| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 一、前言 | 第15-24页 |
| 1.1 植物表皮毛 | 第15-19页 |
| 1.1.1 拟南芥表皮毛概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 拟南芥表皮毛发育 | 第16-17页 |
| 1.1.3 拟南芥表皮毛发育的调控机制 | 第17-18页 |
| 1.1.4 棉花纤维细胞发育的调控机制 | 第18-19页 |
| 1.2 HD-ZIP Ⅳ蛋白 | 第19-23页 |
| 1.2.1 植物HD-ZIP Ⅳ蛋白结构特征 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物HD-ZIP Ⅳ转录因子在细胞发育中的调控功能 | 第20-22页 |
| 1.2.3 HD-ZIP Ⅳ类转录因子的其它生物学功能 | 第22-23页 |
| 1.3 立题依据及研究意义 | 第23-24页 |
| 二、材料与方法 | 第24-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第24页 |
| 2.1.3 工具酶 | 第24页 |
| 2.1.4 常用培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.5 常用的储存液 | 第25-26页 |
| 2.1.6 常用的缓冲液及试剂 | 第26页 |
| 2.2 实验器材 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.3.1 GhHOX4基因及其编码蛋白序列分析 | 第26页 |
| 2.3.2 35S:GhHOX4过量表达载体(pMD-GhHOX4)的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.3 GhHOX4 RNAi载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.3.4 GhHOX4蛋白的亚细胞定位 | 第30页 |
| 2.3.5 拟南芥gl2突变体的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.6 构建pGL2:EYFP:GhHOX4载体 | 第31页 |
| 2.3.7 GhHOX4蛋白的转录活性分析及其与其他蛋白的相互作用 | 第31-32页 |
| 2.3.8 在裂殖酵母内过量表达GhHOX4基因 | 第32-33页 |
| 2.3.9 原核表达GhHOX4蛋白 | 第33-34页 |
| 2.3.10 拟南芥表皮毛洗脱 | 第34-35页 |
| 2.3.11 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.3.12 拟南芥基因组DNA提取 | 第36页 |
| 2.3.13 拟南芥RNA提取及逆转录 | 第36-38页 |
| 2.3.14 GhHOX4基因在棉花各组织中的表达分析 | 第38页 |
| 2.3.15 棉花转化及继代培养 | 第38-39页 |
| 三、实验结果 | 第39-57页 |
| 3.1 GhHOX4基因序列分析 | 第39页 |
| 3.2 GhHOX4蛋白与其它HD-ZIP Ⅳ蛋白的系统进化树分析 | 第39-40页 |
| 3.3 GhHOX4基因在棉花各组织中的表达模式 | 第40页 |
| 3.4 棉花GhHOX4蛋白的亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 3.4.1 GhHOX4:GFP融合表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.4.2 观察棉花GhHOX4蛋白的荧光定位 | 第41-42页 |
| 3.5 GhHOX4蛋白转录活性分析 | 第42-43页 |
| 3.5.1 pGBKT7-GhHOX4载体的构建 | 第42页 |
| 3.5.2 GhHOX4蛋白转录自激活的检测 | 第42-43页 |
| 3.6 GhHOX4蛋白与其它蛋白相互作用分析 | 第43-45页 |
| 3.6.1 棉花中的4个HOX蛋白相互作用分析 | 第43-44页 |
| 3.6.2 GhHOX4蛋白与GhGL2LIKE蛋白相互作用的验证 | 第44-45页 |
| 3.7 过量表达GhHOX4基因促进酵母细胞伸长 | 第45-46页 |
| 3.8 35S:GhHOX4及pGL2:EYFP:GhHOX4转基因拟南芥的鉴定 | 第46-49页 |
| 3.8.1 pMD-GhHOX4过量表达转基因拟南芥的鉴定 | 第46-48页 |
| 3.8.2 pGL2:EYFP:GhHOX4转基因拟南芥的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.9 GhHOX4过量表达转基因拟南芥的表型分析 | 第49-52页 |
| 3.9.1 GhHOX4过量表达转基因拟南芥的表皮毛数量统计 | 第49-50页 |
| 3.9.2 GhHOX4过量表达转基因拟南芥的表皮毛长度分析 | 第50页 |
| 3.9.3 GhHOX4过量表达转基因拟南芥的表皮毛分支(branch)观察与统计 | 第50-52页 |
| 3.10 拟南芥gl2突变体的鉴定 | 第52页 |
| 3.11 GhHOX4过量表达载体转化拟南芥gl2突变体 | 第52-53页 |
| 3.12 GhHOX4蛋白的原核表达 | 第53-55页 |
| 3.12.1 GhHOX4蛋白的诱导及蛋白的可溶性判断 | 第53-54页 |
| 3.12.2 验证磷脂酸(PA)与GhHOX4蛋白的相互作用 | 第54-55页 |
| 3.13 棉花转化 | 第55-57页 |
| 四、讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 四个棉花HOX基因序列及功能比较 | 第57页 |
| 4.2 GhHOX4蛋白可能是一个转录抑制子 | 第57-58页 |
| 4.3 PA与GhHOX4蛋白的结合 | 第58页 |
| 4.4 GhHOX4蛋白可能在棉纤维伸长过程中发挥作用 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
