致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
目录 | 第12-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-26页 |
1 昆虫的先天免疫系统 | 第17-18页 |
2 酚氧化酶原激活酶的结构和特性 | 第18-20页 |
3 酚氧化酶原激活酶的激活及其功能 | 第20-21页 |
4 酚氧化酶原激活酶激活酚氧化酶原的途径 | 第21-22页 |
5 酚氧化酶原激活酶的失活及降解 | 第22-23页 |
6 寄生蜂寄生因子对酚氧化酶原激活系统的调控 | 第23-24页 |
7 小结和展望 | 第24-26页 |
第二章 基本材料与方法 | 第26-34页 |
1 养虫设备 | 第26-27页 |
·全自动人工气候室 | 第26页 |
·养虫笼 | 第26页 |
·产卵笼 | 第26页 |
·保蜂及寄生盒 | 第26-27页 |
2 供试蔬菜 | 第27页 |
3 供试昆虫及人工饲养 | 第27-28页 |
·虫源 | 第27页 |
·小菜蛾的饲养 | 第27页 |
·寄生蜂的饲养 | 第27-28页 |
4 实验仪器及软件系统 | 第28-29页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·软件系统 | 第28-29页 |
5 常规实验方法 | 第29-32页 |
·RNA提取 | 第29页 |
·cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
·RCR反应 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
·DNA凝胶回收 | 第30-31页 |
·连接反应 | 第31页 |
·质粒或连接产物的转化 | 第31页 |
·质粒DNA的小量制备 | 第31-32页 |
6 常用实验试剂及配制 | 第32-33页 |
7 寄生蜂雌蜂的解剖及萼液粗提液的制备 | 第33-34页 |
第三章 小菜蛾酚氧化酶原激活酶基因的克隆 | 第34-48页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·供试昆虫 | 第34页 |
·灭活大肠杆菌的制备 | 第34-35页 |
·显微注射 | 第35页 |
·血细胞的提取 | 第35页 |
·RNA抽提 | 第35页 |
·全长cDNA序列克隆 | 第35-36页 |
·序列拼接与分析 | 第36-37页 |
·基因组DNA的提取及检测 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-40页 |
·Px-PAP1全长cDNA及DNA序列分析 | 第38-39页 |
·Px-PAP3b全长cDNA及DNA序列分析 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-48页 |
第四章 大肠杆菌诱导后小菜蛾酚氧化酶原激活酶基因的转录规律研究 | 第48-54页 |
1 材料与方法 | 第48-50页 |
·供试昆虫 | 第48页 |
·显微注射 | 第48页 |
·血细胞的提取 | 第48-49页 |
·实时荧光定量rt-qPCR检测 | 第49-50页 |
2 结果与分析 | 第50-51页 |
·引物的特异性和扩增效率 | 第50页 |
·大肠杆菌诱导后的PAP转录规律 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
第五章 CvBV对小菜蛾酚氧化酶原激活酶基因的转录调控 | 第54-58页 |
1 材料与方法 | 第54-55页 |
·供试昆虫 | 第54页 |
·显微注射 | 第54页 |
·血细胞的提取 | 第54-55页 |
·实时荧光定量rt-qPCR检测 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55页 |
·CvBV对PAP基因转录的影响 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
第六章 小菜蛾酚氧化酶原激活酶基因RNA干扰初探 | 第58-66页 |
1 材料与方法 | 第58-61页 |
·供试昆虫 | 第58页 |
·Double strand RNA的合成 | 第58-60页 |
·dsRNA显微注射 | 第60页 |
·实时荧光定量rt-qPCR检测 | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-65页 |
·dsPAP1对小菜蛾PAP基因干扰效果的检测 | 第61-62页 |
·dsPAP3a对小菜蛾PAP基因干扰效果的检测 | 第62页 |
·dsPAP3b对小菜蛾PAP基因干扰效果的检测 | 第62-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
第七章 总结与讨论 | 第66-69页 |
1 结论与讨论 | 第66-68页 |
2 本文创新之处 | 第68页 |
3 本文不足之处 | 第68页 |
4 今后研究方向 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |