| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-13页 |
| 第一部分 白藜芦醇对HeLa细胞的生长、增殖和凋亡影响 | 第13-21页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| 1.1 试剂及耗材 | 第13页 |
| 1.2 仪器 | 第13页 |
| 1.3 实验所用细胞系 | 第13页 |
| 1.4 主要试剂和溶液的配制 | 第13-14页 |
| 2 方法 | 第14-16页 |
| 2.1 HeLa宫颈癌细胞株的培养 | 第14页 |
| 2.2 细胞增殖率的测定(MTT比色法)即四甲基偶氮唑蓝比色分析法测定 | 第14-15页 |
| 2.3 细胞克隆形成试验 | 第15页 |
| 2.4 细胞凋亡实验 | 第15-16页 |
| 3 结果 | 第16-19页 |
| 3.1 Res对HeLa细胞增殖的影响 | 第16-17页 |
| 3.2 Res对HeLa细胞克隆形成的影响 | 第17-18页 |
| 3.3 Res对HeLa细胞凋亡的影响 | 第18-19页 |
| 4 讨论 | 第19-21页 |
| 第二部分 白藜芦醇对核仁功能的影响 | 第21-29页 |
| 1 材料 | 第21页 |
| 1.1 主要试剂和耗材 | 第21页 |
| 1.2 主要仪器 | 第21页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.1 荧光素酶检测技术(Luciferase Assay)检测HeLa细胞中核糖体DNA(rDNA)启动子的活性 | 第21-22页 |
| 2.2 染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,简称CHIP)检测Res调控的转录因子UBF和RNA聚合酶I的亚基RPA194的活性 | 第22-23页 |
| 2.3 Realtime-PCR检测HeLa细胞中pre-rRNA的水平 | 第23-24页 |
| 2.4 Realtime-PCR检测血清刺激的HeLa细胞中pre-rRNA的水平 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| 3.1 Res对HeLa细胞内rDNA启动子活性的影响 | 第25页 |
| 3.2 Res对HeLa细胞内转录因子UBF和RNA聚合酶I的亚基RPA194活性的影响 | 第25-26页 |
| 3.3 Res对HeLa细胞内pre-rRNA表达量的影响 | 第26页 |
| 3.4 Res对血清刺激的HeLa细胞的pre-rRNA的表达量的影响 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三部分 白藜芦醇调控PI3K/Akt信号通路中主要成员UBF和Akt的表达和活化 | 第29-37页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 主要试剂和耗材 | 第29页 |
| 1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第29-30页 |
| 2 主要实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 Western Blotting技术检测同一浓度的Res作用不同时间后,HeLa细胞中UBF和Akt的表达和活化情况 | 第30-31页 |
| 2.2 Western Blotting技术检测不同浓度的Res作用于HeLa细胞相同时间后,UBF和Akt的表达和活化情况 | 第31页 |
| 2.3 Western Blotting技术检测同一浓度的Res作用于饥饿24h后血清刺激不同时间的HeLa细胞后,UBF和Akt的表达和活化情况 | 第31-32页 |
| 2.4 Western Blotting技术检测不同浓度的Res作用于饥饿24h后血清刺激相同时间的HeLa细胞后,UBF和Akt的表达和活化情况 | 第32页 |
| 2.5 Western Blotting技术检测Res与抑制剂PI3K α、PI3K β、Ly294002分别作用于饥饿24h后血清刺激的HeLa细胞,UBF和Akt表达和活化情况 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-36页 |
| 3.1 Western Blotting技术检测同一浓度的Res作用不同时间后,HeLa细胞中UBF和Akt的表达和活化情况 | 第33页 |
| 3.2 Western Blotting技术检测不同浓度的Res作用于HeLa细胞相同时间后,UBF和Akt的表达和活化情况 | 第33-34页 |
| 3.3 Western Blotting技术检测同一浓度的Res作用于饥饿24h后血清刺激不同时间的HeLa细胞后,UBF和Akt的表达和活化情况 | 第34页 |
| 3.4 Western Blotting技术检测不同浓度的Res作用于饥饿24h后血清刺激3h的HeLa细胞中UBF和Akt的表达和活化情况 | 第34-35页 |
| 3.5 Western Blotting技术检测Res与抑制剂PI3K α、PI3K β、Ly294002分别作用于饥饿24h后血清刺激不同时间的HeLa细胞内UBF和Akt表达和活化情况 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 第四部分 白藜芦醇对完全活化的PBaBe Puro HAPIK3 CA(简称PIK3CA)质粒活性的影响 | 第37-42页 |
| 1 材料 | 第37页 |
| 1.1 主要试剂和耗材 | 第37页 |
| 1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第37页 |
| 2 主要实验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 Luciferase Assay检测转染了PIK3CA质粒后的HeLa细胞中rDNA启动子的活性 | 第37页 |
| 2.2 CHIP检测Res调控转染了PIK3CA质粒后的HeLa细胞中RPA194的活性 | 第37-38页 |
| 2.3 Realtime-PCR检测转染了PIK3CA质粒的HeLa细胞中pre-rRNA的水平 | 第38页 |
| 2.4 Western Blotting技术检测转染了PIK3CA质粒的HeLa细胞中UBF和Akt的表达及其活化水平 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-41页 |
| 3.1 Luciferase Assay检测转染了PIK3CA质粒后的HeLa细胞中rDNA启动子的活性 | 第39页 |
| 3.2 Chromatin Immunoprecipitation(CHIP)检测Res调控RNA聚合酶I亚基RPA194的活性 | 第39-40页 |
| 3.3 Realtime-PCR检测转染了PIK3CA质粒的HeLa细胞中pre-rRNA的水平 | 第40页 |
| 3.4 Western Blotting技术检测转染了PIK3CA质粒的HeLa细胞中UBF和Akt的表达及其活化水平 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 结语 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 附录 | 第47-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
