| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-36页 |
| ·木聚糖的组成和结构 | 第18-19页 |
| ·木聚糖的降解 | 第19-21页 |
| ·木聚糖降解相关酶 | 第19-20页 |
| ·β-1,4-内切木聚糖酶 | 第20页 |
| ·β-木糖苷酶 | 第20-21页 |
| ·其它相关的侧链水解酶 | 第21页 |
| ·木聚糖酶研究进展 | 第21-28页 |
| ·木聚糖酶的来源 | 第22页 |
| ·木聚糖酶的性质 | 第22页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第22-25页 |
| ·木聚糖酶的催化机制 | 第25-26页 |
| ·木聚糖酶的分子结构区域 | 第26-28页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第28-30页 |
| ·在饲料工业上的应用 | 第28页 |
| ·在造纸工业上的应用 | 第28-29页 |
| ·在食品行业上的应用 | 第29页 |
| ·在能源其它行业上的应用 | 第29-30页 |
| ·木聚糖酶的分子克隆及基因工程 | 第30-32页 |
| ·木聚糖酶的分子克隆 | 第30-31页 |
| ·木聚糖酶的基因工程 | 第31-32页 |
| ·未培养微生物的开发与利用 | 第32-35页 |
| ·微生物的多样性 | 第32页 |
| ·宏基因组学法获得新基因 | 第32-35页 |
| 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 土壤环境中木聚糖酶基因的多样性研究 | 第36-108页 |
| 第一节土壤环境中第十家族(GH10)木聚糖酶基因的多样性研究 | 第36-82页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·取样 | 第36页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第36页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第36-37页 |
| ·常用溶液 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-45页 |
| ·土壤微生物宏基因组DNA 的提取和纯化 | 第37-38页 |
| ·第十家族(GH10)木聚糖酶的简并引物的设计 | 第38-39页 |
| ·GH10 木聚糖酶的简并引物的验证 | 第39-42页 |
| ·GH10 木聚糖酶基因片段的扩增及文库的构建 | 第42-44页 |
| ·GH10 木聚糖酶基因片段的测序及进化分析 | 第44页 |
| ·不同土壤环境中GH 10 木聚糖酶的丰度分析 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-78页 |
| ·六个土壤的化学性质的测定 | 第45页 |
| ·土壤微生物宏基因组的提取和纯化 | 第45-46页 |
| ·GH10 木聚糖酶简并引物的设计与验证 | 第46-48页 |
| ·GH10 木聚糖酶基因片段文库的构建 | 第48-49页 |
| ·六个土壤环境中GH10 木聚糖酶基因多样性的分析 | 第49-77页 |
| ·各土壤环境中GH 10 木聚糖酶基因片段的丰度及多样性分析 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-82页 |
| 第二节 土壤环境中第十一家族(GH11)木聚糖酶基因的多样性研究 | 第82-107页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·土壤微生物的宏基因组DNA | 第82页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第82页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第82页 |
| ·常用溶液 | 第82页 |
| ·培养基 | 第82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-87页 |
| ·第十一家族(GH11)木聚糖酶的简并引物的设计 | 第82-83页 |
| ·GH11 木聚糖酶的简并引物的验证 | 第83-85页 |
| ·土壤中GH11 木聚糖酶基因片段的扩增及文库的构建 | 第85-87页 |
| ·GH11 木聚糖酶基因片段的测序及进化分析 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-104页 |
| ·GH11 木聚糖酶简并引物的设计与验证 | 第87-89页 |
| ·GH11 木聚糖酶基因片段文库的构建 | 第89-90页 |
| ·五个土壤环境中GH11 木聚糖酶基因多样性的分析 | 第90-104页 |
| ·讨论 | 第104-107页 |
| 本章小结 | 第107-108页 |
| 第三章 瘤胃环境中木聚糖酶基因的多样性研究 | 第108-138页 |
| ·实验材料 | 第108-109页 |
| ·取样 | 第108页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第108页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第108页 |
| ·常用溶液 | 第108页 |
| ·培养基 | 第108页 |
| ·主要仪器 | 第108-109页 |
| ·实验方法 | 第109-114页 |
| ·瘤胃微生物宏基因组DNA 的提取和纯化 | 第109页 |
| ·木聚糖酶基因片段的扩增及文库的构建 | 第109-113页 |
| ·瘤胃木聚糖酶基因片段的测序及进化分析 | 第113页 |
| ·两个瘤胃环境中木聚糖酶的丰度分析 | 第113-114页 |
| ·结果与分析 | 第114-134页 |
| ·瘤胃微生物宏基因组的提取和纯化 | 第114页 |
| ·木聚糖酶基因片段文库的构建 | 第114-116页 |
| ·瘤胃木聚糖酶基因多样性的分析 | 第116-134页 |
| ·讨论 | 第134-137页 |
| 本章小结 | 第137-138页 |
| 第四章 直接从瘤胃内含物的宏基因组中克隆木聚糖酶基因 | 第138-166页 |
| ·实验材料 | 第138页 |
| ·宏基因组DNA | 第138页 |
| ·菌株，载体，工具酶，试剂 | 第138页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第138页 |
| ·常用溶液 | 第138页 |
| ·培养基 | 第138页 |
| ·主要仪器 | 第138页 |
| ·实验方法 | 第138-142页 |
| ·目标基因序列的选择 | 第138-139页 |
| ·木聚糖酶全长序列的扩增 | 第139-142页 |
| ·结果与分析 | 第142-162页 |
| ·目标基因序列的选择 | 第142-144页 |
| ·木聚糖酶基因全长的克隆 | 第144-147页 |
| ·木聚糖酶基因全长序列的分析 | 第147-162页 |
| ·讨论 | 第162-164页 |
| 本章小结 | 第164-166页 |
| 第五章 瘤胃宏基因组来源的4 个新的木聚糖酶基因的表达及性质研究 | 第166-209页 |
| 第一节 瘤胃来源的双结构域的第十家族低温木聚糖酶基因xynGR40 的表达及性质分析 | 第166-182页 |
| ·实验材料 | 第166-167页 |
| ·菌株和质粒 | 第166页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第166页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第166页 |
| ·主要仪器 | 第166-167页 |
| ·培养基 | 第167页 |
| ·常用溶液 | 第167页 |
| ·实验方法 | 第167-175页 |
| ·原核表达载体 pET-22b(+)-xynGR40 的构建 | 第167-171页 |
| ·重组酶XynGR40 的纯化 | 第171-173页 |
| ·重组酶XynGR40 的酶活测定 | 第173-174页 |
| ·重组酶XynGR40 的性质测定 | 第174-175页 |
| ·结果与分析 | 第175-180页 |
| ·重组酶XynGR40 在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第175-176页 |
| ·重组酶XynGR40 的酶学性质研究 | 第176-180页 |
| ·讨论 | 第180-182页 |
| 第二节 瘤胃来源的单结构域的第十家族木聚糖酶基因xynGR67 的表达及性质分析 | 第182-193页 |
| ·实验材料 | 第182页 |
| ·菌株和质粒 | 第182页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第182页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第182页 |
| ·主要仪器 | 第182页 |
| ·培养基 | 第182页 |
| ·常用溶液 | 第182页 |
| ·实验方法 | 第182-187页 |
| ·原核表达载体 pET-22b(+)-xynGR67 的构建 | 第182-184页 |
| ·重组酶XynGR67 的纯化 | 第184-185页 |
| ·重组酶XynGR67 的酶活测定 | 第185-186页 |
| ·重组酶XynGR67 的性质测定 | 第186-187页 |
| ·结果与分析 | 第187-191页 |
| ·重组酶XynGR67 在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第187-188页 |
| ·重组酶XynGR67 的酶学性质研究 | 第188-191页 |
| ·讨论 | 第191-193页 |
| 第三节 瘤胃来源的两个第十一家族木聚糖酶基因xynR8 和xynR127 的表达及性质分析 | 第193-208页 |
| ·实验材料 | 第193-194页 |
| ·菌株和质粒 | 第193页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第193页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第193页 |
| ·主要仪器 | 第193页 |
| ·培养基 | 第193页 |
| ·常用溶液 | 第193-194页 |
| ·实验方法 | 第194-198页 |
| ·原核表达载体 pET-22b(+)-xynR8 和 pET-22b(+)-xynR127 的构建 | 第194-196页 |
| ·重组酶XynR8 和XynR127 的纯化 | 第196-197页 |
| ·重组酶XynR8 和XynR127 的性质测定 | 第197-198页 |
| ·结果与分析 | 第198-206页 |
| ·重组酶XynR8 在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第198-199页 |
| ·重组酶XynR127 在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第199-201页 |
| ·重组酶XynR8 的酶学性质研究 | 第201-203页 |
| ·重组酶XynR127 的酶学性质研究 | 第203-206页 |
| ·讨论 | 第206-208页 |
| 本章小结 | 第208-209页 |
| 第六章 全文结论 | 第209-211页 |
| 参考文献 | 第211-223页 |
| 致谢 | 第223-224页 |
| 作者简历 | 第224-225页 |
