| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·转基因技术在玉米遗传改良中的应用 | 第10-14页 |
| ·转基因技术在玉米遗传改良中的兴起 | 第10-11页 |
| ·玉米转基因实验技术的发展概况 | 第11-14页 |
| ·小麦高分子量谷蛋白亚基 | 第14-16页 |
| ·小麦HMW-GS基因的结构特点 | 第14页 |
| ·小麦HMW-GS的结构与功能 | 第14-15页 |
| ·序列已知的小麦HMW-GS基因 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的、意义和技术路线 | 第16-19页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第16-18页 |
| ·本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 表达载体的构建 | 第19-44页 |
| ·实验材料与仪器 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·培养基、实验试剂及Buffer的配制 | 第20-21页 |
| ·培养基的配制 | 第20页 |
| ·实验试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·Buffer的配制 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·载体构建方法 | 第21-24页 |
| ·PCR扩增引物 | 第21-22页 |
| ·Dx5,Dy10基因的PCR扩增 | 第22-24页 |
| ·zein启动子的PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR扩增产物的回收与连接反应 | 第24-25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的扩繁 | 第25页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第25-28页 |
| ·实验试剂的配制 | 第25页 |
| ·基本实验方法(碱裂解法) | 第25-27页 |
| ·质粒DNA浓度及纯度检测 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-43页 |
| ·目的基因片段的克隆与序列分析 | 第28-41页 |
| ·zein启动子片段zein Ⅱ的克隆与序列分析 | 第28-29页 |
| ·zein启动子片段zeinⅠ的克隆与序列分析 | 第29页 |
| ·Dx5基因的克隆与序列分析 | 第29-35页 |
| ·Dv10基因的克隆与序列分析 | 第35-41页 |
| ·玉米表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·pGREEN333的构建与分析 | 第41页 |
| ·pGREEN335的构建与分析 | 第41-42页 |
| ·pGREEN336的构建与分析 | 第42页 |
| ·pGREEN337的构建与分析 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 转基因玉米植株的获得 | 第44-49页 |
| ·材料和方法 | 第44-47页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·各类筛选培养基的配制 | 第44页 |
| ·转化载体的制备及纯化 | 第44-45页 |
| ·金粉制备 | 第45-46页 |
| ·微粒子弹的准备 | 第46页 |
| ·基因枪的轰击 | 第46-47页 |
| ·转化愈伤组织的筛选和植株的再生 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 转基因玉米植株的分子生物学检测 | 第49-59页 |
| ·材料与方法 | 第49-55页 |
| ·材料与仪器设备 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·玉米总DNA的提取 | 第50-51页 |
| ·玉米总DNA的保存 | 第51页 |
| ·玉米T_0代的Dx5、Dy10转基因片段的PCR检测 | 第51页 |
| ·转基因玉米的PCR-Southern验证 | 第51-54页 |
| ·转基因植株HMW-GS蛋白的检测 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| ·转基因玉米叶片DNA的提取 | 第55页 |
| ·转基因玉米后代植株外源Dx5基因片段的检测结果 | 第55-57页 |
| ·转基因植株HMW-GS蛋白的检测 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |