| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·基因治疗 | 第14-17页 |
| ·基因治疗的涵义 | 第14页 |
| ·基因治疗的条件 | 第14页 |
| ·基因载体的选择 | 第14-15页 |
| ·基因转移靶细胞的选择 | 第15-16页 |
| ·目的基因的高效表达 | 第16-17页 |
| ·融合基因的生物学特性 | 第17-19页 |
| ·TNFa | 第17页 |
| ·Tumstatin | 第17-18页 |
| ·TNFa-Tumstatin融合基因 | 第18-19页 |
| ·MSCs作为载体细胞基因治疗的现状 | 第19-20页 |
| ·肿瘤干细胞研究现状 | 第20-24页 |
| 第二章 本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义 | 第24-30页 |
| ·研究目的 | 第24页 |
| ·研究方法及技术 | 第24-25页 |
| ·实验方案的设计 | 第25-29页 |
| ·本研究的意义 | 第29-30页 |
| 第三章 融合基因TNFa-Tumstatin的腺病毒载体构建 | 第30-38页 |
| ·材料和仪器 | 第30-31页 |
| ·材料试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·PCR引物设计 | 第31页 |
| ·TNFa-Tumstatin融合基因TA克隆及测序 | 第31-32页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/TNFa-Tumstatin的构建 | 第32页 |
| ·重组腺病毒质粒pAdGFP/TNFa-Tumstatin的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·293A细胞的复苏和培养 | 第33页 |
| ·重组腺病毒AdGFP/TNFa-Tumstatin的转染包装及扩增 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-36页 |
| ·TNFa-Tumstatin融合基因TA克隆鉴定及测序 | 第33-34页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/TNFa-Tumstatin的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组腺病毒质粒pAdGFP/TNFa-Tumstatin的鉴定 | 第35页 |
| ·重组腺病毒AdGFP/TNFa-Tumstatin转染293A细胞 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤的初步体外实验 | 第38-46页 |
| ·材料和仪器 | 第38-39页 |
| ·材料试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·hUCMSCs的分离培养 | 第39页 |
| ·重组腺病毒AdGFP/TNFa-Tumstatin感染hUCMSCs | 第39页 |
| ·基因修饰的hUCMSCs融合基因的检测 | 第39-40页 |
| ·基因修饰hUCMSCs培养上清中TNFa的检测 | 第40页 |
| ·融合蛋白对ECV-304细胞增殖抑制的检测 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白对U937、THP-1细胞杀伤活性检测 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·重组腺病毒AdGFP/TNFa-Tumstatin感染hUCMSCs | 第41-42页 |
| ·基因修饰的hUCMSCs融合基因的表达 | 第42-43页 |
| ·基因修饰hUCMSCs培养上清中TNFa水平 | 第43页 |
| ·融合蛋白对ECV-304细胞增殖的抑制作用 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白对U937、THP-1细胞的杀伤作用 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 髓系白血病干细胞的培养及其特征鉴定 | 第46-54页 |
| ·材料和仪器 | 第46-47页 |
| ·材料试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·LSC分离培养 | 第47页 |
| ·细胞增殖能力分析 | 第47页 |
| ·表面标志的检测 | 第47页 |
| ·染色体核型分析 | 第47-48页 |
| ·总RNA提取和RT-PCR | 第48页 |
| ·结果 | 第48-51页 |
| ·LSC的形态学特征 | 第48-49页 |
| ·LSC的生长特性 | 第49页 |
| ·染色体核型 | 第49-50页 |
| ·表面标志 | 第50-51页 |
| ·干细胞相关基因的表达 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第六章 结论和展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第64-65页 |
