| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| ·极端微生物概述 | 第11-12页 |
| ·影响极端微生物的条件 | 第12-14页 |
| ·温度 | 第12-13页 |
| ·辐射 | 第13页 |
| ·干燥 | 第13页 |
| ·盐分 | 第13页 |
| ·pH | 第13-14页 |
| ·嗜碱菌的研究概况 | 第14-15页 |
| ·嗜盐菌的研究概况 | 第15-19页 |
| ·嗜盐微生物对盐适应性的分子基础 | 第15-16页 |
| ·中度嗜盐菌H.halophilus中氯调节因子 | 第16-19页 |
| ·极端微生物及其极端性产物 | 第19-21页 |
| ·四氢嘧啶概述 | 第21-25页 |
| ·四氢嘧啶研究现状 | 第22-23页 |
| ·四氢嘧啶的生物学功能 | 第23-25页 |
| ·研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 吉兰泰盐湖土壤中嗜盐碱放线菌的分离和筛选 | 第26-36页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·样品采集 | 第26页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·酶制剂 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·吉兰泰盐湖中嗜盐碱放线菌的分离 | 第27页 |
| ·分离菌株的 16S rDNA酶切多态性分析及序列测序 | 第27-29页 |
| ·Ectoine生产菌株的筛选 | 第29-30页 |
| ·分离菌株的耐盐度实验 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·吉兰泰盐湖土壤中嗜盐放线菌的分离纯化 | 第30页 |
| ·吉兰泰盐湖土壤中嗜碱放线菌的分离纯化 | 第30-31页 |
| ·16S rDNA酶切多态性分析及序列测定结果 | 第31-33页 |
| ·Ectoine生产菌株的筛选结果 | 第33-34页 |
| ·分离菌株的耐盐度 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 四氢嘧啶合成酶基因在大肠杆菌中的异源表达 | 第36-57页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·菌株、引物与质粒 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·缓冲液 | 第36-37页 |
| ·蛋白纯化分析相关试剂 | 第37页 |
| ·蛋白分析相关试剂 | 第37-38页 |
| ·抗生素及酶制剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·Act12耐盐梯度及胞内积累ectoine的检测 | 第38页 |
| ·Act12中ectoine合成相关基因的序列分析 | 第38页 |
| ·Ectoine基因克隆载体的构建 | 第38-41页 |
| ·Ectoine基因表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·蛋白质的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·诱导蛋白的镍柱纯化 | 第43页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第43-44页 |
| ·含pET-28a+ectABC质粒的BL21（DE3）盐耐受实验 | 第44页 |
| ·核苷酸序列登录号 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-55页 |
| ·Act12耐盐度及胞内ectoine的积累 | 第44-45页 |
| ·HPLC检测Act12胞内ectoine | 第45-46页 |
| ·Ectoine基因簇及ectABC的生物信息学分析 | 第46-47页 |
| ·ectA-aa、ectB-aa、ectC-aa序列同源比对结果 | 第47页 |
| ·ectABC序列分析 | 第47-48页 |
| ·Ectoine基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·Ectoine基因克隆载体的构建 | 第49-50页 |
| ·Ectoine基因表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·ectABC基因的蛋白诱导表达及EctA的蛋白纯化 | 第52-54页 |
| ·含ectABC的BL21（DE3）盐耐受实验结果 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 天冬氨酸激酶与天冬氨酸半醛脱氢酶基因在Act12中过表达 | 第57-74页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·试剂及缓冲液 | 第57-58页 |
| ·抗生素及酶制剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-65页 |
| ·天冬氨酸激酶与天冬氨酸半醛脱氢酶基因的单拷贝克隆构建 | 第58-62页 |
| ·天冬氨酸激酶与天冬氨酸半醛脱氢酶基因的高拷贝克隆构建 | 第62-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-73页 |
| ·天冬氨酸激酶与天冬氨酸半醛脱氢酶基因的单拷贝克隆构建 | 第65-69页 |
| ·天冬氨酸激酶与天冬氨酸半醛脱氢酶基因的高拷贝克隆构建 | 第69-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
