| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-18页 |
| 1 C-反应蛋白的概念 | 第13-14页 |
| 1.1 C-反应蛋白（CRP）的发现和命名 | 第13页 |
| 1.2 CRP的生物化学和生理学特性 | 第13-14页 |
| 2 CRP的疾病相关性研究 | 第14-17页 |
| 2.1 CRP蛋白与脑血管疾病相关性研究 | 第14页 |
| 2.2 CRP蛋白与中风相关性研究 | 第14-15页 |
| 2.3 CRP蛋白与类风湿性关节炎的相关性研究 | 第15-16页 |
| 2.4 CRP蛋白与主动脉壁内血肿的相关性研究 | 第16页 |
| 2.5 CRP与晚发阿尔兹海默症相关性研究 | 第16页 |
| 2.6 CRP与肺炎的相关研究 | 第16-17页 |
| 3 家蚕杆状病毒表达系统研究 | 第17-18页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第18-20页 |
| 1 研究目的及意义 | 第18页 |
| 2 研究内容 | 第18-19页 |
| 3 实验流程图 | 第19-20页 |
| 第三章 人CRP基因的生物信息学分析 | 第20-24页 |
| 1 序列和工具 | 第20页 |
| 1.1 序列 | 第20页 |
| 1.2 生物信息学工具 | 第20页 |
| 2 人CRP蛋白的生物信息学分析结果 | 第20-23页 |
| 2.1 人CRP蛋白的基因序列 | 第20页 |
| 2.2 人CRP蛋白信号肽分析 | 第20-21页 |
| 2.3 人CRP蛋白跨膜区域预测 | 第21页 |
| 2.4 人CRP蛋白疏水性分析 | 第21-22页 |
| 2.5 人CRP蛋白的二级结构预测 | 第22-23页 |
| 2.6 人CRP蛋白的高级结构预测 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-24页 |
| 第四章 人CRP基因的克隆、原核表达与纯化 | 第24-36页 |
| 1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 1.1 材料 | 第24页 |
| 1.2 试剂 | 第24页 |
| 1.3 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| 2.1 重组质粒的构建 | 第25-29页 |
| 2.2 重组质粒pColdTM II-CRP在BL21(DE3)中表达 | 第29-30页 |
| 2.3 CRP融合蛋白纯化 | 第30页 |
| 2.4 BCA法蛋白定量 | 第30-31页 |
| 2.5 CRP的质谱检测 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| 3.1 PCR扩增人CRP基因 | 第31页 |
| 3.2 重组pBluescript II SK(+)-CRP的菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 重组质粒pColdTM II-CRP的菌落PCR鉴定 | 第32页 |
| 3.4 重组CRP的原核表达 | 第32-33页 |
| 3.5 亲和层析纯化重组蛋白 | 第33-34页 |
| 3.6 原核表达CRP蛋白样品浓度 | 第34页 |
| 3.7 质谱分析结果 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 第五章 人CRP蛋白多克隆抗体的制备 | 第36-40页 |
| 1 材料和试剂 | 第36页 |
| 1.1 材料 | 第36页 |
| 1.2 试剂 | 第36页 |
| 2 制备方法 | 第36-38页 |
| 2.1 免疫抗原的制备 | 第36页 |
| 2.2 动物免疫 | 第36-37页 |
| 2.3 制备兔多克隆抗血清 | 第37页 |
| 2.4 ELISA法检测抗体效价 | 第37页 |
| 2.5 Western Blot检测抗体的特异性 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-39页 |
| 3.1 多克隆抗体的效价 | 第38页 |
| 3.2 Western Blot检测结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 第六章 家蚕杆状病毒系统表达人C-反应蛋白 | 第40-54页 |
| 1 材料与试剂 | 第40页 |
| 1.1 材料 | 第40页 |
| 1.2 试剂 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-47页 |
| 2.1 构建pFastBacTMHTB-CRP重组载体 | 第40-41页 |
| 2.2 重组质粒与Bacmid同源重组 | 第41-43页 |
| 2.3 重组病毒vBmHis-CRP的构建 | 第43-45页 |
| 2.4 重组人CRP蛋白在家蚕BmN细胞中的表达和鉴定 | 第45页 |
| 2.5 重组人CRP蛋白在家蚕五龄幼虫体内的表达及鉴定 | 第45-46页 |
| 2.6 五龄蚕体内CRP融合蛋白的纯化 | 第46页 |
| 2.7 BCA法蛋白定量 | 第46页 |
| 2.8 重组CRP的质谱检测 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-53页 |
| 3.1 扩增CRP基因片段结果 | 第47页 |
| 3.2 重组质粒的菌落PCR | 第47-48页 |
| 3.3 重组Bacmid DNA PCR鉴定 | 第48-49页 |
| 3.4 重组病毒vBmHis-CRP鉴定结果 | 第49页 |
| 3.5 家蚕细胞中表达重组人CRP蛋白的结果 | 第49-51页 |
| 3.6 家蚕蚕体中重组人CRP蛋白的鉴定结果 | 第51页 |
| 3.7 家蚕体内重组人CRP蛋白的纯化和定量 | 第51-52页 |
| 3.8 纯化的重组蛋白质谱检测分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 小节 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
