| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-33页 |
| ·甘蓝型油菜种子含油量研究进展 | 第16-19页 |
| ·甘蓝型油菜高油育种现状 | 第16页 |
| ·甘蓝型油菜高油传统育种 | 第16-17页 |
| ·甘蓝型油菜种子含油量合成机制 | 第17-18页 |
| ·甘蓝型油菜高油现代生物技术育种 | 第18-19页 |
| ·植物种子含油量相关转录因子研究进展 | 第19-26页 |
| ·植物种子含油量相关的转录因子 | 第19-22页 |
| ·WRINKLED1(WR11)基因研究进展 | 第22-23页 |
| ·GLABRA2(GL2)基因研究进展 | 第23-26页 |
| ·甘蓝型油菜功能基因组学研究进展 | 第26-28页 |
| ·甘蓝型油菜基因组的特点 | 第26-27页 |
| ·甘蓝型油菜功能基因组学研究进展 | 第27-28页 |
| ·反向遗传学TILLING 技术的原理与应用 | 第28-31页 |
| ·TILLING 技术的原理 | 第28-29页 |
| ·TILLING 技术的应用 | 第29-31页 |
| ·本研究问题的提出及其研究目的和意义 | 第31-33页 |
| ·研究内容和意义 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 甘蓝型油菜WR11 基因的克隆及功能研究 | 第33-46页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·酶及其它实验耗材 | 第33页 |
| ·载体和菌株 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-41页 |
| ·甘蓝型油菜总RNA 的提取及cDNA 的获得 | 第34-35页 |
| ·WR11 基因RNAi 片段的设计及扩增 | 第35-38页 |
| ·WR11 基因RNAi 载体的构建及检测 | 第38-39页 |
| ·甘蓝型油菜的转化及筛选 | 第39-40页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第40页 |
| ·转基因植株种子含油量的测定 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·甘蓝型油菜WR11 基因RNAi 片段的扩增 | 第41页 |
| ·WR11 基因RNAi 载体的构建 | 第41-42页 |
| ·甘蓝型油菜转基因植株的获得及分子检测 | 第42页 |
| ·转基因植株的RT-PCR 分析 | 第42-44页 |
| ·转基因植株种子含油量的分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 芸薹属GL2 同源基因的克隆及其表达模式的分析 | 第46-61页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·酶及其它实验耗材 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-52页 |
| ·甘蓝型油菜BnaC.GL2.b cDNA 的克隆 | 第46-47页 |
| ·基因组DNA 的提取及cDNA 的获得 | 第47-48页 |
| ·甘蓝型油菜GL2 基因5’非翻译区的扩增 | 第48-50页 |
| ·甘蓝型油菜、甘蓝、白菜型油菜GL2 同源基因的克隆 | 第50页 |
| ·生物信息学分析 | 第50-52页 |
| ·半定量RT-PCR 检测四个GL2 同源基因的表达模式 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-59页 |
| ·甘蓝型油菜BnaC.GL2.b cDNA 序列分析 | 第52页 |
| ·甘蓝型油菜GL2 基因5’非翻译区的确定 | 第52-53页 |
| ·芸薹属四个GL2 同源基因的序列特征分析 | 第53-55页 |
| ·芸薹属四个GL2 编码蛋白分析 | 第55-58页 |
| ·芸薹属四个GL2 同源基因的表达模式分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 甘蓝型油菜BnaC.GL2.b 基因的功能验证及功能标记的开发 | 第61-79页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·酶及其它实验耗材 | 第61页 |
| ·载体和菌株 | 第61-62页 |
| ·实验方法 | 第62-68页 |
| ·BnaC.GL2.b 基因瞬时表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·瞬时表达载体的基因枪转化 | 第63-64页 |
| ·BnaC.GL2.b 基因过表达及反义载体的构建 | 第64页 |
| ·植物表达载体对根癌农杆菌EHA105 的转化 | 第64-65页 |
| ·拟南芥的转化及筛选 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的分子检测及表型鉴定 | 第66-67页 |
| ·转基因植株种子含油量的测定 | 第67页 |
| ·芸薹属A/C 基因组特异引物的设计和特异酶切位点的鉴定 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-77页 |
| ·BnaC.GL2.b 基因瞬时表达载体的构建 | 第68页 |
| ·BnaC.GL2.b 基因在洋葱中的瞬时表达 | 第68-71页 |
| ·BnaC.GL2.b 基因过表达及反义载体的构建 | 第71-72页 |
| ·拟南芥转基因植株的分子检测及表型观察 | 第72-75页 |
| ·转基因植株种子含油量分析 | 第75页 |
| ·芸薹属A/C 基因组特异功能标记的开发 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第五章 甘蓝型油菜EMS 突变体库的构建及其正向遗传学评估 | 第79-87页 |
| ·引言 | 第79页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·实验材料及试剂 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-81页 |
| ·甘蓝型油菜种子的EMS 诱变 | 第79-80页 |
| ·突变体库的创建及M2、M3 代田间表型调查 | 第80页 |
| ·M2 代种子含油量的测定及数据分析 | 第80-81页 |
| ·突变体库M2 代DNA 的提取及编号 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81-85页 |
| ·突变体库的构建及M2、M3 代田间表型调查 | 第81-84页 |
| ·突变体库M2 代种子含油量的变异 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 第六章 甘蓝型油菜TILLING 技术平台的构建及GL2 基因等位位点的筛选 | 第87-94页 |
| ·引言 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-90页 |
| ·BnaA.GL2.a 和BnaC.GL2.b 特异引物的设计 | 第87页 |
| ·CEL.1 酶的提取 | 第87-88页 |
| ·甘蓝型油菜TILLING 技术平台的建立及BnaA.GL2.a 突变体的筛选 | 第88-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-93页 |
| ·甘蓝型油菜TILLING 技术体系的建立 | 第90-91页 |
| ·BnaA.GL2.a 基因突变体的筛选 | 第91-93页 |
| ·讨论 | 第93-94页 |
| 第七章 全文结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 附录 | 第107-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 作者简介 | 第115页 |
