目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-20页 |
·猪圆环病毒病概述 | 第12页 |
·PCV2的病毒特征 | 第12页 |
·PCV2的流行病学及危害 | 第12-13页 |
·地理分布 | 第12-13页 |
·易感动物 | 第13页 |
·传播途径 | 第13页 |
·PCV2的致病机理 | 第13-14页 |
·PCV2感染PK-15细胞对信号通路的调节和细胞因子的影响 | 第14-15页 |
·NF-κB | 第15-17页 |
·NF-κB家族 | 第15页 |
·NF-κB家族在免疫细胞中的功能 | 第15-16页 |
·由IκB和IKKs介导的NF-κB激活 | 第16-17页 |
·NF-κB对免疫应答和炎性因子的影响 | 第17页 |
·CD74基因 | 第17-20页 |
·CD74基因分子结构 | 第17页 |
·CD74分子功能研究 | 第17-19页 |
·猪CD74基因研究进展 | 第19-20页 |
2 研究目的与意义 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-35页 |
·实验材料 | 第21-25页 |
·菌株、质粒、细胞和病毒 | 第21-23页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
·培养基和主要试剂的配置 | 第23-24页 |
·实验仪器和器械 | 第24-25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·分子生物学分析软件 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·重组质粒的构建 | 第25-28页 |
·原核蛋白的表达、纯化以及检测 | 第28-30页 |
·鼠多克隆抗体的制备 | 第30页 |
·真核重组质粒的转染及检测 | 第30-32页 |
·CD74蛋白的亚细胞定位 | 第32页 |
·双荧光素酶报告实验 | 第32-33页 |
·相对定量PCR检测CD74基因及各种细胞因子的mRNA水平 | 第33-34页 |
·数据分析 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-50页 |
·猪CD74的序列分析 | 第35页 |
·CD74的系统进化树 | 第35-38页 |
·PCV2感染对PK-15细胞CD74基因表达的影响 | 第38页 |
·LPS和Poly(I:C)刺激PK-15细胞CD74基因的表达 | 第38-40页 |
·CD74基因的组织特异性分布 | 第40页 |
·重组质粒pET-32a-CD74和pcDNA3.1-CD74的构建与鉴定 | 第40-42页 |
·CD74蛋白的纯化和Western Blot检测 | 第42-43页 |
·CD74蛋白多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
·CD74蛋白真核表达的检测 | 第44-45页 |
·CD74蛋白的亚细胞定位 | 第45页 |
·双荧光素酶试剂盒检测猪CD74对NF-κB信号通路的作用 | 第45-47页 |
·Western Blot检测猪CD74对IκB表达以及p65核转位的影响 | 第47页 |
·Real-Time PCR检测CD74对IL-6,IL-8和COX-2表达的影响 | 第47-48页 |
·猪CD74与PCV2互作对NF-κB信号通路的影响 | 第48-50页 |
5 讨论 | 第50-54页 |
·LPS和poly (I:C)刺激对CD74基因表达的影响 | 第51页 |
·猪CD74的组织特异性分布 | 第51-52页 |
·PCV2对CD74基因表达的影响 | 第52页 |
·猪CD74的亚细胞定位 | 第52页 |
·猪CD74激活NF-κB信号通路 | 第52-53页 |
·猪CD74对IL-6、IL-8和COX-2表达的影响 | 第53-54页 |
6 小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |