| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| ·弓形虫病及其危害 | 第12-13页 |
| ·弓形虫的生活史 | 第13-14页 |
| ·速殖子和缓殖子的相互转化 | 第14-16页 |
| ·宿主感染后的相互转化 | 第14-15页 |
| ·体外培养时的相互转化 | 第15-16页 |
| ·速殖子与缓殖子在分子水平上的差异 | 第16页 |
| ·弓形虫与宿主免疫 | 第16-19页 |
| ·先天性免疫应答在抗弓形虫感染中的作用 | 第16-17页 |
| ·获得性免疫应答在抗弓形虫感染中的作用 | 第17页 |
| ·细胞因子对宿主免疫应答的调节 | 第17-19页 |
| ·应激 | 第19-22页 |
| ·运输应激与免疫调节 | 第19-20页 |
| ·应激与病原感染的预后 | 第20-22页 |
| 2 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·试验材料 | 第23-27页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·菌种与质粒 | 第23-24页 |
| ·虫株与细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·抗生素和细菌培养基的配制 | 第24页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液 | 第25-26页 |
| ·ELISA缓冲液 | 第26页 |
| ·血清及酶标二抗 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-40页 |
| ·PCR引物的设计和合成 | 第27-28页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的收集与纯化 | 第28-29页 |
| ·Pru株组织包囊的动物接种与收集纯化 | 第29页 |
| ·BHK-21细胞的培养与传代 | 第29-30页 |
| ·弓形虫速殖子的体外培养 | 第30页 |
| ·弓形虫RH株速殖子向缓殖子的体外转化 | 第30-31页 |
| ·Pru株缓殖子向速殖子的体外转化 | 第31页 |
| ·Total RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR扩增弓形虫基因BAG1、SAG2C和SAG1 | 第32-33页 |
| ·目的基因片段的纯化与回收 | 第33-34页 |
| ·目的基因片段与T载体的连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35页 |
| ·阳性克隆的筛选与菌液PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·目的基因序列的测定与比对分析 | 第36页 |
| ·碱性条件和高温条件下诱导速殖子向缓殖子转化进程的监测 | 第36页 |
| ·Real-time PCR检测目的基因mRNA的相对表达水平 | 第36-37页 |
| ·半定量RT-PCR鉴定IFN-γ体外抑制缓殖子向速殖子的转化 | 第37-38页 |
| ·模拟运输应激对弓形虫慢性感染小鼠脑组织包囊的影响 | 第38页 |
| ·IFN-γ抑制模拟运输应激条件下脑组织包囊的再活化 | 第38-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-60页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的收集与纯化 | 第40页 |
| ·弓形虫PRU株脑组织包囊的收集与纯化 | 第40-41页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的体外培养 | 第41页 |
| ·弓形虫速殖子向缓殖子的体外诱导转化及其鉴定 | 第41-46页 |
| ·碱性条件下RH株速殖子向缓殖子的转化 | 第41-42页 |
| ·高温条件下RH株速殖子向缓殖子的转化 | 第42-43页 |
| ·速殖子向缓殖子体外转化的鉴定 | 第43-46页 |
| ·碱性诱导和高温热激下速殖子向缓殖子转化进程的监测 | 第46-47页 |
| ·碱性条件下速殖子向缓殖子转化进程的监测 | 第46-47页 |
| ·高温条件下速殖子向缓殖子转化进程的监测 | 第47页 |
| ·弓形虫PRU株缓殖子向速殖子的体外诱导转化及其鉴定 | 第47-49页 |
| ·IFN-γ体外抑制缓殖子向速殖子的转化 | 第49-54页 |
| ·IFN-γ抑制人工诱导的缓殖子向速殖子的转化 | 第49-51页 |
| ·IFN-γ抑制PRU株天然缓殖子向速殖子的转化 | 第51-52页 |
| ·不同浓度IFN-γ对缓殖子向速殖子转化的抑制作用 | 第52-54页 |
| ·弓形虫慢性感染小鼠模型的建立 | 第54-55页 |
| ·模拟运输应激人工诱发慢性感染小鼠脑包囊活化 | 第55-56页 |
| ·IFN-γ体内抑制缓殖子向速殖子的转化 | 第56-60页 |
| ·植物血凝素PHA对正常小鼠体内IFN-γ的诱生作用 | 第56-57页 |
| ·聚肌胞苷酸PolyI：C对正常小鼠体内IFN-γ的诱生作用 | 第57-59页 |
| ·PolyI：C抑制模拟运输应激条件下脑组织包囊的再活化 | 第59-60页 |
| 5 讨论 | 第60-64页 |
| ·速殖子与缓殖子的相互转化 | 第60-61页 |
| ·干扰素-γ体外抑制缓殖子向速殖子的转化 | 第61-62页 |
| ·干扰素-γ体内抑制缓殖子向速殖子的转化 | 第62-64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
