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PCV2感染相关的猪CD74基因的分子特征与功能初步研究

目录第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表(Abbreviation)第11-12页
1 文献综述第12-20页
   ·猪圆环病毒病概述第12页
   ·PCV2的病毒特征第12页
   ·PCV2的流行病学及危害第12-13页
     ·地理分布第12-13页
     ·易感动物第13页
     ·传播途径第13页
   ·PCV2的致病机理第13-14页
   ·PCV2感染PK-15细胞对信号通路的调节和细胞因子的影响第14-15页
   ·NF-κB第15-17页
     ·NF-κB家族第15页
     ·NF-κB家族在免疫细胞中的功能第15-16页
     ·由IκB和IKKs介导的NF-κB激活第16-17页
     ·NF-κB对免疫应答和炎性因子的影响第17页
   ·CD74基因第17-20页
     ·CD74基因分子结构第17页
     ·CD74分子功能研究第17-19页
     ·猪CD74基因研究进展第19-20页
2 研究目的与意义第20-21页
3 材料与方法第21-35页
   ·实验材料第21-25页
     ·菌株、质粒、细胞和病毒第21-23页
     ·主要试剂和试剂盒第23页
     ·培养基和主要试剂的配置第23-24页
     ·实验仪器和器械第24-25页
     ·实验动物第25页
     ·分子生物学分析软件第25页
   ·实验方法第25-35页
     ·重组质粒的构建第25-28页
     ·原核蛋白的表达、纯化以及检测第28-30页
     ·鼠多克隆抗体的制备第30页
     ·真核重组质粒的转染及检测第30-32页
     ·CD74蛋白的亚细胞定位第32页
     ·双荧光素酶报告实验第32-33页
     ·相对定量PCR检测CD74基因及各种细胞因子的mRNA水平第33-34页
     ·数据分析第34-35页
4 结果与分析第35-50页
   ·猪CD74的序列分析第35页
   ·CD74的系统进化树第35-38页
   ·PCV2感染对PK-15细胞CD74基因表达的影响第38页
   ·LPS和Poly(I:C)刺激PK-15细胞CD74基因的表达第38-40页
   ·CD74基因的组织特异性分布第40页
   ·重组质粒pET-32a-CD74和pcDNA3.1-CD74的构建与鉴定第40-42页
   ·CD74蛋白的纯化和Western Blot检测第42-43页
   ·CD74蛋白多克隆抗体的制备第43-44页
   ·CD74蛋白真核表达的检测第44-45页
   ·CD74蛋白的亚细胞定位第45页
   ·双荧光素酶试剂盒检测猪CD74对NF-κB信号通路的作用第45-47页
   ·Western Blot检测猪CD74对IκB表达以及p65核转位的影响第47页
   ·Real-Time PCR检测CD74对IL-6,IL-8和COX-2表达的影响第47-48页
   ·猪CD74与PCV2互作对NF-κB信号通路的影响第48-50页
5 讨论第50-54页
   ·LPS和poly (I:C)刺激对CD74基因表达的影响第51页
   ·猪CD74的组织特异性分布第51-52页
   ·PCV2对CD74基因表达的影响第52页
   ·猪CD74的亚细胞定位第52页
   ·猪CD74激活NF-κB信号通路第52-53页
   ·猪CD74对IL-6、IL-8和COX-2表达的影响第53-54页
6 小结第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61页

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