| 英文缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 第一章 parp10 基因cDNA 的克隆及 PARP10 功能研究 | 第20-41页 |
| 材料和方法 | 第20-31页 |
| 1、材料 | 第20-23页 |
| 2、方法 | 第23-31页 |
| ·A549 细胞总RNA 的提取 | 第23页 |
| ·RT-PCR 扩增parp10 cDNA 的获得 | 第23-25页 |
| ·PARP10 的小鼠组织表达谱分析 | 第25-27页 |
| ·免疫沉淀分析PARP10 相互作用蛋白 | 第27页 |
| ·免疫荧光检测PARP10 与β- actin 在细胞内共定位 | 第27-28页 |
| ·mRNA 原位杂交检测PARP10 对细胞内mRNA 分布的影响 | 第28-29页 |
| ·紫外损伤对A549 细胞内PARP10 表达的影响 | 第29页 |
| ·Western blotting 检测目的蛋白 | 第29-31页 |
| 结果 | 第31-38页 |
| 1、RT-PCR 扩增parp10 基因全长cDNA | 第31-32页 |
| 2、PARP10 在小鼠组织中广泛表达 | 第32-33页 |
| 3、PARP10 和β-actin 存在相互作用 | 第33-36页 |
| 4、PARP10 对细胞内mRNA 定位的影响 | 第36页 |
| 5、UV 对细胞内PARP10 表达的影响 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 第二章 H5N1 亚型禽流感病毒 NS1 蛋白和宿主蛋白 PARP10 相互作用验证 | 第41-57页 |
| 材料和方法 | 第41-47页 |
| 1、材料 | 第41-42页 |
| 2、方法 | 第42-47页 |
| ·设计合成PCR 引物 | 第42-43页 |
| ·GST-NS1 融合蛋白的表达及纯化 | 第43-44页 |
| ·Myc-PARP10 在哺乳动物细胞内的表达和检测 | 第44页 |
| ·GST 融合蛋白沉降技术检测NS1 和PARP10 相互作用 | 第44页 |
| ·采用细胞共定位实验研究NS1 和PARP10 的相互作用 | 第44-45页 |
| ·免疫共沉淀实验研究NS1 和PARP10 相互作用 | 第45-47页 |
| 结果 | 第47-55页 |
| 1、原核表达的NS1 能够沉淀哺乳动物细胞中瞬时表达的PARP10 | 第47-50页 |
| 2、瞬时表达的NS1 和PARP10 在哺乳动物细胞内共定位 | 第50-51页 |
| 3、瞬时表达的PARP10 和NS1 共沉淀 | 第51-52页 |
| 4、免疫共沉淀检测PARP10 与 NS1 作用的区域 | 第52-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 NS1 蛋白和宿主蛋白 PARP10 相互作用的生理功能 | 第57-76页 |
| 材料和方法 | 第57页 |
| 1、材料 | 第57-58页 |
| 2、方法 | 第58-63页 |
| ·parp10 基因干涉靶点的筛选 | 第58-59页 |
| ·Western blotting 检测外源PARP10 表达抑制情况 | 第59页 |
| ·MTT 染色实验 | 第59-60页 |
| ·NS1 和PARP10 对细胞周期的影响 | 第60-61页 |
| ·筛选能有效复制禽流感病毒的宿主细胞 | 第61页 |
| ·Western blotting 检测PARP10 对病毒增殖的影响 | 第61-62页 |
| ·测定病毒TCID50 检测PARP10 对病毒增殖的影响 | 第62-63页 |
| 结果 | 第63-73页 |
| 1、 NS1 对细胞内PARP10 表达的影响 | 第63-64页 |
| 2、筛选PARP10 的RNAi 有效靶点 | 第64-65页 |
| 3、NS1 和PARP10 对细胞活性的影响 | 第65-67页 |
| 4、NS1 和PARP10 对细胞周期的影响 | 第67-69页 |
| 5、PARP10 抑制H5N1 型禽流感病毒在细胞中的增殖 | 第69-73页 |
| 讨论 | 第73-76页 |
| 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 综述 | 第84-93页 |
| 论著 | 第93-103页 |
| 个人简历 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
