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TMEM8C、CTRP3基因对C2C12细胞成肌分化的调控作用研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-10页
縮略词表第10-11页
1 前言第11-20页
   ·研究问题的由来第11页
   ·骨骼肌生长发育调控相关研究第11-14页
     ·骨骼肌发生过程研究进展第11-12页
     ·肌细胞分化过程中主要调控因子研究进展第12-13页
     ·肌细胞分化相关信号通路研究进展第13-14页
   ·膜蛋白与肌肉发育相关研究进展第14-18页
     ·细胞膜脂质筏蛋白在肌细胞分化中的相关研究第14-15页
     ·其他膜蛋白在肌细胞分化中的相关研究第15-16页
     ·跨膜蛋白TMEM8C及其家族蛋白的相关研究第16-18页
   ·能量代谢分子对肌肉发育的调控第18-19页
     ·能量代谢对成肌细胞分化的影响第18页
     ·CTRP3与能量代谢调控的相关研究第18-19页
     ·CTRP3与成肌细胞分化的关系第19页
   ·研究的目的与意义第19-20页
2 材料与方法第20-35页
   ·材料第20-23页
     ·小鼠组织样品第20页
     ·细胞系、载体、菌株、siRNA第20-21页
       ·试验细胞系第20页
       ·试验载体第20-21页
       ·试验菌株第21页
       ·试验中用到的siRNA第21页
     ·试验试剂第21-22页
     ·主要试剂的配置第22页
     ·主要数据库和生物学软件第22-23页
   ·方法第23-33页
     ·技术路线第23页
     ·细胞培养第23-24页
       ·细胞的复苏及培养第23页
       ·细胞传代第23-24页
       ·细胞冻存第24页
     ·细胞转染试验第24-25页
       ·转染前的细胞准备第24页
       ·转染步驟第24-25页
     ·基因表达量分析第25-27页
       ·细胞总RNA抽提第25页
       ·RNA反转录第25-26页
       ·PCR及QPCR引物设计第26页
       ·PCR反应第26页
       ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,Q-PCR)第26-27页
     ·载体的构建及相关试验方法第27-32页
       ·TMEM8C和CTRP3超表达载体的构建第27-30页
       ·TMEM8C亚细胞定位载体的构建以及相关试验方法第30-31页
       ·TMEM8C上游序列启动活性载体的构建以及细胞试验第31-32页
     ·目的基因组织表达谱分析第32-33页
       ·组织的采取第32页
       ·组织样RNA抽提第32页
       ·组织样总RNA检测第32-33页
       ·组织样总RNA去基因组DNA第33页
       ·组织样总RNA反转录第33页
   ·引物设计第33-35页
3 结果第35-43页
   ·TMEM8C基因相关研究第35-41页
     ·TMEM8C蛋白结构的预测第35页
     ·TMEM8C组织表达谱第35-36页
     ·TMEM8C在C2C12细胞成肌分化过程中的表达规律第36-37页
     ·siRNA干扰TMEM8C抑制C2C12细胞成肌分化第37-38页
     ·siRNA干扰TMEM8C改变C2C12早期分化的细胞形态第38页
     ·TMEM8C在C2C12增殖期的亚细胞定位第38-39页
     ·TMEM8C转录调控的初步研究第39-41页
   ·CTRP3基因相关研究第41-43页
     ·CTRP3在C2C12细胞成肌分化过程中的表达规律第41页
     ·过表达CTRP3对C2C12成肌分化的影响第41-43页
4 讨论第43-46页
   ·关于TMEM8C研究的讨论第43-45页
     ·TMEM8C对成肌细胞分化的作用第43页
     ·TMEM8C亚细胞定位分析第43-44页
     ·关于TMEM8C转录调控的讨论第44-45页
   ·关于CTRP3研究的讨论第45-46页
5 小结第46-47页
   ·本研究的主要结果第46页
   ·本研究的创新点与特色第46页
   ·本研究的不足之处以及有待解决的问题第46-47页
参考文献第47-56页
致谢第56页

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