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转基因水稻抗病性的遗传和对发育调控的机理研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
文献综述 植物抗病反应以及抗病基因工程第13-44页
 一.植物的抗病反应第13-25页
  1 植物的抗病系统第13-16页
  2 植物R基因的克隆与功能分析第16-17页
  3 植物avr基因的克隆和功能分析第17-18页
  4 R和AVR的互做分子模式第18-20页
  5 植物的系统诱导防卫反应途径第20页
  6 抗病反应的信号分子转导第20-25页
  7 免疫反应与其它途径的互作第25页
 二.水稻抗病反应研究进展第25-33页
  1 水稻抗病基因的克隆与功能研究第25-28页
  2 水稻防卫反应和PR蛋白第28-33页
 三.水稻抗病基因工程研究进展第33-39页
  1 水稻的主要病害第33-34页
  2 水稻抗病基因工程第34-39页
 四.植物基因工程的现状和前景第39-42页
  1 国外转基因植物产业化现状第39-40页
  2 我国转基因产业化现状第40-42页
 本研究的意义、目的和主要研究内容第42-44页
研究论文 转基因水稻抗病性的遗传和对发育调控的机理研究第44-100页
 第一部分:RCH10和AGLU1在水稻抗病和发育中的功能分析第44-91页
  第一章 高世代转基因抗病植株的选育第45-66页
   1 材料和方法第45-54页
   ·材料第45页
     ·转基因水稻第45页
     ·纹枯病菌第45页
     ·稻瘟病菌株第45页
     ·RCH10、AGLU1的多克隆抗体第45页
   ·方法第45-54页
     ·转基因水稻PCR分析第45-47页
     ·转基因水稻Southern分析第47-50页
     ·转基因水稻Northern分析第50-51页
     ·转基因水稻Western分析第51-52页
     ·转基因水稻纹枯病抗性鉴定第52-53页
     ·转基因水稻稻瘟病抗性鉴定第53页
     ·转基因水稻的组织化学染色第53-54页
   ·统计分析第54页
   2 结果与分析第54-63页
   ·外源基因在转基因后代的遗传分析第54-56页
     ·T_1代转基因植株的分离鉴定第54-55页
     ·T_2代转基因植株的分离鉴定第55页
     ·T_3代转基因植株双价基因的遗传分析第55-56页
   ·外源基因在转基因后代的整合分析第56-57页
   ·外源基因在转基因后代的表达分析第57-58页
   ·转基因对OsPR1b基因的表达调控第58页
   ·外源基因在转基因后代的蛋白表达分析第58-59页
   ·转基因植株的抗病性第59-63页
     ·T_1代转基因植株的抗病性第59-61页
     ·T_2代转基因植株的抗病性第61页
     ·T_3代、T_4代转基因植株的抗病性第61-63页
   3 讨论第63-66页
  第二章 RCH10和AGLU1的酶活性和亚细胞定位与抗病性的关系第66-75页
   1 材料和方法第66-70页
   ·材料第66页
     ·水稻材料第66页
     ·纹枯病菌株和接种方法第66页
     ·胶体金探针第66页
     ·RCH10、AGLU1的多克隆抗体第66页
   ·方法第66-70页
     ·粗酶液的提取第67页
     ·几丁质酶活性测定第67-68页
     ·β-1,3-葡聚糖酶活性的测定第68页
     ·胶体金免疫标记方法第68-70页
   2 结果与分析第70-73页
   ·纹枯病接种对转基因水稻中几丁质酶活性的影响第70页
   ·纹枯病接种对转基因水稻中葡聚糖酶活性的影响第70页
   ·RCH10、AGLU1在转基因植株中亚细胞定位第70-73页
   ·纹枯病菌诱导对RCH10、AGLU1在亚细胞中分布的影响第73页
   3 讨论第73-75页
  第三章 纹枯病菌对转基因水稻膜脂过氧化和抗氧化酶活性的影响第75-81页
   1 材料和方法第75-76页
   ·材料第75-76页
     ·水稻材料第75页
     ·纹枯病菌株和接种方法第75-76页
   ·方法第76页
     ·MDA含量的测定第76页
     ·酶液的提取以及酶活性的测定第76页
   2 结果与分析第76-79页
   ·纹枯病接种对水稻叶片中MDA含量的动态变化第76页
   ·纹枯病接种对水稻叶片中SOD活性的影响第76-77页
   ·纹枯病接种对水稻叶片中CAT,GPX和APX活性的影响第77页
   ·纹枯病接种对水稻叶片中DHAR和GR活性的影响第77-79页
   3 讨论第79-81页
  第四章 转基因对种子千粒重、发芽和苗期生长的影第81-91页
   1 材料与方法第81-84页
   ·水稻材料第81页
   ·方法第81-84页
     ·种子含水量、千粒重的测定第81页
     ·利用近红外广谱分析稻米品质第81页
     ·环境扫描电镜观察第81-82页
     ·种子发芽率和发芽势的测定第82页
     ·对GA_3敏感性实验第82页
     ·基因转录水平的调控RT-PCR第82-84页
   2 结果与分析第84-89页
   ·转基因对千粒重及米质的影响第84-86页
   ·转基因对发芽势、发芽率和植株苗期长势的影响第86-88页
   ·转基因植株对外源GA_3的敏感性第88-89页
   ·转基因对GA信号途径和代谢途径基因表达的影响第89页
   3 讨论第89-91页
 第二部分:水稻SAR途径抑制发育的分子证据第91-100页
  1 材料和方法第92-93页
   ·水稻材料第92页
   ·Microarray分析第92-93页
   ·对GA_3敏感性实验第93页
  2 结果与分析第93-98页
   ·转基因株系G316对外源GA的敏感性第93-94页
   ·转基因株系G316和野生型TP309样本间基因表达谱差异分析第94-96页
   ·参与细胞发育的差异表达基因第96-98页
  3 讨论第98-100页
参考文献第100-135页
附录第135-136页
致谢第136页

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