| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| ·幽门螺旋杆菌的发现及意义 | 第8页 |
| ·幽门螺旋杆菌的发现 | 第8页 |
| ·幽门螺旋杆菌发现的意义 | 第8页 |
| ·幽门螺旋杆菌的特性 | 第8-9页 |
| ·幽门螺旋杆菌的形态学特征 | 第8-9页 |
| ·幽门螺旋杆菌的生理学和分子生物学特征 | 第9页 |
| ·幽门螺旋杆菌的致病机制 | 第9-11页 |
| ·H. pylori 的毒力因子 | 第9-10页 |
| ·H. pylori 的黏附与定植 | 第10页 |
| ·H. pylori 菌株 | 第10页 |
| ·H. pylori 感染与炎症损伤 | 第10-11页 |
| ·幽门螺旋杆菌的诊断方法 | 第11-12页 |
| ·侵入性方法 | 第11-12页 |
| ·非侵入性方法 | 第12页 |
| ·幽门螺旋杆菌相关疾病的治疗 | 第12-13页 |
| ·抗菌治疗 | 第12-13页 |
| ·抗氧化剂治疗 | 第13页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第13-15页 |
| ·噬菌体表面展示技术的原理与方法 | 第13-14页 |
| ·噬菌体抗体库淘洗富集的原理与方法 | 第14-15页 |
| ·噬菌体展示技术在幽门螺旋杆菌研究中的应用 | 第15页 |
| ·噬菌体展示技术的意义 | 第15页 |
| ·基因工程抗体 | 第15-18页 |
| ·小分子抗体scFv，Fab，F(ab’)~2、Fv | 第15-16页 |
| ·小分子抗体特点及意义 | 第16页 |
| ·单链抗体的构建 | 第16页 |
| ·单链抗体的表达载体 | 第16-17页 |
| ·单链抗体的可溶性表达 | 第17页 |
| ·基因工程抗体的应用展望 | 第17-18页 |
| ·立题背景 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 幽门螺旋杆菌单链抗体的筛选 | 第20-29页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌株与文库 | 第20-21页 |
| ·实验主要试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌方法 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·幽门螺旋杆菌的培养 | 第22-23页 |
| ·Tomlinson 文库的扩增以及滴度的测定 | 第23页 |
| ·Tomlinson 文库的保存 | 第23页 |
| ·KM13 辅助噬菌体的制备 | 第23-24页 |
| ·空白细胞菌株的培养 | 第24页 |
| ·噬菌体侵染E.coli TG1 最适侵染条件的摸索 | 第24-25页 |
| ·幽门螺旋杆菌scFv 的筛选 | 第25页 |
| ·单克隆scFv 的挑选 | 第25-26页 |
| ·实验结果与分析 | 第26-28页 |
| ·幽门螺旋杆菌的培养 | 第26页 |
| ·Tomlinson 文库和KM13 辅助噬菌体滴度的测定 | 第26-27页 |
| ·噬菌体侵染E.coli TG1 最适侵染条件 | 第27-28页 |
| ·幽门螺旋杆菌scFv 的筛选 | 第28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 第三章 幽门螺旋杆菌单链抗体的鉴定 | 第29-40页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌株与文库 | 第29页 |
| ·实验主要试剂 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·幽门螺旋杆菌固定条件的摸索 | 第30-31页 |
| ·Tomlinson 文库每轮筛选结果的ELISA 检测 | 第31页 |
| ·单克隆scFv 的ELISA 检测 | 第31-32页 |
| ·测定阳性克隆交叉反应 | 第32页 |
| ·阳性克隆的scFv 基因的PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆PIT2 质粒的酶切分析 | 第33页 |
| ·阳性克隆scFv 基因测序 | 第33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-38页 |
| ·幽门螺旋杆菌细胞的最适固定条件 | 第33-34页 |
| ·Tomlinson 文库每轮筛选结果的ELISA 检测 | 第34-35页 |
| ·单克隆scFv 的ELISA 鉴定结果 | 第35页 |
| ·测定阳性克隆交叉反应 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的scFv 基因的PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·阳性克隆PIT2 质粒的酶切分析 | 第36-38页 |
| ·阳性克隆scFv 基因测序 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第四章 幽门螺旋杆菌单链抗体的表达与纯化 | 第40-46页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株与文库 | 第40页 |
| ·实验主要试剂 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40-41页 |
| ·培养基、溶液的配制及灭菌 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·阳性克隆JH1 可溶性scFv 的表达 | 第41-42页 |
| ·scFv 的ELISA 检测 | 第42页 |
| ·scFv 的Ni 柱纯化 | 第42-43页 |
| ·scFv 的 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-45页 |
| ·scFv 的ELISA 检测 | 第43-44页 |
| ·scFv 的Ni 离子柱纯化及SDS-PAGE 分析 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 主要结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
