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缬氨酸生产菌的原生质体融合育种及发酵条件研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-17页
   ·引言第8页
   ·L-缬氨酸的理化性质及用途第8-9页
     ·L-缬氨酸的理化性质第8页
     ·L-缬氨酸的用途第8-9页
   ·L-缬氨酸的生产方法第9-10页
     ·提取法第9-10页
     ·合成法第10页
     ·发酵法第10页
   ·L-缬氨酸的生物合成途径及其代谢调节机制第10-11页
     ·L-缬氨酸的生物合成途径第10-11页
     ·代谢调节机制第11页
   ·L-缬氨酸高产菌株的育种策略第11-15页
     ·出发菌株的选择第12页
     ·切断或改变平行代谢途径第12-13页
     ·解除菌体自身的反馈调节第13页
     ·增加前体物质的合成第13页
     ·切断进一步代谢途径第13页
     ·选育营养缺陷型回复突变株第13-14页
     ·L-缬氨酸高产菌代谢控制育种实例第14-15页
   ·论文立题背景及主要研究内容第15-17页
     ·立题背景第15-16页
     ·主要研究内容第16-17页
2.材料与方法第17-24页
   ·菌种第17页
   ·主要仪器第17页
   ·主要试剂第17-19页
   ·培养基第19-20页
   ·主要溶液第20页
   ·实验方法第20-24页
     ·菌体生长曲线的测定第20-21页
     ·菌体前培养第21页
     ·原生质体的形成第21页
     ·原生质体的再生第21页
     ·原生质体形成率和再生率的计算第21-22页
     ·原生质体的融合第22页
     ·融合率的计算第22页
     ·融合子的检出第22页
     ·产L-缬氨酸菌株的初筛第22-23页
     ·产L-缬氨酸菌株的复筛第23页
     ·发酵培养方法第23页
     ·分析方法第23-24页
3.结果与讨论第24-56页
   ·菌株遗传标记的验证第24-26页
     ·亲株生长曲线的测定第24-25页
     ·亲株产酸的测定第25-26页
   ·亲株原生质体的形成与再生第26-31页
     ·青霉素浓度的确定第26-27页
     ·青霉素预处理时间的确定第27-28页
     ·溶菌酶浓度与原生质体形成和再生的关系第28-29页
     ·酶解温度与原生质体形成和再生的关系第29-30页
     ·酶解时间与原生质体形成和再生的关系第30-31页
   ·原生质体融合第31-34页
     ·聚乙二醇(PEG)浓度与融合率的关系第31-32页
     ·PEG作用时间与融合率的关系第32页
     ·Ca~(2+)浓度与融合率的关系第32-33页
     ·融合温度与融合率的关系第33-34页
   ·融合子的检出和目的融合子的筛选第34页
   ·目的融合子遗传稳定性测定第34-35页
   ·应用正交设计试验优化种子培养基第35-38页
   ·种子培养条件的研究第38-41页
     ·种子培养基pH的确定第38-39页
     ·种子培养基最佳装液量的确定第39-40页
     ·种子培养温度的确定第40页
     ·种子培养时间的确定第40-41页
   ·摇瓶发酵培养基组成的单因素试验第41-49页
     ·不同碳源对L-缬氨酸发酵的影响第42页
     ·不同氮源对L-缬氨酸发酵的影响第42-43页
     ·添加不同氨基酸对L-缬氨酸发酵的影响第43-44页
     ·利用模式识别优化方法优化发酵培养基组成第44-49页
   ·摇瓶发酵条件的研究第49-53页
     ·温度对发酵的影响第49页
     ·pH控制方式的比较第49-50页
     ·供氧对L-缬氨酸发酵的影响第50-51页
     ·接种量的确定第51-53页
   ·优化条件下的摇瓶分批发酵过程曲线第53页
   ·200吨罐分批发酵试验第53-56页
4.结论与展望第56-58页
   ·结论第56-57页
   ·展望第57-58页
参考文献第58-64页
研究生期间发表论文情况第64-65页
致谢第65页

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