摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
致谢 | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
·β-CD | 第14-15页 |
·β-CGTase | 第15页 |
·β-CGTase 的研究进展 | 第15-17页 |
·β-CGTase 的性质和来源 | 第15-16页 |
·β-CGTase 的作用机理 | 第16页 |
·产β-CGTase 菌株的筛选及诱变育种 | 第16页 |
·产β-CGTase 菌株的筛选 | 第16页 |
·产β-CGTase 菌株的诱变育种 | 第16页 |
·β-CGTase 基因的克隆与表达 | 第16-17页 |
·β-CGTase 的遗传修饰 | 第17页 |
·β-CGTase 的固定化的研究 | 第17页 |
·本课题的研究意义 | 第17-18页 |
·研究内容与思路 | 第18-19页 |
第二章 高产β-CGTase 菌株的筛选、鉴定、诱变及发酵条件优化 | 第19-32页 |
·引言 | 第19页 |
·实验材料和仪器 | 第19-20页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-24页 |
·菌株的筛选 | 第20-21页 |
·酶活的测定方法 | 第21页 |
·高产 β-CGTase 菌株的鉴定 | 第21页 |
·N~+离子注入诱变 | 第21-22页 |
·发酵条件的优化 | 第22-24页 |
·结果与讨论 | 第24-31页 |
·对土样的筛选结果及菌株的鉴定 | 第24-26页 |
·N~+注入诱变筛选高产β-CGTase 突变菌株诱变剂量的确定 | 第26-27页 |
·诱变、筛选的高产β-CGTase 菌株及遗传稳定性 | 第27页 |
·发酵条件的优化 | 第27-31页 |
·本章总结 | 第31-32页 |
第三章 蜡状芽孢杆菌β-CGTase 的纯化及酶学性质研究 | 第32-41页 |
·引言 | 第32页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验菌株 | 第32页 |
·主要仪器和试剂 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-35页 |
·酶的分离纯化 | 第33-34页 |
·酶学性质的研究 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-40页 |
·β-CGTase 的分离纯化 | 第35-37页 |
·β-CGTase 的酶学性质的研究 | 第37-40页 |
·本章总结 | 第40-41页 |
第四章 β-CGTase 的基因克隆、温控型质粒构建、表达及重组酶的性质研究 | 第41-59页 |
·引言 | 第41页 |
·材料和方法 | 第41-47页 |
·实验材料 | 第41-43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
·结果和讨论 | 第47-57页 |
·蜡状芽孢杆β-CGTase 的克隆 | 第47-48页 |
·工程菌 E·coli-DH5α-pBV220-β-CGTase 的构建 | 第48页 |
·工程菌表达及表达条件条件优化 | 第48-53页 |
·酶的分离纯化 | 第53页 |
·E.coli-DH5α-pBV220-β-CGTase 酶学性质的研究 | 第53-57页 |
·本章总结 | 第57-59页 |
第五章 β-CGTase 的 IPTG 诱导型表达载体的构建及其表达 | 第59-66页 |
·引言 | 第59页 |
·材料和方法 | 第59-62页 |
·实验材料和试剂 | 第59-60页 |
·实验方法 | 第60-62页 |
·结果与讨论 | 第62-65页 |
·重组质粒 pET28-β-CGTase 的构建 | 第62-65页 |
·本章小结 | 第65-66页 |
第六章 β-CGTase 基因的 IPTG 诱导型表达载体的构建及其在枯草芽孢杆菌体内的表达 | 第66-73页 |
·引言 | 第66页 |
·材料和方法 | 第66-70页 |
·实验材料和设备 | 第66-68页 |
·实验方法 | 第68-70页 |
·实验结果 | 第70-72页 |
·pAX01-β-CGTase 工程菌构建的质粒图谱示意图 | 第70页 |
·β-CGTase 基因扩增的结果 | 第70-71页 |
·目的基因的回收 | 第71页 |
·蓝白斑筛选结果 | 第71-72页 |
·双酶切验证克隆结果 | 第72页 |
·工程菌的预表达 | 第72页 |
·本章小结 | 第72-73页 |
第七章 结论与展望 | 第73-75页 |
·结论 | 第73-74页 |
·展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79-80页 |