| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩写词（Abbreviation） | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·病原及其分子多样性研究 | 第12-14页 |
| ·病原及其分子生物学 | 第12-13页 |
| ·病原分子多样性研究 | 第13-14页 |
| ·症状 | 第14-15页 |
| ·茎痘病 | 第14页 |
| ·栓皮病 | 第14-15页 |
| ·Kober 茎沟病 | 第15页 |
| ·传播途径 | 第15页 |
| ·检测 | 第15-21页 |
| ·生物学鉴定 | 第15-16页 |
| ·电镜观察 | 第16-17页 |
| ·免疫学检测 | 第17-18页 |
| ·以病毒核酸为基础的分子生物学检测法 | 第18-21页 |
| ·葡萄脱毒技术研究 | 第21-25页 |
| ·组织培养脱毒 | 第21-23页 |
| ·葡萄病毒抗性基因转导 | 第23-25页 |
| ·研究展望 | 第25-27页 |
| 第二章 材料和方法 | 第27-35页 |
| ·供试材料与主要试剂 | 第27页 |
| ·供试材料 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-35页 |
| ·总RNA 的提取方法 | 第27-28页 |
| ·总RNA 的检测 | 第28页 |
| ·两步RT-PCR 体系的建立 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的电泳分析 | 第29页 |
| ·目的片断地回收与纯化 | 第29页 |
| ·目的片断与载体的连接 | 第29-30页 |
| ·氯化钙转化法 | 第30-31页 |
| ·质粒的小量提取 | 第31页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第31-32页 |
| ·目的片段的测序分析 | 第32页 |
| ·GVB 一步RT-PCR 及巢式PCR 检测体系的建立 | 第32-33页 |
| ·一步RT-PCR 试剂盒的组装 | 第33页 |
| ·利用所组装的一步RT-PCR 检测试剂盒检测样品 | 第33页 |
| ·斑点杂交优化体系的建立 | 第33-34页 |
| ·斑点杂交检测试剂盒的组装 | 第34页 |
| ·利用所组装的斑点杂交检测试剂盒检测样品 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-47页 |
| ·总RNA 检测 | 第35页 |
| ·两步RT-PCR 检测体系的建立 | 第35-37页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第37-39页 |
| ·GVB 特异性扩增片段的序列分析 | 第39-40页 |
| ·GVB 一步RT-PCR 及巢式PCR 检测体系的建立 | 第40-41页 |
| ·非放射性cDNA 探针的鉴定 | 第41-42页 |
| ·一步RT-PCR 检测试剂盒的组装 | 第42-44页 |
| ·利用所组装的一步RT-PCR 检测试剂盒检测葡萄样本 | 第44页 |
| ·斑点杂交检测试剂盒的组装 | 第44-46页 |
| ·利用所组装的斑点杂交检测试剂盒检测样品 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-53页 |
| ·总RNA 的提取 | 第47-48页 |
| ·反转录反应 | 第48页 |
| ·PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·PCR 扩增产物的克隆 | 第49-51页 |
| ·斑点杂交 | 第51页 |
| ·GVB 一步RT-PCR 以及斑点杂交检测试剂盒 | 第51-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| ·成功提取了葡萄组织的总RNA | 第53页 |
| ·于国内首次扩增出GVB 的特异序列 | 第53页 |
| ·建立优化的适合GVB 的一步RT-PCR 及斑点杂交优化检测体系 | 第53页 |
| ·首次组装了GVB 的分子检测试剂盒 | 第53-54页 |
| 第六章 本实验的创新点 | 第54-55页 |
| ·采用优化的反转录方法 | 第54页 |
| ·国内首次对GVB 进行检测技术研究 | 第54页 |
| ·组装成功GVB 检测试剂盒 | 第54-55页 |
| 第七章 进一步研究的展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录一 本实验用溶液、缓冲液成份及配制 | 第60-63页 |
| 附录二：测序图谱 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 导师评阅表 | 第70页 |
