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柞蚕热激蛋白90基因的克隆与表达分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 文献综述第8-12页
   ·热激蛋白90的发现与研究进展第8页
   ·热激蛋白的分类第8-9页
   ·热激蛋白的生物学功能第9-10页
     ·热激蛋白的分子伴侣作用第9-10页
     ·热激蛋白的耐热性与耐寒性第10页
     ·热激蛋白的免疫协同与细胞凋亡第10页
   ·热激蛋白的结构特征第10-11页
   ·热激蛋白的体内外表达第11-12页
2 引言第12-14页
   ·研究的目的及意义第12页
   ·主要研究内容第12-13页
     ·柞蚕热激蛋白90基因序列的测定第12页
     ·柞蚕热激蛋白90转录水平的检测第12-13页
     ·柞蚕热激蛋白90的原核表达第13页
   ·技术路线第13-14页
3 材料与方法第14-24页
   ·实验材料第14页
   ·仪器与试剂第14-17页
     ·主要实验仪器第14页
     ·主要生化试剂第14-15页
     ·常用溶液的配置第15-17页
   ·实验方法第17-24页
     ·柞蚕的饲养第17页
     ·柞蚕组织的处理及收集第17页
     ·柞蚕RNA的提取及质量检测第17-18页
     ·第一链cDNA的合成第18-19页
     ·热激蛋白90基因的克隆及测序第19页
     ·PCR扩增后目的产物的纯化第19-20页
     ·目的片段的连接和转化第20页
     ·基因序列的拼接与分析第20页
     ·全长ORF的扩增第20-21页
     ·原核表达载体的构建第21页
     ·蛋白的诱导表达与检测第21-22页
     ·蛋白纯化第22页
     ·序列同源性分析和进化树的构建第22-23页
     ·柞蚕热激蛋白90的半定量PCR检测第23页
     ·柞蚕热激蛋白90的荧光定量PCR检测第23-24页
4 结果与分析第24-33页
   ·第一链cDNA浓度的测定第24页
   ·柞蚕热激蛋白90基因PCR扩增结果与序列分析第24-27页
   ·柞蚕热激蛋白90的编码氨基酸序列的同源性分析和系统进化树构建第27-28页
   ·柞蚕热激蛋白90基因转录水平的研究第28-29页
   ·柞蚕热激蛋白90在高温胁迫下的相对表达第29-30页
   ·柞蚕热激蛋白90的原核表达第30-32页
     ·柞蚕热激蛋白90全长ORF的扩增第30页
     ·酶切鉴定第30-31页
     ·柞蚕热激蛋白90基因的诱导表达第31-32页
   ·重组蛋白的纯化第32-33页
5 讨论第33-35页
   ·柞蚕热激蛋白90基因全长及序列分析第33页
   ·柞蚕热激蛋白90基因的定量检测第33-34页
   ·柞蚕热激蛋白90的原核表达第34-35页
6 结论第35-36页
参考文献第36-41页
致谢第41-42页
个人简介第42页

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