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虾肝肠胞虫Taqman荧光定量PCR检测技术的建立及其与对虾生长相关性的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-9页
第一章 引言第12-19页
    1.1 虾肝肠孢虫的生物学特征第12-14页
    1.2 偷死野田村病毒的生物学特征第14-15页
    1.3 分子学检测方法第15-17页
        1.3.1 聚合酶链式反应(PCR)技术第15-16页
        1.3.2 实时荧光定量PCR第16-17页
        1.3.3 交叉引物恒温扩增技术第17页
    1.4 原核表达系统第17-19页
第二章 Taqman探 针荧光定量PCR快 速检测虾肝肠胞虫 (Enterocytozoonhepatopenaei)的研究第19-38页
    2.1. 材料与方法第20-26页
        2.1.1 材料来源第20页
        2.1.2 主要实验仪器及试剂第20页
        2.1.3 肝胰腺总DNA (HpDNA)提取第20-22页
        2.1.4 EHP引物设计及常规PCR扩增第22页
        2.1.5 标准品模板的制备第22-24页
        2.1.6 Taqman qPCR-EHP方法的建立以及体系的优化第24页
        2.1.7 Taqman qPCR-EHP的标准曲线绘制第24页
        2.1.8 Taqman qPCR-EHP引物的特异性分析第24-25页
        2.1.9 Taqman探针qPCR-EHP与常规PCR灵敏度对比第25页
        2.1.10 Taqman qPCR-EHP与套式PCR灵敏度对比第25页
        2.1.11 实际样品检测结果比较第25页
        2.1.12 肝胰腺中EHP病毒载量与对虾生长关系的测定第25-26页
    2.2 结果第26-36页
        2.2.1 Taqman qPCR-EHP引物的设计第26页
        2.2.2 Taqman qPCR-EHP扩增条件的建立第26-27页
        2.2.3 Taqman qPCR-EHP特异性检测第27-29页
        2.2.4 Taqman qPCR-EHP灵敏度的确立第29页
        2.2.5 Taqman qPCR-EHP标准曲线的构建第29-30页
        2.2.6 Taqman qPCR-EHP检测方法重复性分析结果第30-31页
        2.2.7 Taqman qPCR与常规PCR灵敏度的比较第31-32页
        2.2.8 实际样品检测中Taqman qPCR与套式PCR灵敏度的比较第32-33页
        2.2.9 Taqman qPCR-EHP与套式PCR、SYBR Green I qPCR-EHP的诊断特异性和诊断灵敏度分析第33-34页
        2.2.10 肝胰腺中EHP病毒载量与对虾生长关系的Taqman qPCR-EHP检测第34-36页
    2.3 讨论第36-38页
第三章 检出虾肝肠孢虫(Enterocytozoon hepatopenaei)的凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)群体的体长和体重关系第38-49页
    3.1. 材料与方法第39-41页
        3.1.1 材料来源第39-40页
        3.1.2 体长和体重测量第40页
        3.1.3 样品Taqman qPCR检测第40页
        3.1.4 体重-体长关系分析第40-41页
        3.1.5 群体体重和体长变异系数分析第41页
        3.1.6 体重偏离估测值分析第41页
    3.2 结果第41-45页
        3.2.1 各群体的EHP检测结果第41-42页
        3.2.2 凡纳滨对虾群体体长和体重测量第42页
        3.2.3 各群体凡纳滨对虾样品体长和体重的关系第42-44页
        3.2.4 群体间体重偏离估测值分析第44-45页
        3.2.5 群体间变异系数的比较第45页
    3.3 讨论第45-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页

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