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蜡状芽孢杆菌β-CGTase发酵、基因克隆表达及其酶学性质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
致谢第8-14页
第一章 绪论第14-19页
   ·β-CD第14-15页
   ·β-CGTase第15页
   ·β-CGTase 的研究进展第15-17页
     ·β-CGTase 的性质和来源第15-16页
     ·β-CGTase 的作用机理第16页
     ·产β-CGTase 菌株的筛选及诱变育种第16页
       ·产β-CGTase 菌株的筛选第16页
       ·产β-CGTase 菌株的诱变育种第16页
     ·β-CGTase 基因的克隆与表达第16-17页
     ·β-CGTase 的遗传修饰第17页
     ·β-CGTase 的固定化的研究第17页
   ·本课题的研究意义第17-18页
   ·研究内容与思路第18-19页
第二章 高产β-CGTase 菌株的筛选、鉴定、诱变及发酵条件优化第19-32页
   ·引言第19页
   ·实验材料和仪器第19-20页
     ·实验材料第19-20页
   ·实验方法第20-24页
     ·菌株的筛选第20-21页
     ·酶活的测定方法第21页
     ·高产 β-CGTase 菌株的鉴定第21页
     ·N~+离子注入诱变第21-22页
     ·发酵条件的优化第22-24页
   ·结果与讨论第24-31页
     ·对土样的筛选结果及菌株的鉴定第24-26页
     ·N~+注入诱变筛选高产β-CGTase 突变菌株诱变剂量的确定第26-27页
     ·诱变、筛选的高产β-CGTase 菌株及遗传稳定性第27页
     ·发酵条件的优化第27-31页
     ·本章总结第31-32页
第三章 蜡状芽孢杆菌β-CGTase 的纯化及酶学性质研究第32-41页
   ·引言第32页
   ·实验材料第32-33页
     ·实验菌株第32页
     ·主要仪器和试剂第32-33页
   ·实验方法第33-35页
     ·酶的分离纯化第33-34页
     ·酶学性质的研究第34-35页
   ·结果与讨论第35-40页
     ·β-CGTase 的分离纯化第35-37页
     ·β-CGTase 的酶学性质的研究第37-40页
     ·本章总结第40-41页
第四章 β-CGTase 的基因克隆、温控型质粒构建、表达及重组酶的性质研究第41-59页
   ·引言第41页
   ·材料和方法第41-47页
     ·实验材料第41-43页
     ·实验方法第43-47页
   ·结果和讨论第47-57页
     ·蜡状芽孢杆β-CGTase 的克隆第47-48页
     ·工程菌 E·coli-DH5α-pBV220-β-CGTase 的构建第48页
     ·工程菌表达及表达条件条件优化第48-53页
     ·酶的分离纯化第53页
     ·E.coli-DH5α-pBV220-β-CGTase 酶学性质的研究第53-57页
   ·本章总结第57-59页
第五章 β-CGTase 的 IPTG 诱导型表达载体的构建及其表达第59-66页
   ·引言第59页
   ·材料和方法第59-62页
     ·实验材料和试剂第59-60页
     ·实验方法第60-62页
   ·结果与讨论第62-65页
     ·重组质粒 pET28-β-CGTase 的构建第62-65页
   ·本章小结第65-66页
第六章 β-CGTase 基因的 IPTG 诱导型表达载体的构建及其在枯草芽孢杆菌体内的表达第66-73页
   ·引言第66页
   ·材料和方法第66-70页
     ·实验材料和设备第66-68页
     ·实验方法第68-70页
   ·实验结果第70-72页
     ·pAX01-β-CGTase 工程菌构建的质粒图谱示意图第70页
     ·β-CGTase 基因扩增的结果第70-71页
     ·目的基因的回收第71页
     ·蓝白斑筛选结果第71-72页
     ·双酶切验证克隆结果第72页
     ·工程菌的预表达第72页
   ·本章小结第72-73页
第七章 结论与展望第73-75页
   ·结论第73-74页
   ·展望第74-75页
参考文献第75-79页
攻读硕士学位期间发表的论文第79-80页

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