摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1 趋化因子概况 | 第13-15页 |
1.1 趋化因子结构及其分类 | 第13-14页 |
1.2 CXC趋化因子 | 第14-15页 |
2 趋化因子受体概况 | 第15-17页 |
2.1 趋化因子受体结构及其分类 | 第15-16页 |
2.2 趋化因子受体的信号转导机制 | 第16页 |
2.3 趋化因子与趋化因子受体CCL20/CCR6的研究进展 | 第16-17页 |
3 硬骨鱼类中趋化因子及其受体的研究 | 第17-19页 |
3.1 鱼类中CXC趋化因子的研究 | 第18页 |
3.2 鱼类中CCR趋化因子受体的研究 | 第18-19页 |
4 趋化因子及其受体的功能 | 第19-23页 |
4.1 趋化因子及其受体在免疫中的作用 | 第19页 |
4.2 趋化因子及其受体在生理和病理反应中的作用 | 第19-23页 |
4.2.1 趋化因子及其受体在淋巴细胞的生成及归巢中的作用 | 第19-20页 |
4.2.2 趋化因子及其受体在抗原提呈与T、B淋巴细胞的活化中的作用 | 第20-21页 |
4.2.3 趋化因子及其受体促进T细胞的极化 | 第21页 |
4.2.4 在损伤愈合中的作用 | 第21页 |
4.2.5 在炎症反应中的作用 | 第21-22页 |
4.2.6 在肿瘤中的作用 | 第22页 |
4.2.7 趋化因子及其受体在抗HIV感染中的作用 | 第22-23页 |
第二章 牙鲆CXCL9趋化因子的克隆、鉴定与表达分析 | 第23-38页 |
1 实验材料 | 第23-24页 |
1.1 实验用鱼 | 第23页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
2 实验方法 | 第24-32页 |
2.1 组织样本采集 | 第24页 |
2.2 牙鲆各组织RNA的提取 | 第24-25页 |
2.3 cDNA第一链的合成 | 第25页 |
2.4 CXCL9基因cDNA克隆验证 | 第25-31页 |
2.4.1 中间序列验证RCP引物和RACE引物合成 | 第25-26页 |
2.4.2 CXCL9中间序列验证 | 第26-27页 |
2.4.3 PCR产物纯化 | 第27页 |
2.4.4 目的片段的连接与转化 | 第27-28页 |
2.4.5 阳性克隆的检测与测序 | 第28-29页 |
2.4.6 3'RACE-ready cDNA和 5'RACE-ready cDNA的制备 | 第29页 |
2.4.7 大菱鲆趋化因子cDNA 5'和 3'末端的快速扩增(RACE) | 第29-31页 |
2.5 序列和进化分析 | 第31页 |
2.6 实时荧光相对定量PCR | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-36页 |
2.1 牙鲆CXCL9基因的克隆 | 第32-33页 |
2.2 牙鲆CXCL9基因的序列比对及同源性分析 | 第33-34页 |
2.3 实时荧光定量PCR检测结果 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 牙鲆两种新型单外显子PoCCR6A和PoCCR6B基因的克隆和表达分析 | 第38-52页 |
1 实验材料 | 第39-41页 |
1.1 实验用鱼 | 第39页 |
1.2 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第39页 |
1.3 总DNA的提取 | 第39-40页 |
1.4 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B的克隆 | 第40-41页 |
1.5 序列分析和进化树分析 | 第41页 |
1.6 PoCCR6A和PoCCR6B的组织表达 | 第41页 |
1.7 PoCCR6A和PoCCR6B在细菌感染后的表达 | 第41页 |
1.8 数据分析 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-51页 |
2.1 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B基因的克隆分析 | 第41-43页 |
2.2 序列分析和进化树分析 | 第43-48页 |
2.3 牙鲆PoCCR6A和PoCCR6B基因的组织表达分析 | 第48页 |
2.4 PoCCR6A和PoCCR6B趋化因子受体在鳗弧菌感染后组织中的表达分析 | 第48-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
总结与展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-64页 |
硕士期间科研成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |