摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
·ABA的结构性质 | 第13-14页 |
·ABA的生理功能 | 第14-15页 |
·ABA调控植物的生长发育 | 第14页 |
·在植物逆境胁迫响应中ABA的生理作用 | 第14-15页 |
·植物体内ABA信号转导的核心组分 | 第15-19页 |
·ABA受体 | 第16-18页 |
·SNFl相关蛋白激酶 2(SNRK2)正调控ABA信号转导 | 第18-19页 |
·植物体内ABA的信号转导途径 | 第19-20页 |
·ABI5家族转录因子的研究现状 | 第20-21页 |
·PKS5的研究进展 | 第21页 |
·本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
·本实验的研究技术路线 | 第22-24页 |
第二章 ABI5磷酸化部位的确定 | 第24-29页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第24-25页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验试剂 | 第24-25页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-27页 |
·拟南芥Col-0 的种植 | 第25页 |
·制备农杆菌GV3101菌株感受态 | 第25-26页 |
·农杆菌介导的电击转化 | 第26页 |
·浸花法获得转基因植物 (floral dip) | 第26页 |
·转基因植株植株的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
·ABI5不同磷酸化位点的免疫印迹分析与检测 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第三章 ABI5主要磷酸化位点的克隆 | 第29-36页 |
·实验材料、试剂及仪器 | 第29-30页 |
·实验材料 | 第29页 |
·实验试剂 | 第29-30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-36页 |
·拟南芥总RNA的提取 | 第30页 |
·用 1%琼脂糖凝胶电泳检测提取的RNA | 第30-31页 |
·cDNA的合成 | 第31页 |
·目的基因载体的构建 | 第31-35页 |
·目的基因的序列比对分析 | 第35-36页 |
第四章 ABI5主要磷酸化位点的鉴定 | 第36-39页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验仪器 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37页 |
·表达载体的构建 | 第37页 |
·突变体蛋白的提取纯化 | 第37页 |
·SDS-PAGE和CBB染色分析PKS5对ABI5的磷酸化作用 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第五章 ABI5特异性磷酸化抗体的制备、检测和效价 | 第39-43页 |
·ABI5特异性磷酸化抗体的制备 | 第39页 |
·实验材料和试剂 | 第39页 |
·实验仪器 | 第39页 |
·实验方法 | 第39页 |
·WB检测ABI5磷酸化抗体的特异性 | 第39-40页 |
·实验材料 | 第39页 |
·实验试剂 | 第39-40页 |
·实验仪器 | 第40页 |
·实验方法 | 第40页 |
·ABI5特异性磷酸化抗体的效价 | 第40-41页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·实验试剂 | 第41页 |
·实验仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-42页 |
·WB检测ABI5磷酸化抗体的特异性 | 第41-42页 |
·ABI5特异性磷酸化抗体的效价 | 第42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第六章 ABI5 Ser-42残基磷酸化修饰的转基因植株的获得及表型与功能分析 | 第43-50页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验试剂 | 第43页 |
·实验仪器 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-47页 |
·拟南芥的种植 | 第44页 |
·载体构建 | 第44-45页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第45-46页 |
·转基因植株的筛选与鉴定 | 第46页 |
·转基因植株的表型及功能分析 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-49页 |
·ABA对ABI5 Ser-42磷酸化突变体种子萌发的影响 | 第47-48页 |
·ABA处理下ABI5 Ser-42磷酸化突变体绿色子叶统计学分析 | 第48-49页 |
·不同转基因植株ABI5 Ser-42磷酸化状况的免疫印迹检测分析 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第七章 ABI5 Ser-42残基磷酸化修饰对ABI5转录激活活性影响的分析 | 第50-59页 |
·酵母单杂实验 | 第50-53页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-53页 |
·拟南芥原生质体转染实验 | 第53-55页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-55页 |
·结果与分析 | 第55-57页 |
·酵母单杂实验结果 | 第55-56页 |
·原生质体转染实验结果 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-59页 |
第八章 总结与展望 | 第59-61页 |
·总结 | 第59页 |
·实验创新点 | 第59页 |
·后续实验计划 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68页 |