1章 绪论第14-37页
    1.1 玉米籽粒发育的生物学第14-21页
        1.1.1 植物种子的发育第14-16页
        1.1.2 玉米籽粒的发育第16-17页
        1.1.3 玉米籽粒的发育过程中的淀粉合成代谢第17-20页
        1.1.4 玉米籽粒发育过程中的蛋白质蛋白质相互作用第20-21页
    1.2 14-3-3 蛋白的研究进展第21-29页
        1.2.1 14-3-3 蛋白的结构第22-24页
        1.2.2 14-3-3 蛋白的功能第24-26页
        1.2.3 植物 14-3-3 蛋白家族第26-28页
        1.2.4 植物种子中的 14-3-3 蛋白第28页
        1.2.5 玉米 14-3-3 蛋白研究进展第28-29页
    1.3 蛋白质相互作用组学常用研究方法第29-36页
        1.3.1 亲和 Pull-down 技术第29-30页
        1.3.2 免疫共沉淀技术第30-31页
        1.3.3 蛋白质芯片技术第31页
        1.3.4 串联亲和纯化技术第31-32页
        1.3.5 酵母双杂交技术第32-34页
        1.3.6 双分子荧光互补技术第34-36页
    1.4 本研究的目的及意义第36-37页
第2章 实验材料与方法第37-63页
    2.1 实验材料第37-45页
        2.1.1 植物材料第37页
        2.1.2 菌种及质粒第37页
        2.1.3 主要实验仪器第37-39页
        2.1.4 主要生化试剂与分子生物学试剂第39-41页
        2.1.5 常用溶液及培养基第41-45页
    2.2 实验方法第45-63页
        2.2.1 玉米 14-3-3 蛋白家族生物信息学分析第45页
        2.2.2 玉米籽粒发育期的全部转录本与 AU 和 GF 亚型的相关性分析第45-46页
        2.2.3 玉米 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的克隆和表达载体构建第46-50页
        2.2.4 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的重组蛋白诱导表达和纯化第50-52页
        2.2.5 亲和层析捕获玉米籽粒发育过程中 AU 和 GF 亚型的互作蛋白第52-54页
        2.2.6 分离和鉴定 AU 和 GF 亚型的互作蛋白第54-57页
        2.2.7 利用酵母双杂交技术验证捕获的互作蛋白第57-61页
        2.2.8 利用转录本相关性分析验证捕获到的互作蛋白质第61-62页
        2.2.9 对 AU 和 GF 亚型的互作蛋白进行生物信息学分析第62-63页
第3章 研究结果第63-91页
    3.1 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育过程中具有丰富的表达量第63-68页
        3.1.1 玉米基因组水平 14-3-3 蛋白家族生物信息学分析第63-65页
        3.1.2 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的生物信息学分析第65-68页
    3.2 在玉米籽粒的发育过程中捕获到77个 AU和 GF 亚型的互作蛋白质第68-83页
        3.2.1 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的克隆第68-70页
        3.2.2 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型基因的表达载体构建第70-71页
        3.2.3 14-3-3 蛋白 AU 和 GF 亚型的表达和纯化第71-72页
        3.2.4 利用二维电泳分离和展示 AU 和 GF 亚型的互作蛋白第72-74页
        3.2.5 质谱鉴定相互作用蛋白第74-78页
        3.2.6 利用酵母双杂交验证 AU 和 GF 与捕获蛋白的相互作用第78-81页
        3.2.7 AU,GF 亚型与互作蛋白质的转录本在玉米籽粒发育期的关联性分析第81-83页
    3.3 捕获到的 AU 和 GF 亚型的互作蛋白几乎参与玉米籽粒发育的全部生理过程第83-85页
    3.4 超过 60%的 AU 和 GF 亚型的共同互作蛋白质在玉米籽粒的发育过程中参与糖代谢和蛋白质运输储存过程第85-87页
    3.5 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒的发育过程展现出差异的功能调控第87-91页
第4章 讨论第91-96页
    4.1 实验体系的建立第91-92页
    4.2 AU 和 GF 特异性结合的功能蛋白分析第92-93页
    4.3 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育的关键代谢中的功能第93-94页
    4.4 AU 和 GF 亚型在玉米籽粒发育过程中的功能调控模式第94-96页
第5章 结论第96-98页
参考文献第98-107页
附录第107-112页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第112-114页
致谢第114页

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