| 英文缩略语表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 第一部分 炭疽毒素保护性抗原的表达纯化及生物活性分析 | 第12-30页 |
| 1 材料与设备 | 第12-16页 |
| ·菌株与细胞株 | 第12页 |
| ·载体 | 第12页 |
| ·引物 | 第12-13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要溶液及试剂配制 | 第14-16页 |
| 2 方法 | 第16-23页 |
| ·重组质粒的构建 | 第16-19页 |
| ·表达质粒pET32a-PA 的构建 | 第19-21页 |
| ·PA 在 E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第21页 |
| ·PA 融合蛋白的 Western印迹分析 | 第21页 |
| ·目的蛋白纯化复性 | 第21-22页 |
| ·利用 Furin 酶体外降解 Trx-PA 融合蛋白实验 | 第22页 |
| ·Trx-PA 融合蛋白的细胞结合和作用实验 | 第22页 |
| ·应用 CCK-8 法进行细胞毒性分析 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-28页 |
| ·重组表达载体pET-32a(+)-PA的构建 | 第23页 |
| ·重组蛋白Trx-PA的表达 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白Trx-PA的Western印迹分析 | 第24页 |
| ·重组蛋白Trx-PA的纯化 | 第24-25页 |
| ·Trx-PA能在体外被特异性Furin酶降解 | 第25-27页 |
| ·Trx-PA与LF共同作用能产生细胞毒性 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第二部分 应用炭疽毒素靶向多种肿瘤细胞的药物导向系统的可行性研究 | 第30-46页 |
| 1 材料 | 第30-33页 |
| ·菌株与细胞株 | 第30页 |
| ·载体 | 第30页 |
| ·引物 | 第30-32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要溶液及试剂配制 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-37页 |
| ·重组质粒的构建 | 第33-35页 |
| ·改构 PA 在 E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第35页 |
| ·改构 PA 蛋白的 Western 印迹分析 | 第35页 |
| ·利用基质金属蛋白酶体外降解改构 PA 蛋白实验 | 第35页 |
| ·细胞毒性实验 | 第35-36页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第36页 |
| ·细胞免疫化学 | 第36-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-46页 |
| ·重组工程菌诱导表达结果 | 第37-38页 |
| ·基质金属蛋白酶作用改构 PA 结果 | 第38-40页 |
| ·细胞毒性实验结果 | 第40-42页 |
| ·免疫组化及免疫荧光结果 | 第42-45页 |
| ·电镜观察结果 | 第45-46页 |
| 总结 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 肿瘤靶向治疗 | 第47页 |
| 靶向位点的选择 | 第47-48页 |
| 炭疽毒素的应用潜力 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 硕士期间发表文章 | 第52-61页 |
| 个人简历 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
