| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·表观遗传 | 第9-12页 |
| ·植物胞嘧啶甲基转移酶 | 第10-11页 |
| ·植物胞嘧啶甲基化的意义 | 第11-12页 |
| ·天然橡胶 | 第12-13页 |
| ·我国橡胶树种植情况 | 第13页 |
| ·我国天然橡胶的需求量 | 第13页 |
| ·自根幼态无性系 | 第13-15页 |
| ·DNA甲基化的研究方法 | 第15-16页 |
| ·天然橡胶合成分子机制 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·材料与试剂 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·质粒及菌株 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·实验常用溶液即培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·RNA提取 | 第20-21页 |
| ·普通RNA提取 | 第20页 |
| ·胶乳RNA提取 | 第20-21页 |
| ·反转录 | 第21-23页 |
| ·反转录cDNA第一链合成 | 第21页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第21-22页 |
| ·3'-RACE的制备 | 第22页 |
| ·5'-RACE模板的制备 | 第22-23页 |
| ·切胶回收 | 第23-24页 |
| ·连接反应 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第24-26页 |
| ·化转感受态(大肠杆菌)细胞制备(CaCl2法) | 第24-25页 |
| ·电转化感受态(大肠杆菌)细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA提取 | 第26页 |
| ·PCR扩增反应 | 第26-27页 |
| ·HbMET、HbCMT以及HbDRM的获得 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增 | 第28页 |
| ·HbMET、HbCMT以及HbDRM基因表达分析 | 第28-29页 |
| ·基因的组织特异性表达分析 | 第28-29页 |
| ·基因在自根幼态无性系与其供体胶乳的差异表达分析 | 第29页 |
| ·亚硫酸氢盐测序 | 第29-31页 |
| ·DNA提取 | 第29-30页 |
| ·DNA亚硫酸氢盐处理 | 第30-31页 |
| ·橡胶生物合成关键酶基因启动子部分的PCR扩增 | 第31页 |
| ·自根幼态无性系和供体中橡胶生物合成关键酶基因的表达分析 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| ·RNA的提取 | 第33页 |
| ·HbMET基因克隆和生物信息学分析 | 第33-34页 |
| ·HbMET克隆 | 第33-34页 |
| ·HbMET生物信息学分析 | 第34页 |
| ·HbCMT基因克隆和生物信息学分析 | 第34-41页 |
| ·HbCMT克隆 | 第34-39页 |
| ·HbCMT生物信息学分析 | 第39-41页 |
| ·HbDRM基因克隆和生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·HbDRM克隆 | 第41页 |
| ·HbDRM生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·HbMET、HbCMT和HbDRM的表达分析 | 第44-45页 |
| ·HbMET、HbCMT和HbDRM在不同组织的表达 | 第44-45页 |
| ·HbMET、HbCMT和HbDRM在自根幼态无性系与其供体胶乳的差异表达 | 第45页 |
| ·自根幼态系和供体中橡胶生物合成关键酶基因启动子甲基化分析 | 第45-49页 |
| ·DNA的提取 | 第45-47页 |
| ·亚硫酸氢盐处理DNA | 第47页 |
| ·PCR扩增橡胶生物合成关键酶基因启动子 | 第47-48页 |
| ·测序结果 | 第48-49页 |
| ·自根幼态无性系和供体胶乳中橡胶生物合成关键酶基因表达分析 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·关于HbMET、HbCMT和HbDRM生物信息学分析 | 第51页 |
| ·胞嘧啶甲基化酶基因与DNA甲基化的关系 | 第51-52页 |
| ·表观遗传与橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
