摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1. 前言 | 第13-20页 |
1.1 昆虫的先天性免疫 | 第13-16页 |
1.1.1 昆虫体液免疫 | 第13-14页 |
1.1.2 昆虫细胞免疫 | 第14-16页 |
1.2 肽聚糖识别蛋白 | 第16-19页 |
1.2.1 PGN的化学组成和结构 | 第16-17页 |
1.2.2 PGRPs的结构 | 第17-18页 |
1.2.3 PGRPs在昆虫先天性免疫中的作用 | 第18-19页 |
1.3 本研究的背景和意义 | 第19-20页 |
2. 材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验对象 | 第20页 |
2.1.2 主要实验药品、酶、试剂和试剂盒 | 第20页 |
2.1.3 主要实验仪器和设备 | 第20-21页 |
2.1.4 引物序列 | 第21页 |
2.1.5 常用缓冲液和培养基的配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-38页 |
2.2.1 棉铃虫四种免疫组织的采集 | 第22-23页 |
2.2.2 组织总RNA的提取 | 第23页 |
2.2.3 总RNA反转录合成cDNA第一链 | 第23-24页 |
2.2.4 HaPGRP-D基因的克隆 | 第24-26页 |
2.2.5 HaPGRP-D的组织分布 | 第26页 |
2.2.6 检测外源物刺激后血细胞中HaPGRP-D基因表达量的变化 | 第26-27页 |
2.2.7 重组蛋白rHaPGRP-D的原核表达与纯化 | 第27-31页 |
2.2.8 rHaPGRP-D的体外功能分析 | 第31-38页 |
3. 实验结果与分析 | 第38-48页 |
3.1 HaPGRP-D基因的克隆及序列分析 | 第38-40页 |
3.2 HaPGRP-D基因的组织特异性表达分析 | 第40页 |
3.3 外源物刺激后血细胞中HaPGRP-D的表达量变化 | 第40-41页 |
3.4 rHaPGRP-D的表达和纯化 | 第41-42页 |
3.5 HaPGRP-D的体外功能分析 | 第42-48页 |
3.5.1 HaPGRP-D与细菌的结合活性 | 第42页 |
3.5.2 HaPGRP-D对细菌的凝集活性 | 第42-44页 |
3.5.3 HaPGRP-D的酰胺酶活性分析 | 第44页 |
3.5.4 HaPGRP-D的杀菌活性分析 | 第44-45页 |
3.5.5 HaPGRP-D促进血细胞的吞噬作用 | 第45页 |
3.5.6 HaPGRP-D促进血细胞的包囊作用 | 第45-46页 |
3.5.7 HaPGRP-D结合血细胞 | 第46-48页 |
4. 讨论 | 第48-52页 |
4.1 HaPGRP-D序列分析 | 第48页 |
4.2 HaPGRP-D识别细菌 | 第48页 |
4.3 HaPGRP-D的酰胺酶活性 | 第48页 |
4.4 HaPGRP-D的杀菌活性 | 第48-49页 |
4.5 HaPGRP-D的Zn~(2+)依赖性 | 第49页 |
4.6 HaPGRP-D参与调控棉铃虫血细胞的吞噬作用 | 第49-50页 |
4.7 HaPGRP-D参与调控棉铃虫血细胞的包囊作用 | 第50页 |
4.8 HaPGRP-D与棉铃虫血细胞的结合 | 第50页 |
4.9 小结 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |