摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-27页 |
1 抵抗素在代谢与炎症中的研究进展 | 第14-22页 |
1.1 抵抗素的结构 | 第14-15页 |
1.2 抵抗素的表达与调控 | 第15-16页 |
1.3 抵抗素与胰岛素抵抗、肥胖和2型糖尿病 | 第16-18页 |
1.3.1 抵抗素介导的胰岛素抵抗与糖代谢异常 | 第16-17页 |
1.3.2 抵抗素介导的胰岛素抵抗与脂代谢异常 | 第17-18页 |
1.4 抵抗素与机体炎症反应 | 第18-19页 |
1.4.1 抵抗素与炎症疾病 | 第18页 |
1.4.2 抵抗素与TNF-α、IL-6、IL-1β等炎性因子 | 第18-19页 |
1.5 抵抗素受体及其信号通路的研究 | 第19-22页 |
1.5.1 抵抗素与TLR4 | 第19-20页 |
1.5.2 抵抗素与ROR1 | 第20页 |
1.5.3 抵抗素与IGF-1R | 第20-21页 |
1.5.4 抵抗素与CAP1 | 第21页 |
1.5.5 抵抗素与Decorin | 第21-22页 |
2 NOD1和NOD2在代谢与炎症中的进展 | 第22-25页 |
2.1 NODs受体的分布 | 第23页 |
2.2 NODs信号转导 | 第23-24页 |
2.3 NODs受体联系肥胖、炎症、胰岛素抵抗 | 第24-25页 |
2.4 NOD1、NOD2与其他疾病 | 第25页 |
3 研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第二章 抵抗素对NOD1和NOD2基因表达的影响 | 第27-42页 |
1 材料与方法 | 第27-35页 |
1.1 材料 | 第27-28页 |
1.1.1 细胞及主要试剂 | 第27-28页 |
1.1.2 主要仪器 | 第28页 |
1.2 试验方法 | 第28-35页 |
1.2.1 细胞培养 | 第28-29页 |
1.2.2 试验分组 | 第29页 |
1.2.3 试验处理和样品收集 | 第29页 |
1.2.4 NOD1、NOD2、RIP2、IKKβ等基因表达水平的检测 | 第29-33页 |
1.2.5 NOD1、NOD2、RIP2和NF-κB的蛋白表达水平的检测 | 第33-34页 |
1.2.6 IL-6、TNF-α和IL-1β等细胞因子水平的检测 | 第34页 |
1.2.7 统计学分析 | 第34-35页 |
2. 试验结果 | 第35-39页 |
2.1 RAW264.7细胞培养结果 | 第35页 |
2.2 RNA电泳结果 | 第35-36页 |
2.3 NOD1、NOD2、RIP2及IKKβ mRNA水平检测结果 | 第36-38页 |
2.3.1 不同浓度抵抗素对NOD1和NOD2基因表达水平影响的结果 | 第36-37页 |
2.3.2 不同时间点NOD1、NOD2、RIP2及IKKβ mRNA水平检测结果 | 第37-38页 |
2.4 NOD1和NOD2蛋白的免疫印迹结果 | 第38-39页 |
2.4.1 不同浓度抵抗素作用下NOD1和NOD2蛋白免疫印迹结果 | 第38页 |
2.4.2 抵抗素作用不同时间NOD1、NOD2、RIP2和NF-κB免疫印迹结果 | 第38-39页 |
2.5 细胞上清液IL-6、IL-1β和TNF-α水平的检测结果 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
4 小结 | 第40-42页 |
第三章 NOD2-siRNA转染条件的筛选 | 第42-49页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
1.1 试验材料 | 第42页 |
1.2 试验方法 | 第42-44页 |
1.2.1 细胞培养 | 第42页 |
1.2.2 siRNA转染细胞 | 第42-43页 |
1.2.3 试验分组 | 第43页 |
1.2.4 筛选方法 | 第43页 |
1.2.5 荧光显微镜下观察转染效果 | 第43页 |
1.2.6 沉默效率检测 | 第43-44页 |
1.2.7 NOD2基因沉默效果持续时间的检测 | 第44页 |
1.2.8 统计学分析 | 第44页 |
2 试验结果 | 第44-47页 |
2.1 带荧光标记的siRNA转染细胞观测结果 | 第44-45页 |
2.2 不同浓度NOD2-siRNA转染下NOD2基因的表达水平检测 | 第45-46页 |
2.3 不同浓度NOD2-siRNA转染下的NOD2蛋白表达的检测结果 | 第46页 |
2.4 NOD2-siRNA沉默效果持续时间结果 | 第46-47页 |
2.4.1 NOD2基因水平的检测结果 | 第46-47页 |
2.4.2 NOD2蛋白水平的检测结果 | 第47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
4 小结 | 第48-49页 |
第四章 抵抗素对NOD2-NF-κB信号通路的影响 | 第49-57页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 试验材料 | 第49页 |
1.2 试验方法 | 第49-51页 |
1.2.1 NOD2基因沉默后抵抗素对其下游信号分子表达的影响 | 第49-50页 |
1.2.2 NF-κB核转移在抵抗素信号转导中的作用 | 第50-51页 |
1.2.3 NOD2、RIP2及IKKβ基因表达水平的检测 | 第51页 |
1.2.4 NOD2、RIP2和NF-κB蛋白表达水平的检测 | 第51页 |
1.2.5 细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平的检测 | 第51页 |
1.2.6 统计学分析 | 第51页 |
2 试验结果 | 第51-54页 |
2.1 转染后抵抗素对NOD2及其下游分子表达的影响的检测结果 | 第51-54页 |
2.1.1 转染后抵抗素对NOD2及其下游分子基因表达影响的检测结果 | 第51-52页 |
2.1.2 转染后抵抗素对NOD2其下游分子蛋白表达影响的检测结果 | 第52-53页 |
2.1.3 转染后抵抗素对IL-6、IL-1β和TNF-α表达的检测结果 | 第53-54页 |
2.2 NF-κB核转移在抵抗素信号转导中的作用的研究结果 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
3.1 关于抵抗素受体及抵抗素对NOD2-NF-κB信号通路的影响 | 第54-55页 |
3.2 NF-κB核转移在抵抗素信号转导中的作用 | 第55-56页 |
4 小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |