| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-12页 |
| ·西罗血红素生物合成途径 | 第8-9页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶 SUMT 的分布研究 | 第9页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶 SUMT 的酶学性质研究 | 第9页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶 SUMT 的分子遗传 | 第9-10页 |
| ·SUMT 重组细胞光谱学性质研究 | 第10-11页 |
| ·SUMT 的应用 | 第11页 |
| ·SUMT 晶体结构研究 | 第11-12页 |
| 2 引言 | 第12-13页 |
| ·研究进展 | 第12页 |
| ·西罗血红素生物合成途径综述 | 第12页 |
| ·尿卟啉原Ⅲ甲基化酶的基因结构 | 第12页 |
| ·研究意义 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-13页 |
| ·枯草杆菌 cobA 基因和 nasF 基因的克隆与表达载体构建 | 第12页 |
| ·CobA 和 NasF 胞内催化活性的研究 | 第12页 |
| ·CobA 和 NasF 重组表达与纯化 | 第12-13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-21页 |
| ·材料 | 第13-14页 |
| ·菌株来源 | 第13页 |
| ·质粒来源 | 第13页 |
| ·基因来源 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·仪器和设备 | 第14页 |
| ·方法 | 第14-21页 |
| ·CTAB/NaCl 法提取枯草杆菌基因组 DNA | 第14页 |
| ·cobA 基因表达载体的构建 | 第14-15页 |
| ·nasF 基因表达载体的构建 | 第15-16页 |
| ·CobA 和 NasF 的重组细胞荧光观察 | 第16页 |
| ·CobA 和 NasF 重组细胞破碎上清液紫外可见光谱扫描和荧光光谱扫描 | 第16页 |
| ·转化大肠杆菌不同菌株对荧光强度的影响 | 第16-17页 |
| ·不同浓度 IPTG 对重组细胞荧光强度的影响 | 第17页 |
| ·不同浓度甜菜碱对重组细胞荧光强度的影响 | 第17-18页 |
| ·CobA 和 NasF 蛋白的诱导表达 | 第18页 |
| ·不连续 SDS-PAGE 电泳 | 第18-21页 |
| 4 结果与分析 | 第21-33页 |
| ·枯草杆菌基因组 DNA 的提取 | 第21页 |
| ·CobA 和 NasF 的分子克隆及载体构建 | 第21-26页 |
| ·CobA 和 NasF 编码基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第22-23页 |
| ·cobA 和 nasF 基因序列测定和氨基酸序列比对 | 第23-25页 |
| ·原核表达载体构建 | 第25-26页 |
| ·CobA 和 NasF 的重组细胞菌落荧光观察 | 第26页 |
| ·CobA 和 NasF 重组细胞破碎上清液光谱扫描 | 第26-28页 |
| ·紫外可见光谱扫描 | 第26-27页 |
| ·荧光光谱扫描 | 第27-28页 |
| ·荧光强度的分析 | 第28-29页 |
| ·转化不同菌株重组细胞荧光值测定 | 第29页 |
| ·不同 IPTG 诱导浓度重组细胞荧光值的测定 | 第29-30页 |
| ·添加不同浓度甜菜碱重组细胞荧光强度的测定 | 第30-31页 |
| ·蛋白的诱导表达与纯化 | 第31-33页 |
| 5 讨论 | 第33-35页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第33页 |
| ·CobA 和 NasF 的胞内活性分析 | 第33-34页 |
| ·影响重组细胞荧光强度因素的研究 | 第34-35页 |
| 6 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 个人简介 | 第44页 |
