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豆野螟性信息素结合蛋白MvitPBPs基因的鉴定及功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1. 前言第12-27页
    1.1 昆虫触角感受器及嗅觉感受机制第12-13页
    1.2 昆虫性信息素第13-15页
        1.2.1 信息素的生物合成第13-14页
        1.2.2 性信息素成分第14-15页
    1.3 气味结合蛋白研究进展第15-21页
        1.3.1 性信息素结合蛋白的种类第16-18页
        1.3.2 性信息素结合蛋白的组织分布第18页
        1.3.3 性信息素结合蛋白的结合特性及功能第18-19页
        1.3.4 PBPs的构象及pH影响第19-21页
    1.4 昆虫化学感受蛋白(CSPs)研究近况第21-22页
    1.5 性信息素气味受体研究近况第22-24页
    1.6 豆野螟研究近况第24-25页
    1.7 本研究的目的及意义第25-27页
2. 材料与方法第27-38页
    2.1 实验材料第27-28页
        2.1.1 实验昆虫第27页
        2.1.2 实验试剂第27页
        2.1.3 实验主要仪器第27-28页
        2.1.4 引物序列第28页
    2.2 实验方法第28-38页
        2.2.1 豆野螟各组织及整体材料的获取第28-29页
        2.2.2 豆野螟总RNA的提取第29页
        2.2.3 基因的获取第29-31页
            2.2.3.1 cDNA第一链的合成以及PCR扩增第29页
            2.2.3.2 PCR产物的回收第29-30页
            2.2.3.3 回收目的片段的连接第30页
            2.2.3.4 连接产物的转化第30-31页
            2.2.3.5 阳性检测第31页
            2.2.3.6 序列分析第31页
        2.2.4 MvitPBPs的组织及全虫表达分析第31-32页
            2.2.4.1 豆野螟各组织的RNA提取第31-32页
            2.2.4.2 Real-Time PCR检测相对表达量第32页
        2.2.5 Mv-BPs的原核表达及纯化第32-36页
            2.2.5.1 载体构建第32-33页
            2.2.5.2 重组质粒的检测第33-34页
                2.2.5.2.1 质粒的提取第33页
                2.2.5.2.2 重组质粒的双酶切验证第33-34页
            2.2.5.3 重组质粒PET32α(+)-PBPs的试表达第34-35页
            2.2.5.4 重组质粒PET32α(+)-PBPs的大量表达第35页
            2.2.5.5 重组蛋白的纯化第35-36页
            2.2.5.6 肠激酶酶切第36页
        2.2.6 荧光特性实验第36-38页
3. 结果与分析第38-53页
    3.1 豆野螟MvitPBPs克隆及序列分析第38-39页
        3.1.1 豆野螟总RNA的提取第38页
        3.1.2 豆野螟MvitPBPs克隆与分析第38-39页
    3.2 多重序列比对、立体模型以及进化分析第39-44页
    3.3 MvitPBPs的组织和全虫表达水平分析第44-45页
    3.4 豆野螟重组蛋白pET32α(+)-PBPs诱导表达、纯化第45-46页
    3.5 荧光竞争结合实验第46-53页
4. 讨论第53-56页
参考文献第56-66页
致谢第66页

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