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甜瓜生长发育和胁迫条件下实时荧光定量PCR内参基因的筛选

致谢第4-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-19页
    1.1 实时荧光定量PCR第10-11页
    1.2 内参基因在QRT-PCR中的必要性第11-12页
    1.3 内参基因第12-17页
        1.3.1 内参基因研究背景第13-14页
        1.3.2 内参基因研究动态第14-16页
        1.3.3 内参基因研究前景第16-17页
    1.4 基因的筛选方法第17-19页
2 引言第19-20页
3 试验材料与方法第20-27页
    3.1 试验材料第20-23页
        3.1.1 植物材料第20-22页
            3.1.1.1 植物营养器官材料第20页
            3.1.1.2 植物生殖器官材料第20-21页
            3.1.1.3 非生物胁迫因子诱导第21页
            3.1.1.4 生物胁迫因子(霜霉病病菌)诱导第21-22页
        3.1.2 试验试剂第22-23页
        3.1.3 试验仪器第23页
    3.2 试验方法第23-27页
        3.2.1 引物设计第23-24页
        3.2.2 总RNA的提取第24-25页
        3.2.3 RNA的浓度及纯度检测第25页
        3.2.4 cDNA第一条链的合成第25-26页
        3.2.5 荧光定量RT-PCR第26-27页
        3.2.6 荧光定量PCR模板的稀释第27页
        3.2.7 引物的扩增效率计算第27页
4 结果分析第27-44页
    4.1 RNA的提取第27页
    4.2 QRT-PCR扩增溶解曲线分析第27-28页
    4.3 内参基因表达的标准曲线第28页
    4.4 内参基因的筛选第28-44页
        4.4.1 甜瓜生长发育期不同组织样品中的内参基因Ct值分析第28-29页
        4.4.2 甜瓜生物胁迫和非生物胁迫样品中的内参基因Ct值分析第29页
        4.4.3 营养器官的结果分析第29-32页
            4.4.3.1 geNorm分析第29-30页
            4.4.3.2 NormFinder分析第30-31页
            4.4.3.3 BestKeeper分析第31-32页
        4.4.4 生殖器官的结果分析第32-35页
            4.4.4.1 geNorm分析第32-33页
            4.4.4.2 NormFinder分析第33-34页
            4.4.4.3 BestKeeper分析第34-35页
        4.4.5 甜瓜生长发育期不同组织器官总样品分析第35-38页
            4.4.5.1 geNorm分析第35-36页
            4.4.5.2 NormFinder分析第36-37页
            4.4.5.3 BestKeeper分析第37-38页
        4.4.6 生物和非生物胁迫结果分析第38-44页
            4.4.6.1 geNorm分析第38-41页
            4.4.6.2 NormFinder分析第41页
            4.4.6.3 BestKeeper分析第41-44页
5 结论与讨论第44-48页
    5.1 结论第44-45页
        5.1.1 引物的筛选第44页
        5.1.2 内参基因的筛选结果第44-45页
            5.1.2.1 营养器官第44-45页
            5.1.2.2 生殖器官第45页
            5.1.2.3 逆境胁迫(生物胁迫、非生物胁迫)第45页
            5.1.2.4 所有样品第45页
    5.2 讨论第45-48页
        5.2.1 影响荧光定量结果的关键因素的探讨第45-46页
            5.2.1.1 RNA的提取质量第45页
            5.2.1.2 cDNA的合成效率第45-46页
            5.2.1.3 引物的浓度第46页
        5.2.2 内参基因筛选第46-47页
        5.2.3 18srRNA第47-48页
参考文献第48-56页
附录1 试验试剂的配置第56-58页
附录2 基因溶解曲线图第58-61页
附录3 基因标准曲线图第61-63页
ABSTRACT第63-64页

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