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甘蓝型油菜再生体系与农杆菌介导的甜菜碱合成基因遗传转化研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 文献综述第13-52页
   ·植物离体组织和细胞再生的研究进展第14-28页
     ·植物细胞全能性第14-15页
     ·植物细胞决定作用第15页
     ·植物细胞分化第15-17页
     ·植物细胞脱分化第17-20页
     ·再分化第20页
     ·离体组织器官发生第20页
     ·体细胞胚胎发生第20-28页
   ·农杆菌介导的植物遗传转化研究进展第28-40页
     ·农杆菌及 Ti质粒生物学特性第28-29页
     ·农杆菌转化系统的优点第29页
     ·农杆菌转化植物的分子机制第29-34页
     ·T- DNA整合的分子机制第34-39页
     ·植物对于农杆菌侵染的抗性第39-40页
     ·影响农杆菌转化效率的因素第40页
   ·甜菜碱合成基因工程第40-48页
     ·甜菜碱的生物合成第41-42页
     ·与甜菜碱合成有关的酶及其编码基因第42-44页
     ·甜菜碱合成基因工程第44-48页
   ·油菜转基因育种研究进展第48-51页
     ·建立高效转化体系的影响因素第48-50页
     ·应用于油菜等芸苔属植物性状改良的基因转化第50页
     ·油菜遗传转化中存在问题及展望第50-51页
   ·研究目的和意义第51-52页
第二章 甘蓝型油菜花茎高效再生体系研究第52-56页
   ·材料和方法第52-53页
     ·试验材料第52页
     ·试验方法第52-53页
   ·结果与分析第53-55页
     ·预培养对外植体分化的促进作用第53页
     ·激素配比对不定芽诱导的影响第53-54页
     ·AgNO_3对花茎离体再生能力影响第54-55页
   ·讨论第55-56页
第三章 甘蓝型油菜幼胚培养与体细胞胚胎发生研究第56-63页
   ·材料与方法第56-57页
     ·植物材料第56页
     ·离体培养第56-57页
   ·结果与分析第57-61页
     ·不同发育时期的油菜胚胎在离体条件下的胚后发育模式第57-58页
     ·愈伤组织形成第58页
     ·体细胞胚胎发生第58-61页
   ·讨论第61-63页
第四章 甘蓝型油菜子叶和下胚轴再生体系研究第63-69页
   ·材料与方法第63-64页
     ·试验材料第63页
     ·培养基第63页
     ·无菌实生苗的建立和外植体培养第63页
     ·子叶和下胚轴外植体对抑菌剂的敏感性实验第63页
     ·子叶和下胚轴外植体对 Km浓度敏感性试验第63-64页
   ·结果与分析第64-68页
     ·子叶和下胚轴外植体的再生方式第64页
     ·不同基因型间子叶和下胚轴再生能力的差异第64-65页
     ·抑菌剂胁迫下油菜子叶和下胚轴外植体的再生能力第65-66页
     ·卡那霉素对油菜子叶和下胚轴外植体芽再生能力的影响第66-68页
   ·讨论第68-69页
第五章 农杆菌介导的油菜子叶和下胚轴的遗传转化研究第69-81页
   ·材料与方法第69-74页
     ·植物材料第69页
     ·质粒与农杆菌菌株第69-70页
     ·培养基第70页
     ·农杆菌活化与培养第70-71页
     ·植物外植体培养第71页
     ·共培养第71页
     ·转化细胞筛选与再生第71页
     ·转化体生根第71页
     ·转化体 PCR鉴定第71-73页
     ·转基因植株 BADH活性分析第73-74页
   ·结果与分析第74-78页
     ·转化体的获得第74-75页
     ·外植体对农杆菌侵染的反应与再生第75页
     ·共培养方式对外植体再生的影响第75-76页
     ·AgNO_3对外植体再生的影响第76-77页
     ·转基因植株的获得与PCR检测第77页
     ·BADH酶活性鉴定第77页
     ·CMO转化体的获得与耐盐性评价第77-78页
   ·讨论第78-81页
第六章 农杆菌介导油菜IN PLANTA整体转化体系的研究第81-93页
   ·材料与方法第81-86页
     ·植物材料第81页
     ·质粒第81-82页
     ·农杆菌转化第82-83页
     ·In planta转化油菜第83-84页
     ·GUS基因活性瞬时表达鉴定第84页
     ·抗生素抗性筛选第84-85页
     ·GUS基因 PCR鉴定第85页
     ·BADH基因PCR检测分析第85页
     ·CMO基因转化体抗盐能力评价第85-86页
     ·试剂第86页
   ·结果与分析第86-91页
     ·工程菌的鉴定第86页
     ·油菜的花器结构和开花特点第86-87页
     ·农杆菌蘸花侵染对油菜结实的影响第87-88页
     ·GUS基因瞬时表达鉴定第88-89页
     ·卡那霉素抗性和潮霉素抗性系的筛选第89页
     ·转化体鉴定第89-91页
   ·讨论第91-93页
     ·In planta转化法对油菜的有效性第91页
     ·转化的最佳时期第91-93页
结论第93-95页
参考文献第95-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页

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