主要缩略词 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
ABSTRACT | 第10页 |
前言 | 第11-17页 |
第一章 蛇类BSEP的编码基因ABCB11部分序列的测定 | 第17-33页 |
研究背景与实验设计 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-25页 |
1. 材料 | 第18-19页 |
2. 方法 | 第19-25页 |
2.1. 鉴定大王蛇ABCB11首段序列信息 | 第19-23页 |
2.2. 首段序列的延伸 | 第23页 |
2.3. 扩大蛇类品种范围,采用q-PCR验证不同蛇类肝脏中存在BSEP | 第23-25页 |
结果 | 第25-31页 |
1. 三种蛇ABCB11同源性分析 | 第25-26页 |
2. 大王蛇ABCB11首段序列 | 第26页 |
3. 首段序列延伸得到四段序列 | 第26-29页 |
4. 六种蛇BSEP的mRNA表达水平 | 第29-31页 |
讨论 | 第31-33页 |
第二章 采用DNA末端迅速扩增的技术获得ABCB11全序列 | 第33-43页 |
研究背景与实验设计 | 第33-35页 |
材料与方法 | 第35-38页 |
1.材料 | 第35页 |
2.方法 | 第35-38页 |
2.1. 提取大王蛇肝脏总RNA | 第35页 |
2.2. 基于巢氏PCR技术的 3′ RACE | 第35-38页 |
结果 | 第38-42页 |
1. 采用 3′RACE技术获得大王蛇ABCB11的 3′端的未知序列 | 第38-39页 |
2. 将 3′RACE序列信息与第一章中四段序列拼接成一个整体序列 | 第39-40页 |
3. 大王蛇ABCB11的拼接序列与三种蛇ABCB11推测的部分序列比对 | 第40-42页 |
讨论 | 第42-43页 |
第三章 蛋白质组学分析鉴定蛇肝脏中胆酸盐输出泵BSEP | 第43-61页 |
研究背景与实验设计 | 第43-44页 |
材料与方法 | 第44-49页 |
1.材料 | 第44-45页 |
2.方法 | 第45-49页 |
2.1. 蛇肝脏组织总蛋白抽提 | 第45-46页 |
2.2. 采用Bradford法对蛋白进行定量 | 第46页 |
2.3. 蛋白酶解及多肽分离 | 第46-48页 |
2.4. 纳升级毛细管反相液相色谱串联质谱分析肽段样品 | 第48-49页 |
2.5. 数据分析 | 第49页 |
结果 | 第49-60页 |
1. 蛋白鉴定的相关参数 | 第49-53页 |
2. 实验方法的验证 | 第53-54页 |
3. BSEP的肽段信息 | 第54-60页 |
讨论 | 第60-61页 |
第四章 全文总结与展望 | 第61-63页 |
1. 主要成果 | 第61页 |
2. 特色与创新 | 第61-62页 |
3. 展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
综述 | 第65-74页 |
参考文献 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录 攻读硕士学位期间撰写及发表的论文 | 第75页 |