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印楝再生体系优化及其遗传转化的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
1 前言第10-20页
   ·印楝树组织培养研究进展第10-12页
     ·植物组织培养概况第10页
     ·印楝概况第10-11页
     ·印楝组织培养现状第11-12页
   ·木本植物转基因研究进展第12-14页
     ·抑制木本植物遗传转化的因子第12页
     ·木本植物遗传转化受体选择及其方法第12-14页
     ·影响植物遗传转化效率的因素第14页
   ·农杆菌介导的植物遗传转化体系的研究进展第14-16页
     ·农杆菌介导遗传转化的原理第15页
     ·农杆菌介导遗传转化的优点第15页
     ·转化体的筛选与培养第15-16页
   ·Bt基因的研究现状第16-17页
     ·Bt基因的简介第16-17页
     ·Bt基因的杀虫原理第17页
     ·Bt基因在植物抗虫方面研究第17页
   ·研究目的和意义第17-19页
   ·技术路线第19-20页
2 材料和方法第20-34页
   ·试验材料第20-23页
     ·印楝植物材料第20页
     ·菌株和载体质粒第20-21页
     ·主要工具酶和试剂第21-22页
     ·培养基及其配方第22-23页
     ·实验器材设备第23页
     ·引物第23页
   ·实验方法第23-34页
     ·印楝再生体系的建立第23-26页
     ·cry3A表达载体的构建第26-28页
     ·pCAMBIA1301质粒的获取第28页
     ·质粒pCAMBIA1301的扩增、提取、并双酶切割胶回收第28-29页
     ·构建pCAMBIA1301-cry3A重组载体第29-30页
     ·农杆菌(LBA4404)电击感受态细胞制备第30页
     ·重组表达载体转化农杆菌LBA4404第30-31页
     ·农杆菌转化子菌液PCR鉴定第31页
     ·影响印楝遗传转化因素的研究第31-32页
     ·农杆菌介导印楝愈伤组织基因转化的方法第32页
     ·印楝抗性愈伤组织(转化体)的鉴定第32页
     ·数据统计及分析方法第32-34页
3 结果分析第34-48页
   ·印楝再生体系的建立第34-43页
     ·腋芽的诱导和芽的增殖第34-37页
     ·不同激素组合对印楝不同的外植体诱导愈伤的影响第37-39页
     ·不同激素浓度对印楝愈伤组织分化的影响第39-41页
     ·IBA的不同浓度对印楝苗生根影响第41-43页
   ·表达载体质粒的构建与鉴定第43-44页
     ·目的基因的克隆和构建第43-44页
     ·1301-cry3A重组质粒的鉴定第44页
   ·影响印楝遗传转化因素的研究第44-47页
     ·印楝愈伤组织对潮霉素的敏感性第44-45页
     ·农杆菌菌液浓度对印楝转化的影响第45页
     ·农杆菌侵染印楝愈伤的时间对转化的影响第45-46页
     ·乙酰丁香酮对愈伤存活率的影响第46-47页
   ·GUS染色检测结果第47-48页
4 讨论第48-51页
   ·印楝腋芽增殖第48页
   ·印楝不同器官诱导的愈伤组织影响第48-49页
   ·印楝愈伤继代再生第49页
   ·印楝的生根第49-50页
   ·印楝遗传转化中的受体分析第50-51页
5 结论第51-52页
   ·优化了印楝再生体系第51页
   ·初步建立了印楝的遗传转化体系第51-52页
参考文献第52-57页
附录第57-59页
致谢第59页

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