| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1.文献综述 | 第12-55页 |
| ·S-层的形态、与细胞的结合以及S-层的形成和装配 | 第12-24页 |
| ·S-层的形态 | 第12-16页 |
| ·S-层与细胞表面的结合 | 第16-19页 |
| ·S-层的形成和装配 | 第19-24页 |
| ·S-层蛋白的分子生物学特征 | 第24-32页 |
| ·S-层蛋白的组成和修饰 | 第24-26页 |
| ·S-层蛋白的结构和功能上的关系 | 第26-32页 |
| ·S-层蛋白的编码基因,表达和调控 | 第32-38页 |
| ·S-层蛋白的编码基因 | 第32-34页 |
| ·S-层蛋白的表达和调控 | 第34-38页 |
| ·S-层蛋白的功能和应用 | 第38-49页 |
| ·S-层蛋白的功能 | 第38-43页 |
| ·S-层蛋白的应用 | 第43-49页 |
| ·S-层在纳米生物技术方面的应用 | 第43-45页 |
| ·免疫学上的应用 | 第45-46页 |
| ·材料生物学应用 | 第46-47页 |
| ·脂膜结构与S-层的结合 | 第47-48页 |
| ·应用于生物学传感器 | 第48-49页 |
| ·本文研究背景及意义 | 第49-55页 |
| ·CTC菌株S-层蛋白的研究 | 第49-52页 |
| ·含有S-层的苏云金芽胞杆菌菌株CTC | 第49-50页 |
| ·CTC菌株形成的伴胞内涵体 | 第50-51页 |
| ·苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S-层蛋白与表面层以及伴胞内涵体的关系 | 第51页 |
| ·苏云金芽胞杆菌中伴胞内涵体组成为S-层蛋白的普查 | 第51-52页 |
| ·BMB1152菌株研究背景 | 第52-54页 |
| ·YBT-020的质粒消除菌株 | 第52-53页 |
| ·YBT-020与突变株BMB1151,BMB1152的生长情况比较 | 第53-54页 |
| ·本文研究目的和意义 | 第54-55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-66页 |
| ·菌株和质粒 | 第55页 |
| ·实验试剂及配方 | 第55-60页 |
| ·培养基及其成分 | 第55页 |
| ·质粒抽提试剂 | 第55-57页 |
| ·质粒快检试剂 | 第57页 |
| ·SDS-PAGE试剂 | 第57页 |
| ·Western blot试剂 | 第57-58页 |
| ·抗生素 | 第58页 |
| ·分子生物学试剂 | 第58-59页 |
| ·免疫试剂 | 第59页 |
| ·实验仪器及相应型号 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-66页 |
| ·碱裂解法抽提大肠杆菌质粒DNA | 第60页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第60页 |
| ·苏云金芽胞杆菌总DNA抽提 | 第60-61页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法)及转化 | 第61页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的电转化 | 第61-62页 |
| ·PCR | 第62-63页 |
| ·TA克隆 | 第63页 |
| ·IPTG诱导大肠杆菌中重组基因的表达 | 第63页 |
| ·蛋白质N-末端测序 | 第63页 |
| ·SDS-PAGE胶蛋白的纯化和抗原制备 | 第63-64页 |
| ·抗体的制备 | 第64页 |
| ·Western Blot | 第64-65页 |
| ·免疫荧光反应 | 第65页 |
| ·扫描电镜,透射电镜,荧光显微镜,和激光共聚焦显微镜检测 | 第65页 |
| ·遗传进化树分析以及蛋白质结构预测 | 第65-66页 |
| 3 实验结果 | 第66-98页 |
| ·PICS菌株的两类S-层蛋白共存于S-层和伴胞内涵体 | 第66-91页 |
| ·内涵体组成为S-层蛋白(PICS)菌株的筛选 | 第66-68页 |
| ·显微镜检筛选芽胞成熟期形成圆形伴胞内涵体的菌株 | 第66-67页 |
| ·SDS-PAGE和Western blot实验证实伴胞内涵体组成为S-层蛋白 | 第67-68页 |
| ·其它菌株的筛选 | 第68页 |
| ·PICS菌株的S-层蛋白基因的克隆 | 第68-74页 |
| ·SLH保守区域序列的获得 | 第68-69页 |
| ·连接接头的嵌套PCR方法获得SLH上下游序列 | 第69-71页 |
| ·slp基因全长序列的获得 | 第71-73页 |
| ·8个slp基因的获得 | 第73-74页 |
| ·基因翻译成氨基酸序列与N-末端序列一致性高的是SLP2蛋白 | 第74页 |
| ·S-层蛋白的遗传进化分析以及分子结构预测 | 第74-82页 |
| ·Bc群的S-层蛋白基因遗传进化分析将S-层蛋白分成两类 | 第74-75页 |
| ·S-层蛋白一级和二级结构的生物信息学分析 | 第75-82页 |
| ·PICS菌株的S-层蛋白遗传进化树分析 | 第82页 |
| ·PICS菌株整个生长时期均有S-层蛋白表达 | 第82-84页 |
| ·两类S-层蛋白都表达形成S-层 | 第84-86页 |
| ·Western blot检测营养期CTC和BMB1152的S-层蛋白表达情况 | 第84页 |
| ·免疫荧光显微镜检测CTC菌株的S-层蛋白在细胞表面的表达情况 | 第84-85页 |
| ·CTC菌株营养期S-层蛋白的SDS-PAGE和斑点杂交检测 | 第85页 |
| ·免疫荧光共聚焦显微镜检测CTC和BMB1152的表面S-层组成 | 第85-86页 |
| ·两类S-层蛋白都表达形成伴胞内涵体 | 第86页 |
| ·两类S-层蛋白异源表达都能形成伴胞内涵体 | 第86-90页 |
| ·CTC菌株S-层蛋白基因的突变 | 第90-91页 |
| ·YBT-020形成两种类型的伴胞内涵体 | 第91-98页 |
| ·YBT-020和BMB1152的伴胞内涵体的形态 | 第91-92页 |
| ·S-层蛋白超量表达及抗体的制备 | 第92-93页 |
| ·YBT-020和BMB1152在芽胞期S-层蛋白的表达 | 第93-94页 |
| ·YBT-020和BMB1152的表面S-层 | 第94页 |
| ·菌株YBT-020的S-层蛋白在营养期的表达 | 第94-96页 |
| ·两个slp基因的启动子分析 | 第96页 |
| ·S-层蛋白的表达和质粒pBMB26相关 | 第96-98页 |
| 4 小结 | 第98-99页 |
| 5 讨论 | 第99-103页 |
| 参考文献 | 第103-124页 |
| 附录 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
