| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-42页 |
| 第一章 人增殖诱导抗体(hAPRIL)的研究进展 | 第13-26页 |
| 1 APRIL的发现 | 第13-16页 |
| ·APRIL的基因以及蛋白结构 | 第13-15页 |
| ·APRIL的结构形式 | 第15页 |
| ·APRIL的受体 | 第15-16页 |
| 2 APRIL的生物学功能 | 第16-19页 |
| ·APRIL及其受体的表达 | 第16-17页 |
| ·APRIL在体外对B细胞的作用 | 第17页 |
| ·APIRL在体外对其他细胞的作用 | 第17-18页 |
| ·APRIL的体内活性 | 第18-19页 |
| 3.APRIL在自身免疫性疾病和癌瘤中的作用 | 第19-21页 |
| ·APRIL与自身免疫 | 第19-20页 |
| ·APRIL与恶性肿瘤 | 第20-21页 |
| 4 治疗途径 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-26页 |
| 第二章 抗体的研究进展 | 第26-34页 |
| 1 抗体的发展历程 | 第26-27页 |
| 2 抗体的结构与生物学活性 | 第27-28页 |
| ·抗体的结构 | 第27-28页 |
| ·抗体的生物学活性 | 第28页 |
| 3 抗体的分类 | 第28-30页 |
| ·多克隆抗体 | 第28-29页 |
| ·单克隆抗体 | 第29页 |
| ·基因工程抗体 | 第29-30页 |
| 4 抗体的应用 | 第30-31页 |
| ·用于基础研究 | 第30页 |
| ·用于临床诊断 | 第30-31页 |
| 5 展望 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第三章 巴斯德毕赤酵母(pichia pastoris)的研究进展 | 第34-42页 |
| 1、P.pastoris宿主菌 | 第34-35页 |
| 2 酵母表达载体 | 第35-38页 |
| ·载体的结构特点 | 第35-36页 |
| ·载体的类型 | 第36-37页 |
| ·载体的选择标志 | 第37-38页 |
| 3 外源蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第38-39页 |
| ·异源蛋白在酵母中表达的一般步骤 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的翻译后修饰 | 第39页 |
| 4 应用前景及局限性 | 第39-42页 |
| 第二部分 实验内容 | 第42-80页 |
| 第四章 人可溶性增殖诱导配体在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性鉴定 | 第43-60页 |
| 1 实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验材料和试剂 | 第44页 |
| ·主要实验仪器 | 第44-45页 |
| ·主要试剂配制 | 第45页 |
| 2 实验设计 | 第45-46页 |
| 3 实验方法 | 第46-52页 |
| ·人APRIL基因的钓取 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR扩增人sAPRIL cDNA: | 第47页 |
| ·DNA的克隆及序列测定 | 第47-48页 |
| ·菌落PCR鉴定及基因序列的测定 | 第48-49页 |
| ·重组人APRIL(rhsAPRIL)的表达、鉴定和纯化 | 第49-51页 |
| ·重组人APRIL(rhsAPRIL)的变复性及生物活性鉴定 | 第51-52页 |
| 4 实验结果 | 第52-56页 |
| ·RT-PCR扩增人sAPRIL cDNA | 第52-53页 |
| ·rhsAPRIL cDNA的克隆及序列测定 | 第53页 |
| ·rhsAPRIL的表达及鉴定 | 第53-54页 |
| ·rhsAPRIL的纯化及复性 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 第五章 抗hsAPRIL多克隆抗体的制备与鉴定 | 第60-70页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| ·抗原的制备 | 第61页 |
| ·抗体的制备 | 第61-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-66页 |
| ·抗血清的制备 | 第64页 |
| ·抗血清的效价 | 第64-65页 |
| ·APRIL抗体的纯化 | 第65-66页 |
| ·APRIL抗体的浓度 | 第66页 |
| ·APRIL抗体的鉴定 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 第六章 人BAFF单链抗体(scfv)在毕赤酵母中的克隆及表达 | 第70-80页 |
| 1 实验材料 | 第71页 |
| ·实验材料和试剂 | 第71页 |
| ·实验仪器 | 第71页 |
| 2 实验设计 | 第71-72页 |
| 3 实验方法 | 第72-76页 |
| ·引物的设计 | 第72页 |
| ·PCR合成基因 | 第72-73页 |
| ·质粒pPICZαA的提取与纯化 | 第73页 |
| ·用Pme Ⅰ& XbaⅠ于37℃双酶切PCR产物和pPICZαA,并将之纯化回收 | 第73-74页 |
| ·连接 | 第74页 |
| ·转化 | 第74页 |
| ·菌落PCR鉴定及测序 | 第74-75页 |
| ·宿主菌的转化 | 第75-76页 |
| 4 实验结果 | 第76页 |
| 5 讨论 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 附1 | 第81页 |
