| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 阪崎克罗诺肠杆菌 | 第7-8页 |
| 1.1.1 阪崎克罗诺肠杆菌的命名及其生理生化性质 | 第7页 |
| 1.1.2 阪崎克罗诺肠杆菌的致病性 | 第7-8页 |
| 1.1.3 阪崎克罗诺肠杆菌的粘附和入侵 | 第8页 |
| 1.2 脂多糖和类脂A | 第8-11页 |
| 1.2.1 脂多糖的结构 | 第8-9页 |
| 1.2.2 脂多糖的免疫识别功能 | 第9页 |
| 1.2.3 类脂A的结构及生物合成途径 | 第9-10页 |
| 1.2.4 类脂A的磷酸乙醇胺修饰 | 第10-11页 |
| 1.3 立题背景和意义 | 第11-12页 |
| 1.3.1 立题背景 | 第11页 |
| 1.3.2 立题意义 | 第11-12页 |
| 1.4 课题研究方案与目标 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 实验菌株、质粒与引物 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第15页 |
| 2.2 分子实验操作 | 第15-17页 |
| 2.2.1 基因组DNA及质粒提取 | 第15-16页 |
| 2.2.2 C.sakazakii BAA894感受态细胞制备 | 第16页 |
| 2.2.3 C.sakazakii BAA894基因敲除的方法 | 第16-17页 |
| 2.3 C.sakazakii BAA894类脂A突变菌株的构建及其类脂A结构的鉴定 | 第17-19页 |
| 2.3.1 各种C.sakazakii BAA894突变菌株的构建 | 第17页 |
| 2.3.2 各种C.sakazakii BAA894突变菌株类脂A结构的提取及分析 | 第17-18页 |
| 2.3.3 各种C.sakazakii BAA894突变菌株LPS提取纯化及SDS-PAGE分析 | 第18-19页 |
| 2.4 C.sakazakii BAA894突变菌株的免疫活性分析 | 第19-20页 |
| 2.4.1 C.sakazakii BAA894活菌体对细胞TLR4通路刺激能力的测定 | 第19页 |
| 2.4.2 C.sakazakii BAA894突变菌株的LPS分子的细胞免疫活性分析 | 第19页 |
| 2.4.3 C.sakazakii BAA894突变菌株对Caco-2 细胞的侵染能力 | 第19-20页 |
| 2.4.4 C.sakazakii BAA894突变菌株在THP-1 细胞中的存活率 | 第20页 |
| 2.5 各种C.sakazakii BAA894突变菌株外膜特性的分析 | 第20-23页 |
| 2.5.1 生长曲线的测定 | 第20页 |
| 2.5.2 NPN法测定细胞外膜渗透性 | 第20-21页 |
| 2.5.3 细胞表面疏水性的测定 | 第21页 |
| 2.5.4 C.sakazakii BAA894突变株最小抑菌浓度的测定 | 第21页 |
| 2.5.5 C.sakazakii BAA894突变株对Nacl的耐受性 | 第21页 |
| 2.5.6 C.sakazakii BAA894突变株对酸的耐受性 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-43页 |
| 3.1 pH值对C.sakazakii BAA894类脂A结构的影响 | 第23-24页 |
| 3.2 C.sakazakii BAA894中磷酸乙醇胺转移酶编码基因的鉴定 | 第24-34页 |
| 3.2.1 C.sakazakii BAA894中磷酸乙醇胺转移酶基因相关基因的比对 | 第24-25页 |
| 3.2.2 C.sakazakii BAA894中ESA_RS09200受pH调控 | 第25-26页 |
| 3.2.3 克罗诺肠杆菌其他四个种中四个基因的同源性及位置 | 第26-27页 |
| 3.2.4 ESA_RS09200和ESA_RS16425表达菌株的构建及其类脂A结构分析 | 第27-30页 |
| 3.2.5 WLL001和WLL002突变株的构建及类脂A结构的鉴定 | 第30-32页 |
| 3.2.6 ESA-RS09200和ESA-RS16425回补菌株的构建及其类脂A的结构鉴定 | 第32页 |
| 3.2.7 ESA_RS16425编码D-丙氨酰-D-丙氨酸羧化酶 | 第32-33页 |
| 3.2.8 C.sakazakii BAA894中磷酸乙醇胺的作用位点 | 第33-34页 |
| 3.3 C.sakazakii BAA894及WLL001突变株的阳离子抗菌肽抗性 | 第34-35页 |
| 3.4 C.sakazakii BAA894及WLL001突变株的LPS结构 | 第35-36页 |
| 3.5 C.sakazakii BAA894突变菌株的细胞活性分析 | 第36-39页 |
| 3.5.1 C.sakazakii BAA894突变菌株对TLR4通路的刺激活性的分析 | 第36页 |
| 3.5.2 C.sakazakii BAA894突变菌株的类脂A的免疫活性分析 | 第36-38页 |
| 3.5.3 C.sakazakii BAA894和突变株WLL001在THP-1细胞中的存活 | 第38页 |
| 3.5.4 C.sakazakii BAA894野生型和突变株对Caco-2细胞的侵染 | 第38-39页 |
| 3.6 C.sakazakii BAA894突变菌株的生物学特性的比较 | 第39-43页 |
| 3.6.1 C.sakazakii BAA894及其突变菌株的生长曲线 | 第39-40页 |
| 3.6.2 C.sakazakii BAA894及其突变株的外膜渗透性分析 | 第40页 |
| 3.6.3 C.sakazakii BAA894及其突变株表面疏水性的分析 | 第40-41页 |
| 3.6.4 C.sakazakii BAA894及其突变株对的Nacl耐受性 | 第41页 |
| 3.6.5 C.sakazakii BAA894及其突变株对酸的耐受性 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
