摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一章 绪论 | 第15-29页 |
·凝集素的概述 | 第15-23页 |
·凝集素的分类 | 第15-18页 |
·凝集素的纯化与凝集性质 | 第18页 |
·凝集素的应用领域 | 第18-22页 |
·展望与前景 | 第22-23页 |
·毕赤酵母 Pichia pastoris 表达系统的研究进展 | 第23-27页 |
·概述 | 第23-24页 |
·巴斯德毕赤酵母的遗传学特性 | 第24页 |
·受体菌的种类 | 第24-25页 |
·表达载体的概述 | 第25-26页 |
·影响外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中表达的因素 | 第26-27页 |
·展望 | 第27页 |
·论文的创新性 | 第27-29页 |
第二章 载体构建 | 第29-37页 |
·实验材料与方法 | 第29-32页 |
·质粒与菌株 | 第29-30页 |
·工具酶与试剂 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-32页 |
·结果与讨论 | 第32-35页 |
·植物水仙凝集素(NTL)基因序列的优化 | 第32-34页 |
·中国水仙凝集素基因在大肠杆菌中的克隆 | 第34页 |
·NTL 重组毕赤酵母的构建 | 第34-35页 |
·本章小结 | 第35-37页 |
第三章 蛋白的初步表达 | 第37-43页 |
·实验材料与方法 | 第37-40页 |
·实验材料 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-40页 |
·结果与讨论 | 第40-42页 |
·蛋白电泳和 western blotting | 第40-41页 |
·有机培养基与无机培养基对比 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
第四章 重组凝集素的发酵表达研究 | 第43-53页 |
·实验装置与材料 | 第43-46页 |
·实验装置 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第44页 |
·发酵罐操作流程 | 第44-46页 |
·试验方法 | 第46-48页 |
·菌体浓度测定 | 第46页 |
·发酵液中总蛋白含量测定 | 第46-47页 |
·发酵液中铵盐浓度测定 | 第47-48页 |
·发酵液中甘油浓度测定 | 第48页 |
·结果与讨论 | 第48-52页 |
·目标蛋白的表达分析 | 第48-50页 |
·菌体浓度随时间的变化情况 | 第50-51页 |
·甘油随时间的消耗情况 | 第51-52页 |
·铵离子浓度变化 | 第52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
第五章 重组水仙凝集素的纯化与性质研究 | 第53-61页 |
·实验材料与方法 | 第53-55页 |
·实验材料 | 第53页 |
·试验方法 | 第53-55页 |
·结果与讨论 | 第55-59页 |
·过柱纯化 | 第55-56页 |
·凝血实验 | 第56-57页 |
·去糖基化 | 第57-58页 |
·圆二色谱 | 第58-59页 |
·本章小结 | 第59-61页 |
第六章 结论与建议 | 第61-64页 |
·结论 | 第61页 |
·建议 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附录 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第80-82页 |
作者及导师简介 | 第82-83页 |
硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第83-84页 |