| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 MYB转录因子的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.1 MYB转录因子的结构 | 第14-15页 |
| 1.2 MYB的进化 | 第15-16页 |
| 1.3 MYB转录因子的表达模式 | 第16页 |
| 1.4 MYB转录因子的功能 | 第16-19页 |
| 1.4.1 控制细胞增殖和植物生长发育 | 第16-17页 |
| 1.4.2 参与激素响应 | 第17-18页 |
| 1.4.3 与非生物胁迫相关 | 第18-19页 |
| 2 细胞周期的研究进展 | 第19-20页 |
| 2.1 细胞分裂相关基因的发现与功能 | 第19-20页 |
| 3 根发育的研究进展 | 第20-23页 |
| 3.1 植物根的分类和结构 | 第20-21页 |
| 3.2 植物根系的发育过程 | 第21页 |
| 3.3 植物激素对根发育的影响 | 第21-22页 |
| 3.4 影响根发育的细胞周期因子 | 第22-23页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 菊花CmMYB59转录因子的克隆与序列分析 | 第24-40页 |
| 1 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1.1 植物材料 | 第24-25页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第25页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第25页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第25页 |
| 1.3 实验方法 | 第25-33页 |
| 1.3.1 特异性引物的设计 | 第25-26页 |
| 1.3.2 植物总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 1.3.3 1st-Strand cDNA合成及检测 | 第27-28页 |
| 1.3.4 中间片段扩增 | 第28页 |
| 1.3.5 目的片段的纯化回收 | 第28页 |
| 1.3.6 目的片段的连接 | 第28-29页 |
| 1.3.7 连接产物转化 | 第29页 |
| 1.3.8 重组子筛选与测序 | 第29页 |
| 1.3.9 3'RACE-PCR扩增 | 第29-30页 |
| 1.3.10 5'RACE-PCR扩增 | 第30-33页 |
| 1.3.11 cDNA全长序列的获得 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-39页 |
| 2.1 RNA提取质量与反转录效果检测 | 第33-34页 |
| 2.2 CmMYB59基因的克隆 | 第34-35页 |
| 2.2.1 CmMYB59中间片段的获得 | 第34页 |
| 2.2.2 CmMYB59的3'RACE-PCR结果 | 第34页 |
| 2.2.3 CmMYB59的5'RACE-PCR结果 | 第34-35页 |
| 2.2.4 CmMYB59基因cDNA全长及ORF的获得 | 第35页 |
| 2.3 CmMYB59的生物信息学分析 | 第35-39页 |
| 2.3.1 CmMYB59基因的cDNA序列分析 | 第35-36页 |
| 2.3.2 CmMYB59基因的氨基酸序列同源性比对 | 第36-38页 |
| 2.3.3 CmMYB59系统进化树的构建 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 菊花CmMYB59基因的表达特性分析 | 第40-52页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| 1.1 植物材料 | 第41页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第41-42页 |
| 1.2.1 主要试剂 | 第41页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第41-42页 |
| 1.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 1.3.1 荧光定量表达特性分析材料处理 | 第42页 |
| 1.3.2 RNA提取、纯化、反转录 | 第42页 |
| 1.3.3 CmMYB59的实时定量(Real time-PCR)分析 | 第42-43页 |
| 1.3.4 CmMYB59的亚细胞定位载体的构建 | 第43页 |
| 1.3.5 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第43页 |
| 1.3.6 显微镜观察 | 第43页 |
| 1.3.7 酵母表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 1.3.8 酵母感受态细胞的制备与转化 | 第45页 |
| 1.3.9 阳性克隆的筛选 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| 2.1 CmMYB59荧光定量表达特性 | 第45-48页 |
| 2.1.1 CmMYB59在不同组织中的表达特性 | 第45-46页 |
| 2.1.2 CmMYB59在花芽分化期间的表达特性 | 第46-47页 |
| 2.1.3 CmMYB59在不同非生物胁迫下的表达特性 | 第47-48页 |
| 2.2 亚细胞定位分析 | 第48-49页 |
| 2.3 CmMYB59转录激活活性分析 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 菊花CmMYB59基因对拟南芥和菊花的遗传转化研究 | 第52-62页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 1.1 植物材料 | 第52页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第52-53页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第52-53页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第53页 |
| 1.3 实验方法 | 第53-55页 |
| 1.3.1 CmMYB59超表达载体的构建 | 第53页 |
| 1.3.2 拟南芥与菊花的遗传转化 | 第53页 |
| 1.3.3 转基因植株分子检测 | 第53-54页 |
| 1.3.4 转基因拟南芥的表型观察 | 第54-55页 |
| 1.3.5 过表达CmMYB59基因拟南芥株系下游基因调控分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-59页 |
| 2.1 转基因菊花的获得与检测 | 第55-57页 |
| 2.1.1 CmMYB59转基因菊花的获得 | 第55-56页 |
| 2.1.2 CmMYB59转基因菊花的检测 | 第56-57页 |
| 2.2 转基因拟南芥的获得与检测 | 第57-58页 |
| 2.3 CmMYB59转录因子功能分析 | 第58-59页 |
| 2.3.1 CmMYB59转基因拟南芥根发育的研究 | 第58页 |
| 2.3.2 CmMYB59转基因拟南芥根发育的研究 | 第58-59页 |
| 2.3.3 CmMYB59转基因拟南芥细胞周期相关基因的定量 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 创新点 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录 | 第74-82页 |
| 发表论文及所获奖励 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
