| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·研究背景 | 第7-11页 |
| ·葡萄糖异构酶简介 | 第7-8页 |
| ·高果糖浆研究现状与葡萄糖异构酶在高果糖浆生产中的应用 | 第8-9页 |
| ·嗜热菌和耐热性葡萄糖异构酶的研究现状 | 第9-10页 |
| ·影响外源基因在大肠杆菌宿主中表达因素的研究进展 | 第10-11页 |
| ·立题背景及意义 | 第11-12页 |
| ·课题研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 葡萄糖异构酶编码基因xylA 的克隆、序列优化与表达 | 第13-25页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·材料与方法 | 第13-18页 |
| ·菌株与质粒 | 第13页 |
| ·培养基 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·T. maritima 的培养方法 | 第14页 |
| ·T. maritima 基因组DNA 的提取方法 | 第14-15页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第15页 |
| ·引物设计及目的基因PCR 方法扩增 | 第15页 |
| ·pHsh-xylA1 的构建、转化及阳性转化子的筛选 | 第15-16页 |
| ·经过序列优化的表达载体pHsh-xylA2 的构建 | 第16-17页 |
| ·粗酶液的制备及重组酶酶活的测定 | 第17-18页 |
| ·重组酶蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第18页 |
| ·菌株质粒稳定性实验 | 第18页 |
| ·结果与讨论 | 第18-24页 |
| ·xylA 基因的克隆与pHsh-xylA1 的构建 | 第18-19页 |
| ·mRNA 二级结构的优化以及pHsh-xylA2 的构建 | 第19-21页 |
| ·重组菌株E. coli JM109（pHsh-xylA2）诱导条件的优化 | 第21-23页 |
| ·突变效果的对比 | 第23-24页 |
| ·重组质粒pHsh-xylA2 的稳定性 | 第24页 |
| ·本章小结 | 第24-25页 |
| 第三章 重组耐热葡萄糖异构酶的纯化与性质 | 第25-32页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-27页 |
| ·菌种与培养基 | 第25页 |
| ·主要试剂及缓冲液 | 第25页 |
| ·主要仪器及其生产厂商 | 第25页 |
| ·重组葡萄糖异构酶的纯化 | 第25-26页 |
| ·重组葡萄糖异构酶的酶学性质的测定 | 第26-27页 |
| ·结果和讨论 | 第27-31页 |
| ·葡萄糖异构酶的纯化 | 第27-28页 |
| ·重组葡萄糖异构酶的性质 | 第28-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第四章 重组菌E. coli JM109(pHsh-xylA2)表达培养 | 第32-41页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料和方法 | 第32-33页 |
| ·菌种 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器及其生产厂商 | 第32-33页 |
| ·种子培养 | 第33页 |
| ·培养基优化 | 第33页 |
| ·发酵罐培养方法 | 第33页 |
| ·葡萄糖浓度的测定 | 第33页 |
| ·菌体浓度和重量 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-40页 |
| ·培养基组分对重组菌生长的影响 | 第33-39页 |
| ·3.8 L 台式发酵罐中重组菌的培养 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
