摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
1 前言 | 第10-20页 |
·印楝树组织培养研究进展 | 第10-12页 |
·植物组织培养概况 | 第10页 |
·印楝概况 | 第10-11页 |
·印楝组织培养现状 | 第11-12页 |
·木本植物转基因研究进展 | 第12-14页 |
·抑制木本植物遗传转化的因子 | 第12页 |
·木本植物遗传转化受体选择及其方法 | 第12-14页 |
·影响植物遗传转化效率的因素 | 第14页 |
·农杆菌介导的植物遗传转化体系的研究进展 | 第14-16页 |
·农杆菌介导遗传转化的原理 | 第15页 |
·农杆菌介导遗传转化的优点 | 第15页 |
·转化体的筛选与培养 | 第15-16页 |
·Bt基因的研究现状 | 第16-17页 |
·Bt基因的简介 | 第16-17页 |
·Bt基因的杀虫原理 | 第17页 |
·Bt基因在植物抗虫方面研究 | 第17页 |
·研究目的和意义 | 第17-19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
2 材料和方法 | 第20-34页 |
·试验材料 | 第20-23页 |
·印楝植物材料 | 第20页 |
·菌株和载体质粒 | 第20-21页 |
·主要工具酶和试剂 | 第21-22页 |
·培养基及其配方 | 第22-23页 |
·实验器材设备 | 第23页 |
·引物 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-34页 |
·印楝再生体系的建立 | 第23-26页 |
·cry3A表达载体的构建 | 第26-28页 |
·pCAMBIA1301质粒的获取 | 第28页 |
·质粒pCAMBIA1301的扩增、提取、并双酶切割胶回收 | 第28-29页 |
·构建pCAMBIA1301-cry3A重组载体 | 第29-30页 |
·农杆菌(LBA4404)电击感受态细胞制备 | 第30页 |
·重组表达载体转化农杆菌LBA4404 | 第30-31页 |
·农杆菌转化子菌液PCR鉴定 | 第31页 |
·影响印楝遗传转化因素的研究 | 第31-32页 |
·农杆菌介导印楝愈伤组织基因转化的方法 | 第32页 |
·印楝抗性愈伤组织(转化体)的鉴定 | 第32页 |
·数据统计及分析方法 | 第32-34页 |
3 结果分析 | 第34-48页 |
·印楝再生体系的建立 | 第34-43页 |
·腋芽的诱导和芽的增殖 | 第34-37页 |
·不同激素组合对印楝不同的外植体诱导愈伤的影响 | 第37-39页 |
·不同激素浓度对印楝愈伤组织分化的影响 | 第39-41页 |
·IBA的不同浓度对印楝苗生根影响 | 第41-43页 |
·表达载体质粒的构建与鉴定 | 第43-44页 |
·目的基因的克隆和构建 | 第43-44页 |
·1301-cry3A重组质粒的鉴定 | 第44页 |
·影响印楝遗传转化因素的研究 | 第44-47页 |
·印楝愈伤组织对潮霉素的敏感性 | 第44-45页 |
·农杆菌菌液浓度对印楝转化的影响 | 第45页 |
·农杆菌侵染印楝愈伤的时间对转化的影响 | 第45-46页 |
·乙酰丁香酮对愈伤存活率的影响 | 第46-47页 |
·GUS染色检测结果 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
·印楝腋芽增殖 | 第48页 |
·印楝不同器官诱导的愈伤组织影响 | 第48-49页 |
·印楝愈伤继代再生 | 第49页 |
·印楝的生根 | 第49-50页 |
·印楝遗传转化中的受体分析 | 第50-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
·优化了印楝再生体系 | 第51页 |
·初步建立了印楝的遗传转化体系 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |