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ABA反应关键下游转录因子ABI5 Ser-42残基磷酸化修饰及生物学功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·ABA的结构性质第13-14页
   ·ABA的生理功能第14-15页
     ·ABA调控植物的生长发育第14页
     ·在植物逆境胁迫响应中ABA的生理作用第14-15页
   ·植物体内ABA信号转导的核心组分第15-19页
     ·ABA受体第16-18页
     ·SNFl相关蛋白激酶 2(SNRK2)正调控ABA信号转导第18-19页
   ·植物体内ABA的信号转导途径第19-20页
   ·ABI5家族转录因子的研究现状第20-21页
   ·PKS5的研究进展第21页
   ·本研究的目的及意义第21-22页
   ·本实验的研究技术路线第22-24页
第二章 ABI5磷酸化部位的确定第24-29页
   ·实验材料、试剂和仪器第24-25页
     ·实验材料第24页
     ·实验试剂第24-25页
     ·实验仪器第25页
   ·实验方法第25-27页
     ·拟南芥Col-0 的种植第25页
     ·制备农杆菌GV3101菌株感受态第25-26页
     ·农杆菌介导的电击转化第26页
     ·浸花法获得转基因植物 (floral dip)第26页
     ·转基因植株植株的筛选与鉴定第26-27页
     ·ABI5不同磷酸化位点的免疫印迹分析与检测第27页
   ·结果与分析第27-28页
   ·小结第28-29页
第三章 ABI5主要磷酸化位点的克隆第29-36页
   ·实验材料、试剂及仪器第29-30页
     ·实验材料第29页
     ·实验试剂第29-30页
     ·实验仪器第30页
   ·实验方法第30-36页
     ·拟南芥总RNA的提取第30页
     ·用 1%琼脂糖凝胶电泳检测提取的RNA第30-31页
     ·cDNA的合成第31页
     ·目的基因载体的构建第31-35页
     ·目的基因的序列比对分析第35-36页
第四章 ABI5主要磷酸化位点的鉴定第36-39页
   ·实验材料、试剂和仪器第36-37页
     ·实验材料第36页
     ·实验仪器第36-37页
   ·实验方法第37页
     ·表达载体的构建第37页
     ·突变体蛋白的提取纯化第37页
     ·SDS-PAGE和CBB染色分析PKS5对ABI5的磷酸化作用第37页
   ·结果与分析第37-38页
   ·小结第38-39页
第五章 ABI5特异性磷酸化抗体的制备、检测和效价第39-43页
   ·ABI5特异性磷酸化抗体的制备第39页
     ·实验材料和试剂第39页
     ·实验仪器第39页
     ·实验方法第39页
   ·WB检测ABI5磷酸化抗体的特异性第39-40页
     ·实验材料第39页
     ·实验试剂第39-40页
     ·实验仪器第40页
     ·实验方法第40页
   ·ABI5特异性磷酸化抗体的效价第40-41页
     ·实验材料第40-41页
     ·实验试剂第41页
     ·实验仪器第41页
     ·实验方法第41页
   ·结果与分析第41-42页
     ·WB检测ABI5磷酸化抗体的特异性第41-42页
     ·ABI5特异性磷酸化抗体的效价第42页
   ·小结第42-43页
第六章 ABI5 Ser-42残基磷酸化修饰的转基因植株的获得及表型与功能分析第43-50页
   ·实验材料、试剂和仪器第43-44页
     ·实验材料第43页
     ·实验试剂第43页
     ·实验仪器第43-44页
   ·实验方法第44-47页
     ·拟南芥的种植第44页
     ·载体构建第44-45页
     ·农杆菌介导的遗传转化第45-46页
     ·转基因植株的筛选与鉴定第46页
     ·转基因植株的表型及功能分析第46-47页
   ·结果与分析第47-49页
     ·ABA对ABI5 Ser-42磷酸化突变体种子萌发的影响第47-48页
     ·ABA处理下ABI5 Ser-42磷酸化突变体绿色子叶统计学分析第48-49页
     ·不同转基因植株ABI5 Ser-42磷酸化状况的免疫印迹检测分析第49页
   ·小结第49-50页
第七章 ABI5 Ser-42残基磷酸化修饰对ABI5转录激活活性影响的分析第50-59页
   ·酵母单杂实验第50-53页
     ·实验材料、试剂和仪器第50页
     ·实验方法第50-53页
   ·拟南芥原生质体转染实验第53-55页
     ·实验材料、试剂和仪器第54页
     ·实验方法第54-55页
   ·结果与分析第55-57页
     ·酵母单杂实验结果第55-56页
     ·原生质体转染实验结果第56-57页
   ·小结第57-59页
第八章 总结与展望第59-61页
   ·总结第59页
   ·实验创新点第59页
   ·后续实验计划第59-61页
参考文献第61-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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