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水稻OsbolA1基因克隆与表达研究

缩略词表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1.文献综述第12-29页
   ·生物应答和适应逆境的一般机制第12-15页
   ·原核生物和真核生物的转录因子研究概况第15-21页
     ·转录因子概念第15页
     ·转录因子的调控机理第15页
     ·转录因子作用形式的复杂性第15-16页
     ·转录因子的分类第16-17页
     ·真核生物中与逆境相关的转录因子的研究情况第17-20页
       ·bZIP(basic-region leucine-zipper)蛋白第18页
       ·WRKY类转录因子第18-19页
       ·AP2/EREBP(APETAIdk2/Ethylene-Responsive Elemnt Binding Protein)转录因子第19-20页
         ·DREB类转录因子第19页
         ·ERF(Ethylene-Responsive-Element-Binding Factor)类转录因子第19-20页
       ·MYB类转录因子第20页
     ·原核生物中与逆境相关的转录因子的研究情况第20-21页
       ·HTH(helices-tum-helices)类转录因子第20-21页
       ·WH(wingedhelices)类转录因子第21页
   ·bolA研究进展第21-28页
     ·bolA的发现第21-22页
     ·bolA基因第22页
     ·BolA蛋白质结构特征第22-25页
     ·bolA的生物学功能第25-27页
       ·bolA与细胞形态第25-26页
       ·bolA与生物膜第26页
       ·bolA其它功能第26-27页
     ·小结第27-28页
   ·研究的目的和意义第28-29页
2.材料与方法第29-36页
   ·实验材料第29-30页
     ·水稻材料第29页
     ·菌株及质粒第29-30页
   ·主要仪器、试剂及溶液配制第30-31页
     ·主要仪器第30页
     ·主要试剂第30-31页
   ·实验方法第31-36页
     ·引物设计第31-32页
     ·水稻内源基因表达量分析的材料准备第32页
     ·水稻组织总RNA抽提,反转录第32页
     ·总RNA含量及纯度鉴定第32页
     ·水稻OsbolA1全长cDNA扩增第32-33页
     ·水稻OsbolA1 mRNA的组织分布和逆境表达谱第33页
     ·水稻OsBolA1蛋白的原核表达第33-34页
       ·原核表达载体的构建与鉴定第33页
       ·重组蛋白的表达第33-34页
     ·水稻OsBolA1的亚细胞定位第34-35页
       ·EFPG融合表达载体的构建与鉴定第34页
       ·农杆菌介导的水稻愈伤组织转化,抗性愈伤的筛选第34-35页
       ·组织切片第35页
     ·大肠杆菌BL21(DE3)-RP中bolA基因的敲除第35-36页
     ·水稻OsBolA1与大肠杆菌BolA功能互补第36页
3.结果与分析第36-53页
   ·水稻BolA-like蛋白家族及OsbolA1序列分析第36-42页
   ·水稻OsbolA1全长cDNA的克隆第42-43页
   ·水稻OsboIA1 mRNA的组织分布和逆境表达谱第43-45页
   ·水稻OsBolA1蛋白的亚细胞定位第45-47页
     ·EGFP融合表达载体的构建与鉴定第45-46页
     ·水稻愈伤组织切片的观察第46-47页
   ·重组水稻OsBolA1蛋白原核表达第47-51页
     ·重组蛋白原核表达载体的构建与鉴定第47-48页
     ·重组蛋白的表达第48-51页
   ·水稻OsBolA1蛋白与大肠杆菌BolA蛋白的功能互补第51-53页
4.讨论第53-56页
   ·真核和原核BolA蛋白序列的多样性第53页
   ·真核和原核BolA蛋白功能保守性第53-54页
   ·OsbolA1的表达模式与可能的功能第54页
   ·OsBolA1是否是属于转录因子第54-56页
参考文献第56-64页
Protocol第64-74页
 Protocol 1: TRIzol Reagent RNA Isolation Method第64页
 Protocol 2: Reverse Transcription PCR第64-66页
 Protocol 3: Agrobacterium-mediated transformation(for japonica only)第66-70页
 Protocol 4: Plant histological protocol(For all tissue samples)第70-74页
致谢第74页

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