| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-36页 |
| 1 草甘膦的生产及其发展 | 第14-15页 |
| 2 草甘膦性质及作用机理 | 第15-20页 |
| ·草甘膦的理化性质 | 第15-16页 |
| ·草甘膦作用特点 | 第16-18页 |
| ·良好的内吸性和极宽的杀草谱 | 第16页 |
| ·不易产生抗药性 | 第16-18页 |
| ·安全、无害 | 第18页 |
| ·草甘膦毒性机理 | 第18-20页 |
| 3 生物抗草甘膦的机理 | 第20-22页 |
| 4 草甘膦靶标酶EPSPS的研究现状 | 第22-28页 |
| ·EPSPS的分类 | 第22页 |
| ·EPSPS定位 | 第22-23页 |
| ·EPSP合成酶的三维结构与活性区 | 第23-26页 |
| ·EPSPS基因的克隆及分子生物学研究 | 第26-28页 |
| 5 抗草甘磷转基因作物的选育途径及研究进展 | 第28-32页 |
| ·转基因的概念 | 第28-29页 |
| ·抗草甘膦转基因作物的选育途径 | 第29-30页 |
| ·抗草甘膦转基因作物的研究进展 | 第30-32页 |
| 6 抗草甘磷转基因水稻的研究现状 | 第32-36页 |
| ·植物遗传转化方法及特点 | 第33-36页 |
| ·农杆菌介导的基因转移 | 第34页 |
| ·基因枪介导的基因转移 | 第34-35页 |
| ·PEG介导的基因转移 | 第35页 |
| ·花粉管导入法介导的基因转移 | 第35-36页 |
| 第二章 抗草甘膦G6基因的克隆、表达及草甘膦抑制下生长曲线的建立 | 第36-79页 |
| 1 实验材料与方法 | 第36-47页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·土壤样品 | 第36页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第36页 |
| ·菌株和载体 | 第36-37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析所用的试剂 | 第37页 |
| ·Western blot分析所用的试剂 | 第37页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所用的试剂 | 第37-38页 |
| ·其它试剂 | 第38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-47页 |
| ·菌株的分离与纯化 | 第38-39页 |
| ·菌株的鉴定 | 第39-40页 |
| ·抗草甘膦G6基因的克隆 | 第40-44页 |
| ·抗草甘膦G6基因的原核表达和草甘膦抑制下生长曲线的建立 | 第44-46页 |
| ·目的蛋白的纯化回收及抗体制备 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-77页 |
| ·菌株的鉴定 | 第47-50页 |
| ·16S rDNA鉴定 | 第47-50页 |
| ·G6菌株的电镜观察 | 第50页 |
| ·G6基因的扩增 | 第50-53页 |
| ·G6蛋白的生物信息学分析 | 第53-69页 |
| ·G6蛋白一级结构分析 | 第53-65页 |
| ·G6蛋白二级结构分析 | 第65页 |
| ·G6蛋白质三级结构分析 | 第65-69页 |
| ·抗草甘膦G6基因的原核表达和草甘膦抑制下生长曲线的建立 | 第69-75页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·草甘膦抑制下生长曲线的建立 | 第70-74页 |
| ·G6原核表达和SDS-PAGE分析 | 第74-75页 |
| ·目的蛋白的纯化和抗体的制备 | 第75-77页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第75-76页 |
| ·抗体的制备和效价检测 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 第三章 抗草甘膦转基因水稻的培育 | 第79-97页 |
| 1 材料和方法 | 第79-89页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·植物材料 | 第79页 |
| ·菌株和质粒 | 第79-80页 |
| ·试剂与仪器 | 第80页 |
| ·实验用溶液的配制 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-89页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第80-84页 |
| ·农杆菌感受态的制备和转化 | 第84-85页 |
| ·水稻的转化 | 第85-86页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第86-87页 |
| ·转G6抗草甘膦基因植株的PCR鉴定 | 第87页 |
| ·Western blot分析 | 第87-88页 |
| ·Southern印迹分析 | 第88页 |
| ·T_0和T_1转基因水稻抗性实验 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-96页 |
| ·载体构建 | 第89-90页 |
| ·抗草甘膦转基因植株的获得 | 第90-91页 |
| ·T_0代抗草甘膦植株的PCR检测 | 第91-92页 |
| ·T_0代抗草甘瞵植株的Western blot检测 | 第92-93页 |
| ·T_0代抗草甘膦植株的Southern blot检测 | 第93页 |
| ·T_0代转基因水稻抗性实验 | 第93-95页 |
| ·T_1代转基因水稻抗性实验 | 第95-96页 |
| 3 讨论 | 第96-97页 |
| 总讨论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-109页 |
| 缩写与中英文对照 | 第109-110页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第110-112页 |
| 附录B 实验用溶液及培养基配方 | 第112-115页 |
