| 缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-21页 |
| 1. 兽药恩诺沙星及其研究现状 | 第16-18页 |
| ·概述 | 第16页 |
| ·结构及性状 | 第16页 |
| ·EF 抗菌作用机理 | 第16-17页 |
| ·EF 药物代谢动力学 | 第17页 |
| ·EF 分析检测方法 | 第17-18页 |
| 2. 立题背景与研究思路 | 第18-21页 |
| 第二章 EF 对鸡肝细胞色素P450 酶系影响的体外研究 | 第21-49页 |
| 1. 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·试剂与仪器 | 第21-23页 |
| ·鸡原代肝细胞培养体系的建立 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·培养液的配制 | 第23页 |
| ·PLL 处理细胞培养板 | 第23-24页 |
| ·鸡肝细胞的制备和原代培养 | 第24页 |
| ·鸡原代肝细胞实验分组及给药 | 第24-25页 |
| ·鸡细胞色素P450 mRNA 表达的检测 | 第25-29页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·鸡原代肝细胞总RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第26-27页 |
| ·常规PCR | 第27页 |
| ·基因片段的克隆及序列分析 | 第27-28页 |
| ·Real-Time PCR | 第28-29页 |
| ·鸡肝微粒体体外孵育体系的建立 | 第29-30页 |
| ·鸡肝微粒体的提取 | 第29页 |
| ·鸡肝微粒体总蛋白质含量的测定 | 第29页 |
| ·鸡肝微粒体体外孵育体系的建立 | 第29-30页 |
| ·鸡细胞色素P450 蛋白表达的检测 | 第30-32页 |
| ·试剂配制 | 第30-31页 |
| ·蛋白表达的检测 | 第31-32页 |
| ·鸡肝微粒体NCCR、AND、AH、ERND 活性的检测 | 第32-35页 |
| ·试剂配制 | 第32页 |
| ·NCCR 活性的测定 | 第32-33页 |
| ·AND 活性的测定 | 第33-34页 |
| ·AH 活性的测定 | 第34-35页 |
| ·ERND 活性的测定 | 第35页 |
| ·细胞色素P450 酶活性的检测 | 第35-36页 |
| ·试剂配制 | 第35页 |
| ·酶活性检测 | 第35-36页 |
| ·数据分析 | 第36页 |
| 2. 结果 | 第36-43页 |
| ·鸡原代肝细胞的一般特征 | 第36页 |
| ·EF 对鸡原代肝细胞细胞色素P450 mRNA 表达的影响 | 第36-38页 |
| ·鸡原代肝细胞总RNA | 第36-37页 |
| ·鸡原代肝细胞细胞色素P450 各基因PCR 产物 | 第37-38页 |
| ·EF 对鸡原代肝细胞细胞色素P450 mRNA 表达的影响 | 第38页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中细胞色素P450 蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE 结果 | 第38-39页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中CYP1A 和CYP3A 蛋白表达的影响 | 第39页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中NCCR、AND、AH、ERND 活性的影响 | 第39-42页 |
| ·甲醛标准曲线 | 第39-40页 |
| ·4-氨基酚标准曲线 | 第40页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中细胞色素P450 酶系活性的影响 | 第40-42页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中CYP1A 和CYP3A 酶活性的影响 | 第42-43页 |
| 3. 讨论 | 第43-49页 |
| ·鸡原代肝细胞培养体系的建立 | 第43-44页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体体外孵育体系中细胞色素P450 酶系活性的影响 | 第44-45页 |
| ·EF 对鸡肝细胞色素P450 各亚型影响的体外研究 | 第45-49页 |
| ·CYP1A | 第45-46页 |
| ·CYP2C | 第46-47页 |
| ·CYP2E | 第47页 |
| ·CYP2H | 第47页 |
| ·CYP3A | 第47-49页 |
| 第三章 EF 对鸡细胞色素P450 酶系影响的体内研究 | 第49-65页 |
| 1. 材料与方法 | 第49-54页 |
| ·试剂与仪器 | 第49-50页 |
| ·实验动物的分组及给药 | 第50-51页 |
| ·蔗糖密度梯度离心法制备鸡肝微粒体 | 第51-52页 |
| ·试剂配制 | 第51页 |
| ·实验步骤 | 第51-52页 |
| ·鸡肝微粒体蛋白质量的鉴定 | 第52页 |
| ·透射电镜 | 第52页 |
| ·Western-Blot | 第52页 |
| ·鸡肝微粒体总蛋白质的提取和定量 | 第52-53页 |
| ·鸡肝微粒体总CYP450 含量的测定 | 第53页 |
| ·鸡细胞色素P450 mRNA 表达的检测 | 第53-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第53页 |
| ·鸡肝总RNA 的提取 | 第53页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第53页 |
| ·常规PCR | 第53页 |
| ·基因片段的克隆及序列分析 | 第53页 |
| ·Real-Time PCR | 第53-54页 |
| ·鸡细胞色素P450 蛋白表达的检测 | 第54页 |
| ·鸡肝微粒体NCCR、AND、AH、ERND 活性的检测 | 第54页 |
| ·鸡细胞色素P450 酶活性的检测 | 第54页 |
| ·数据分析 | 第54页 |
| 2. 结果 | 第54-61页 |
| ·鸡肝微粒体蛋白的制备 | 第54-55页 |
| ·鸡肝微粒体形态学观察 | 第54-55页 |
| ·Western-Blot 检测鸡肝微粒体纯度 | 第55页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体总蛋白质含量的影响 | 第55-56页 |
| ·牛血清白蛋白标准曲线 | 第55-56页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体总蛋白质含量的影响 | 第56页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体总CYP450 含量的影响 | 第56-57页 |
| ·EF 对鸡肝细胞色素P450 mRNA 表达的影响 | 第57-58页 |
| ·Trizol 法提取鸡肝总RNA | 第57页 |
| ·EF 对鸡肝细胞色素P450 mRNA 表达的影响 | 第57-58页 |
| ·EF 对鸡肝细胞色素P450CYP1A、CYP3A 蛋白表达的影响 | 第58-59页 |
| ·EF 对鸡肝NCCR、AND、AH、ERND 活性的影响 | 第59-60页 |
| ·甲醛标准曲线 | 第59页 |
| ·4-氨基酚标准曲线 | 第59页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体细胞色素P450 酶系活性的影响 | 第59-60页 |
| ·EF 对鸡肝CYP1A、CYP3A 酶活性的影响 | 第60-61页 |
| 3. 讨论 | 第61-65页 |
| ·鸡肝微粒体的制备 | 第61页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体总蛋白质含量和CYP450 含量的影响 | 第61-62页 |
| ·EF 对鸡肝微粒体酶系活性的影响 | 第62-63页 |
| ·EF 对鸡肝细胞色素P450 各亚型的影响 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 综述 | 第71-82页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简介 | 第83页 |
