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刺槐中三个新分离基因在共生固氮过程中的功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-19页
   ·固氮作用第11页
   ·豆科植物和生物固氮第11-17页
     ·豆科植物与根瘤菌第11页
     ·根瘤器官的形成第11-13页
     ·根瘤的类型:定型瘤和不定型瘤第13-14页
     ·豆科植物结瘤分子机制第14-17页
   ·植物基因功能研究技术第17-18页
   ·技术路线第18-19页
第二章 目的基因的时空表达分析与cDNA末端的快速扩增(RACE)第19-30页
   ·引言第19页
   ·目的基因的时空表达分析第19-21页
   ·材料、试剂和仪器第21-22页
     ·实验材料及载体第21页
     ·实验试剂第21页
     ·实验仪器第21-22页
   ·实验方法第22-26页
     ·刺槐根总RNA的提取及基因组DNA的去除第22-23页
     ·候选基因的cDNA末端快速扩增(RACE)第23-25页
     ·目的片段胶回收第25页
     ·目的片段连接T载体并转化入大肠杆菌第25页
     ·菌落PCR检测目的片段的连接情况第25-26页
     ·质粒的提取第26页
     ·全长的获得及序列分析第26页
   ·结果与分析第26-29页
     ·总RNA提取及基因组DNA的去除结果第26-27页
     ·RACE反应结果第27-29页
   ·讨论第29-30页
第三章 目的基因的亚细胞定位第30-38页
   ·引言第30页
   ·实验材料、仪器第30页
     ·实验材料第30页
     ·实验仪器第30页
   ·实验方法第30-33页
     ·亚细胞定位载体的构建第30-32页
     ·基因枪转化洋葱表皮细胞第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·亚细胞定位载体的构建第33-35页
     ·亚细胞定位结果与分析第35-37页
   ·讨论第37-38页
第四章 目的基因的RNA沉默与过表达第38-67页
   ·引言第38页
   ·实验材料、试剂和仪器第38页
     ·实验材料第38页
     ·试剂与配方第38页
     ·实验仪器第38页
   ·实验方法第38-45页
     ·RNAi载体的构建第38-41页
     ·过量表达载体的构建第41页
     ·重组质粒电转化发根农杆菌K599第41-42页
     ·刺槐的转化体系第42-43页
     ·实验结果鉴定第43-45页
   ·结果与分析第45-65页
     ·目的基因的扩增结果第45-46页
     ·RNA沉默载体的构建第46-47页
     ·过量表达载体的构建第47-48页
     ·转化苗植株表型检测第48-52页
     ·刺槐根部提取的总RNA质量检测第52-53页
     ·干扰及过表达效率检测第53-56页
     ·转化苗植株表型及根瘤的形态第56-63页
     ·根瘤显微形态观测第63-65页
   ·讨论第65-67页
第五章 结论第67-68页
参考文献第68-75页
附录第75-79页
致谢第79-80页
作者简介第80页

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