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拟南芥WRKY家族和AGO1对核盘菌抗性的调控功能分析

致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
目录第12-15页
第一章 文献综述与研究背景第15-33页
   ·引言第15页
   ·植物与核盘菌互作的研究进展第15-21页
     ·核盘菌的危害第15-16页
     ·核盘菌的生物学、生态学特性第16-17页
     ·作物菌核病的防治第17-18页
     ·核盘菌的致病因子第18-20页
       ·细胞壁降解酶第19页
       ·草酸第19-20页
     ·植物对核盘菌的抗性机理第20-21页
   ·拟南芥AGO蛋白第21-28页
     ·AGO蛋白的结构第21-23页
     ·AGO基因的表达第23页
     ·AGO蛋白的分子功能第23-25页
     ·AGO蛋白在植物抗病调控中的作用第25-26页
     ·AGO1的作用机制第26页
     ·AG01与21nt miRNA结合行使功能第26-27页
     ·AGOl与22ntmiRNA结合并引发次级miRNA的生成第27页
     ·AG01与SiRNA结合行使功能第27页
     ·AG01与一些特殊蛋白结合第27-28页
   ·拟南芥WRKY家族第28-31页
     ·WRKY蛋白结构特征第29页
     ·AtWRKY的表达第29-30页
     ·AtWRKY在植物抗病调控中的作用第30-31页
   ·本研究的意义和主要研究内容第31-33页
第二章 拟南芥AGO蛋白的亚细胞定位分析第33-45页
 前言第33页
   ·材料与方法第33-36页
     ·植物材料第33-34页
     ·载体、菌株及实验试剂第34页
     ·RNA的提取第34页
     ·AtAGO基因序列分析第34页
     ·AtAGO2全长cDNA序列克隆第34-35页
     ·AtAGO2细胞定位检测载体的构建及其农杆菌转化第35页
     ·AtAGO2细胞定位检测分析第35-36页
     ·诱抗剂BTH和JA处理对AtAGO2亚细胞定位的影响分析第36页
   ·结果与分析第36-43页
     ·拟南芥AGO基因序列分析第36-39页
       ·拟南芥AGO基因序列搜索第36-37页
       ·AtAGO蛋白的信号肽序列预测分析第37-38页
       ·AGO蛋白的核定位信号预测分析第38-39页
     ·AtAGO2细胞定位检测载体pCHF3-eGFP::AtAGO2的构建第39-40页
     ·AtAGO2蛋白细胞定位的激光共聚焦显微镜观察分析第40页
     ·诱抗剂处理对AtAGO2蛋白细胞定位的影响第40-43页
   ·讨论第43-45页
第三章 拟南芥AGO1对核盘菌的抗性调控功能分析第45-58页
 前言第45页
   ·材料与方法第45-50页
     ·植物材料第45-46页
     ·载体、菌株及实验试剂第46页
     ·RNA的提取及模板cDNA的获得第46页
     ·AtAGO1全长cDNA序列克隆第46-47页
     ·AtAGO1超表达载体的构建第47页
     ·拟南芥转化及转基因植株的筛选鉴定第47-48页
     ·转基因拟南芥纯合体获得第48页
     ·AtAGO1基因在转基因拟南芥株系植株中的表达水平第48-49页
     ·拟南芥AGO1突变体及超表达转基因株系的抗性分析第49-50页
       ·核盘菌接种处理第49页
       ·PR基因的qRT-PCR表达分析第49-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·AGO1超表达载体的构建第50-51页
     ·拟南芥转化及转基因植株的筛选鉴定第51页
     ·AtAGO1基因在转基因拟南芥株系植株中的表达水平第51-53页
     ·拟南芥AGO1基因突变体及超表达转基因株系的抗性分析第53-56页
       ·对核盘菌的抗性表型第53-54页
       ·PR基因的qRT-PCR表达分析第54-56页
   ·讨论第56-58页
第四章 拟南芥WRKY家族对核盘菌的抗性调控功能分析第58-77页
 前言第58页
   ·材料与方法第58-63页
     ·植物材料、菌株及实验试剂第58-59页
     ·拟南芥植株种植第59页
     ·拟南芥WRKY基因对接种核盘菌的表达响应第59-60页
     ·拟南芥wrky突变体植株表型观察及分子鉴定第60-61页
     ·拟南芥wrky突变体对核盘菌的抗病性分析第61-62页
     ·核盘菌接种处理后Atwrky突变体植株中活性氧的检测第62页
     ·核盘菌接种处理Atwrky突变体植株体内防卫基因的表达分析第62页
     ·拟南芥wrky突变体对Pst DC3000的抗病性分析第62-63页
   ·结果与分析第63-65页
     ·拟南芥WRKY基因对接种核盘菌的表达响应第63页
     ·拟南芥wrky突变体植株表型观察及分子鉴定第63页
     ·拟南芥wrky突变体对核盘菌的抗病性分析第63-64页
     ·核盘菌接种处理后Atwrky突变体植株中活性氧的检测第64页
     ·核盘菌接种处理后Atwrky突变体体内防卫基因的表达分析第64-65页
     ·拟南芥wrky突变体对Pst DC3000的抗病性分析第65页
   ·讨论第65-77页
第五章 全文小结第77-79页
参考文献第79-88页
实验相关溶液配方第88-90页

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