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小鼠GITRL蛋白对CD4~+CD25~+T细胞功能影响的初步研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-17页
第一章 绪论第17-29页
   ·CD4~+CD25~+Treg细胞第17-19页
     ·CD4~+CD25~+Treg细胞简介第17-18页
     ·CD4~+CD25~+Treg细胞的分子标记第18页
     ·CD4~+CD25~+Treg细胞与疾病的关系第18-19页
   ·GITRL/GITR在免疫调节中的作用第19-22页
     ·GITRL和GITR分子简介第19-20页
     ·GITRL/GITR与CD4~+T细胞的关系第20-21页
     ·GITRL/GITR可能涉及的信号通路第21-22页
   ·FOXP3与CD4~+CD25~+Treg细胞的关系第22-25页
     ·FOXP3分子简介第22-23页
     ·FOXP3分子对CD4~+CD25~+Treg细胞的影响第23页
     ·FOXP3分子表达的调控途径第23-25页
   ·本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义第25-29页
     ·研究目的第25页
     ·研究方法第25页
     ·实验设计第25-27页
     ·本研究的意义第27-29页
第二章 真核表达载体mGITRL_(aa45-173)-pDisplay的构建及蛋白表达第29-39页
   ·材料第29-30页
     ·主要试剂第29页
     ·溶液第29页
     ·质粒载体和菌株第29-30页
   ·方法第30-34页
     ·mGITRL_(aa45-173)基因的PCR扩增第30-31页
     ·mGITRL_(aa45-173)基因真核表达载体的构建与鉴定第31-32页
     ·转染HEK293细胞株第32-33页
     ·mGITRL_(aa45-173)蛋白的表达及鉴定第33-34页
   ·结果第34-37页
     ·mGITRL_(aa45-173)基因的PCR扩增第34-35页
     ·mGITRL_(aa45-173)基因真核表达载体的构建及鉴定第35-36页
     ·mGITRL_(aa45-173)蛋白在HEK293细胞中的表达第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 mGITRL蛋白对小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞的Foxp3表达及功能的影响第39-51页
   ·材料和方法第39-40页
     ·主要试剂第39页
     ·溶液的配制第39页
     ·质粒载体和菌株第39-40页
   ·方法第40-43页
     ·小鼠CD4~+CD25~+T细胞的分离第40-41页
     ·小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞细胞表面GITR的表达第41页
     ·T细胞增殖实验第41页
     ·小鼠CD4~+CD25~+T细胞的Foxp3检测第41-43页
     ·统计分析第43页
   ·结果第43-48页
     ·小鼠CD4~+CD25~+T细胞的分离第43-44页
     ·小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞细胞表面GITR的表达第44页
     ·mGITRL蛋白解除CD4~+CD25~+T细胞抑制功能第44-46页
     ·mGITRL蛋白刺激小鼠CD4~+CD25~+T细胞增殖第46-47页
     ·mGITRL蛋白对小鼠CD4~+CD25~+T细胞的Foxp3表达的影响第47-48页
   ·讨论第48-51页
第四章 小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备第51-59页
   ·材料第51页
     ·主要试剂第51页
     ·质粒载体和菌株第51页
   ·方法第51-54页
     ·原核表达载体mFoxp3-pET32a的构建及鉴定第51-52页
     ·mFoxp3重组蛋白的诱导表达第52-53页
     ·mFoxp3重组蛋白的鉴定第53页
     ·mFoxp3重组蛋白的表达及纯化第53页
     ·免疫动物第53-54页
     ·兔抗小鼠Foxp3抗血清效价和特异性的测定第54页
   ·结果第54-57页
     ·重组表达质粒mFoxp3-pET-32a的构建及鉴定第54-55页
     ·重组小鼠Foxp3蛋白的诱导表达、纯化及鉴定第55-56页
     ·兔抗小鼠Foxp3多克隆抗体效价和特异性的测定第56-57页
   ·讨论第57-59页
第五章 主要结论及展望第59-61页
   ·主要结论第59页
   ·展望第59-61页
参考文献第61-71页
缩略词第71-73页
致谢第73-75页
攻读硕士学位期间发表的文章第75页

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