| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| ·ES细胞研究概况 | 第12-14页 |
| ·iPS细胞研究概况 | 第14-17页 |
| ·iPS细胞系的建立 | 第14-15页 |
| ·iPS细胞诱导体系的优化 | 第15-17页 |
| ·线粒体 | 第17-24页 |
| ·线粒体概述 | 第17-19页 |
| ·线粒体和多能性之间的关系 | 第19-22页 |
| ·线粒体分裂蛋白Drp1 | 第22-23页 |
| ·Parkin与帕金森氏病 | 第23-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 Drp1与ES细胞多能性维持以及分化之间的关系 | 第26-62页 |
| 第一节 导言 | 第26-27页 |
| 第二节 材料和方法 | 第27-45页 |
| ·细胞来源和品系 | 第27页 |
| ·主要仪器耗材和设备 | 第27-30页 |
| ·细胞分离与培养 | 第30-34页 |
| ·ES细胞多能性检测 | 第34-40页 |
| ·细胞增殖时间检测 | 第40页 |
| ·Drpl knockdown by shRNA in ES | 第40-41页 |
| ·蛋白质印迹检测 | 第41-43页 |
| ·线粒体形态检测 | 第43页 |
| ·免疫荧光共定位检测 | 第43-44页 |
| ·线粒体膜电位检测 | 第44页 |
| ·线粒体的电镜样品制备 | 第44-45页 |
| ·统计学分析 | 第45页 |
| 第三节 实验结果 | 第45-59页 |
| ·线粒体在ES和MEF细胞中存在明显差异 | 第45-47页 |
| ·Drp1在ES和MEF细胞中表达形式的差异 | 第47-48页 |
| ·Drp1修饰方式的初步检测 | 第48页 |
| ·ES中Drp1 kd稳定细胞系的建立 | 第48-49页 |
| ·Drp1 knockdown与ES细胞多能性的关系 | 第49-51页 |
| ·Drp1 knockdown对ES细胞体外分化的影响 | 第51-56页 |
| ·Drp1 knockdown对ES细胞体内分化的影响 | 第56页 |
| ·Drp1 knockdown对ES细胞线粒体的影响及机制探讨 | 第56-59页 |
| 第四节 讨论 | 第59-62页 |
| 第三章 Drp1与iPS诱导之间的关系 | 第62-84页 |
| 第一节 导言 | 第62-63页 |
| 第二节 实验材料和方法 | 第63-73页 |
| ·细胞来源和品系 | 第63页 |
| ·主要仪器耗材和设备 | 第63-66页 |
| ·iPS诱导 | 第66-69页 |
| ·iPS细胞多能性鉴定 | 第69-72页 |
| ·Drpl knockdown by shRNA in MEF | 第72页 |
| ·统计学分析 | 第72-73页 |
| 第三节 实验结果 | 第73-82页 |
| ·线粒体形态和Drp1表达形式在iPS细胞中存在差异 | 第73-74页 |
| ·Drp1 knockdown稳定细胞系的建立 | 第74-76页 |
| ·Drp1 knockdown的MEF细胞可成功被诱导为iPS细胞 | 第76-79页 |
| ·Drp1 knockdown对iPS多能性的影响 | 第79-81页 |
| ·Drp1 knockdown对iPS线粒体的影响 | 第81-82页 |
| 第四节 讨论 | 第82-84页 |
| 第四章 Parkin KO细胞iPS的建立与分析 | 第84-107页 |
| 第一节 导言 | 第84页 |
| 第二节 材料和方法 | 第84-92页 |
| ·细胞来源和动物品系 | 第84-85页 |
| ·主要仪器耗材和设备 | 第85页 |
| ·Parkin-KO TTF细胞的分离和培养 | 第85页 |
| ·Parkin-KO TTF细胞的鉴定 | 第85-86页 |
| ·线粒体DNA拷贝数检测 | 第86页 |
| ·iPS诱导 | 第86-88页 |
| ·iPS细胞多能性检测 | 第88-91页 |
| ·iPS细胞体外拟胚体(EB)分化能力检测 | 第91-92页 |
| ·统计学分析 | 第92页 |
| 第三节 实验结果 | 第92-105页 |
| ·Parkin-KO细胞系的鉴定 | 第92-93页 |
| ·Parkin-KO不影响细胞的增殖 | 第93-94页 |
| ·Parkin-KO不影响细胞内线粒体的拷贝数 | 第94页 |
| ·Parkin-KO来源iPS的获得以及iPS的诱导效率 | 第94-97页 |
| ·Parkin-KO细胞来源的iPS具有多能性因子的表达 | 第97-100页 |
| ·Parkin-KO细胞来源的iPS自发分化能力 | 第100-102页 |
| ·Parkin-KO细胞来源的iPS细胞RA诱导下分化能力 | 第102-105页 |
| 第四节 讨论 | 第105-107页 |
| 第五章 结论 | 第107-108页 |
| 附录1 中英文缩略词 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 个人简历 在学期间参与发表的学术论文 | 第123-124页 |
