摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
·固氮作用 | 第11页 |
·豆科植物和生物固氮 | 第11-17页 |
·豆科植物与根瘤菌 | 第11页 |
·根瘤器官的形成 | 第11-13页 |
·根瘤的类型:定型瘤和不定型瘤 | 第13-14页 |
·豆科植物结瘤分子机制 | 第14-17页 |
·植物基因功能研究技术 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
第二章 目的基因的时空表达分析与cDNA末端的快速扩增(RACE) | 第19-30页 |
·引言 | 第19页 |
·目的基因的时空表达分析 | 第19-21页 |
·材料、试剂和仪器 | 第21-22页 |
·实验材料及载体 | 第21页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-26页 |
·刺槐根总RNA的提取及基因组DNA的去除 | 第22-23页 |
·候选基因的cDNA末端快速扩增(RACE) | 第23-25页 |
·目的片段胶回收 | 第25页 |
·目的片段连接T载体并转化入大肠杆菌 | 第25页 |
·菌落PCR检测目的片段的连接情况 | 第25-26页 |
·质粒的提取 | 第26页 |
·全长的获得及序列分析 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-29页 |
·总RNA提取及基因组DNA的去除结果 | 第26-27页 |
·RACE反应结果 | 第27-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第三章 目的基因的亚细胞定位 | 第30-38页 |
·引言 | 第30页 |
·实验材料、仪器 | 第30页 |
·实验材料 | 第30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-33页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第30-32页 |
·基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第33-35页 |
·亚细胞定位结果与分析 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第四章 目的基因的RNA沉默与过表达 | 第38-67页 |
·引言 | 第38页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第38页 |
·实验材料 | 第38页 |
·试剂与配方 | 第38页 |
·实验仪器 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-45页 |
·RNAi载体的构建 | 第38-41页 |
·过量表达载体的构建 | 第41页 |
·重组质粒电转化发根农杆菌K599 | 第41-42页 |
·刺槐的转化体系 | 第42-43页 |
·实验结果鉴定 | 第43-45页 |
·结果与分析 | 第45-65页 |
·目的基因的扩增结果 | 第45-46页 |
·RNA沉默载体的构建 | 第46-47页 |
·过量表达载体的构建 | 第47-48页 |
·转化苗植株表型检测 | 第48-52页 |
·刺槐根部提取的总RNA质量检测 | 第52-53页 |
·干扰及过表达效率检测 | 第53-56页 |
·转化苗植株表型及根瘤的形态 | 第56-63页 |
·根瘤显微形态观测 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第五章 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80页 |