缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1.文献综述 | 第12-29页 |
·生物应答和适应逆境的一般机制 | 第12-15页 |
·原核生物和真核生物的转录因子研究概况 | 第15-21页 |
·转录因子概念 | 第15页 |
·转录因子的调控机理 | 第15页 |
·转录因子作用形式的复杂性 | 第15-16页 |
·转录因子的分类 | 第16-17页 |
·真核生物中与逆境相关的转录因子的研究情况 | 第17-20页 |
·bZIP(basic-region leucine-zipper)蛋白 | 第18页 |
·WRKY类转录因子 | 第18-19页 |
·AP2/EREBP(APETAIdk2/Ethylene-Responsive Elemnt Binding Protein)转录因子 | 第19-20页 |
·DREB类转录因子 | 第19页 |
·ERF(Ethylene-Responsive-Element-Binding Factor)类转录因子 | 第19-20页 |
·MYB类转录因子 | 第20页 |
·原核生物中与逆境相关的转录因子的研究情况 | 第20-21页 |
·HTH(helices-tum-helices)类转录因子 | 第20-21页 |
·WH(wingedhelices)类转录因子 | 第21页 |
·bolA研究进展 | 第21-28页 |
·bolA的发现 | 第21-22页 |
·bolA基因 | 第22页 |
·BolA蛋白质结构特征 | 第22-25页 |
·bolA的生物学功能 | 第25-27页 |
·bolA与细胞形态 | 第25-26页 |
·bolA与生物膜 | 第26页 |
·bolA其它功能 | 第26-27页 |
·小结 | 第27-28页 |
·研究的目的和意义 | 第28-29页 |
2.材料与方法 | 第29-36页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·水稻材料 | 第29页 |
·菌株及质粒 | 第29-30页 |
·主要仪器、试剂及溶液配制 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-36页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·水稻内源基因表达量分析的材料准备 | 第32页 |
·水稻组织总RNA抽提,反转录 | 第32页 |
·总RNA含量及纯度鉴定 | 第32页 |
·水稻OsbolA1全长cDNA扩增 | 第32-33页 |
·水稻OsbolA1 mRNA的组织分布和逆境表达谱 | 第33页 |
·水稻OsBolA1蛋白的原核表达 | 第33-34页 |
·原核表达载体的构建与鉴定 | 第33页 |
·重组蛋白的表达 | 第33-34页 |
·水稻OsBolA1的亚细胞定位 | 第34-35页 |
·EFPG融合表达载体的构建与鉴定 | 第34页 |
·农杆菌介导的水稻愈伤组织转化,抗性愈伤的筛选 | 第34-35页 |
·组织切片 | 第35页 |
·大肠杆菌BL21(DE3)-RP中bolA基因的敲除 | 第35-36页 |
·水稻OsBolA1与大肠杆菌BolA功能互补 | 第36页 |
3.结果与分析 | 第36-53页 |
·水稻BolA-like蛋白家族及OsbolA1序列分析 | 第36-42页 |
·水稻OsbolA1全长cDNA的克隆 | 第42-43页 |
·水稻OsboIA1 mRNA的组织分布和逆境表达谱 | 第43-45页 |
·水稻OsBolA1蛋白的亚细胞定位 | 第45-47页 |
·EGFP融合表达载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
·水稻愈伤组织切片的观察 | 第46-47页 |
·重组水稻OsBolA1蛋白原核表达 | 第47-51页 |
·重组蛋白原核表达载体的构建与鉴定 | 第47-48页 |
·重组蛋白的表达 | 第48-51页 |
·水稻OsBolA1蛋白与大肠杆菌BolA蛋白的功能互补 | 第51-53页 |
4.讨论 | 第53-56页 |
·真核和原核BolA蛋白序列的多样性 | 第53页 |
·真核和原核BolA蛋白功能保守性 | 第53-54页 |
·OsbolA1的表达模式与可能的功能 | 第54页 |
·OsBolA1是否是属于转录因子 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
Protocol | 第64-74页 |
Protocol 1: TRIzol Reagent RNA Isolation Method | 第64页 |
Protocol 2: Reverse Transcription PCR | 第64-66页 |
Protocol 3: Agrobacterium-mediated transformation(for japonica only) | 第66-70页 |
Protocol 4: Plant histological protocol(For all tissue samples) | 第70-74页 |
致谢 | 第74页 |