| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 一、引言 | 第14-29页 |
| 1.1 乙烯与棉纤维伸长 | 第14-15页 |
| 1.2 乙烯的生物合成及调控 | 第15-16页 |
| 1.3 乙烯信号转导 | 第16-18页 |
| 1.4 乙烯的生物学功能 | 第18-21页 |
| 1.4.1 乙烯与植物生长发育 | 第18-19页 |
| 1.4.2 乙烯与生物胁迫 | 第19-20页 |
| 1.4.3 乙烯与非生物胁迫 | 第20-21页 |
| 1.5 植物EIN3/EILs转录因子 | 第21-22页 |
| 1.6 茉莉酸的合成及信号转导 | 第22-25页 |
| 1.7 JA的生物学功能 | 第25-27页 |
| 1.7.1 JA在植物生殖和发育中的功能 | 第25-26页 |
| 1.7.2 JA与昆虫侵害 | 第26-27页 |
| 1.8 植物MYC2转录因子 | 第27-28页 |
| 1.9 研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 二、实验材料和方法 | 第29-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第29页 |
| 2.1.3 化学试剂 | 第29页 |
| 2.1.4 工具酶 | 第29页 |
| 2.1.5 常用储存液 | 第29-30页 |
| 2.1.6 常用培养基 | 第30页 |
| 2.1.7 PCR扩增及DNA测序 | 第30页 |
| 2.1.8 所用仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.2.1 棉花GhEIN3和GhMYC2基因的克隆及分离 | 第31页 |
| 2.2.2 棉花GhEIN3和GhMYC2蛋白序列比对和进化树分析 | 第31页 |
| 2.2.3 GhEIN3和GhMYC2基因组织表达模式分析 | 第31-33页 |
| 2.2.4 载体构建方法 | 第33-35页 |
| 2.2.5 质粒提取方法 | 第35页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶回收DNA方法 | 第35页 |
| 2.2.7 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化方法 | 第35-36页 |
| 2.2.8 GhEIN3和GhMYC2酵母转录激活活性检测方法 | 第36页 |
| 2.2.9 拟南芥培养和遗传转化 | 第36页 |
| 2.2.10 转基因拟南芥阳性苗鉴定 | 第36页 |
| 2.2.11 转基因拟南芥处理方法 | 第36-37页 |
| 2.2.12 ACC、JA对棉花幼苗处理 | 第37页 |
| 2.2.13 棉花转化及阳性苗鉴定 | 第37-38页 |
| 三、实验结果 | 第38-63页 |
| 3.1 棉花GhEIN3和GhMYC2基因的分离及进化分析 | 第38-42页 |
| 3.1.1 棉花GhEIN3和GhMYC2基因的分离 | 第38页 |
| 3.1.2 棉花GhEIN3和GhMYC2蛋白同源性比较及进化树构建 | 第38-42页 |
| 3.2 棉花GhEIN3和GhMYC2基因的组织表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3 GhEIN3和GhMYC2蛋白亚细胞定位分析 | 第43-45页 |
| 3.3.1 GhEIN3-eGFP和GhMYC2-eGFP融合表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.2 注射烟草叶表皮细胞并观察荧光 | 第44-45页 |
| 3.4 GhEIN3和GhMYC2转录激活活性分析 | 第45-48页 |
| 3.4.1 pGBKT7-GhEIN3和pGBKT7-GhMYC2载体的构建及酵母阳性克隆鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4.2 GhEIN3和GhMYC2转录自激活检测 | 第46-48页 |
| 3.5 激素处理对GhEIN3和GhMYC2表达量的影响 | 第48-49页 |
| 3.6 GhEIN3转基因拟南芥分析 | 第49-51页 |
| 3.6.1 GhEIN3过量表达载体构建及拟南芥转化 | 第49-50页 |
| 3.6.2 过量表达GhEIN3阳性苗的鉴定及表达量分析 | 第50-51页 |
| 3.7 过量表达GhEIN3转基因拟南芥响应乙烯信号 | 第51-52页 |
| 3.8 过量表达GhEIN3转基因拟南芥胁迫分析 | 第52-54页 |
| 3.8.1 过量表达GhEIN3转基因胁迫处理萌发率统计 | 第52-53页 |
| 3.8.2 过量表达GhEIN3转基因拟南芥增强对ABA的敏感性 | 第53-54页 |
| 3.9 过量表达GhEIN3转基因拟南芥盐胁迫分析 | 第54-57页 |
| 3.10 过量表达GhMYC2转基因拟南芥分析 | 第57-58页 |
| 3.10.1 过量表达GhMYC2载体构建及拟南芥转化 | 第57页 |
| 3.10.2 过量表达GhMYC2转基因拟南芥阳性苗鉴定 | 第57-58页 |
| 3.11 过量表达GhMYC2转基因拟南芥响应JA信号 | 第58-59页 |
| 3.12 GhEIN3过量表达及RNAi转基因棉花 | 第59-62页 |
| 3.12.1 pMD-RDL1:GhEIN3过量表达载体构建及棉花转化 | 第59-60页 |
| 3.12.2 GhEIN3 RNAi载体的构建及棉花转化 | 第60-61页 |
| 3.12.3 GhEIN3过量表达及RNAi转基因棉花的鉴定 | 第61-62页 |
| 3.13 GhEIN3过量表达及RNAi转基因棉花T_0代初步分析 | 第62-63页 |
| 四、讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 GhEIN3和GhMYC2蛋白结构及进化分析 | 第63页 |
| 4.2 GhEIN3和GhMYC2分别受ACC、JA诱导 | 第63页 |
| 4.3 GhEIN3棉花组织表达及转基因棉花初步分析 | 第63-64页 |
| 4.4 异源表达GhEIN3导致拟南芥对于NaCl等胁迫应答的改变 | 第64-65页 |
| 4.5 GhMYC2蛋白功能预测 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
